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[目的]优化冬虫夏草原生质体再生条件。[方法]考察纤维素酶浓度、蜗牛酶浓度、两者混合体积配比、酶解温度、酶解时间、菌龄、稳定剂及培养基等条件对冬虫夏草无性型原生质体再生率的影响。[结果]冬虫夏草无性型原生质体再生的最佳条件为：纤维素酶浓度0．5％，蜗牛酶浓度0．5％，纤维素酶与蜗牛酶体积比1：1，酶解温度35℃，酶解时间1．5h，菌龄6d，甘露醇0．5mol，③号再生培养基（蔗糖10g，葡萄糖4g，酵母粉4g，甘露醇0．5mol，pH值6．2，琼脂18g，水加至1000ml），在该最佳条件下原生质体再生率