论文部分内容阅读
[摘要] 目的 探讨甘露糖结合凝集素基因外显子Ⅰ第54号密码子多态性与细菌性阴道病及复发性细菌性阴道病易感性的关系。 方法 收集BV患者45例（BV组）、RBV患者25例（RBV组）及正常健康女性30例(對照组)的宫颈阴道灌洗液,采用ELISA法测定宫颈阴道灌洗液中的MBL浓度; 采用多聚酶连反应限制性片段长度多态性法进行MBL基因外显子Ⅰ第54号密码子多态性分析。 结果 BV组MBL浓度[（8.95±1.47） ng/mL]明显高于对照组[（4.79±1.98） ng/mL]，RBV组MBL浓度[（2.88±1.54） ng/mL]则明显低于对照组，差异均有统计学意义（P ＜0.05）。BV组基因突变率为31.11%（14/45），RBV组突变率为84.00%（21/25），对照组突变率为10.34%（3/29）。BV组该位点的突变频率高于对照组 （P ＜0.05)，RBV组该位点的突变频率显著高于对照组（P＜0.05）。 结论 阴道上皮细胞MBL基因外显子Ⅰ第54号密码子突变以及可能由其导致的阴道局部MBL浓度降低可能是RBV发生的因素。
[关键词] 甘露糖结合凝集素;基因多态性;复发性细菌性阴道病
[中图分类号] R711.31 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2011）23-38-03
Relationship between mannose binding lectin level and gene polymorphism and the susceptibility of bacterial vaginosis
HUANG Xiaomin CHEN Yonglian LIU Xiaochun ZHENG Yuhua CAI Qiaosheng
Departmemt of Gynecology, Foshan City Maternal and Child Health Hospital,Foshan 528000,China
[Abstract] Objective To study the relationship between the mannose binding lectin level and exon Ⅰ codon 54 gene polymorphism and the susceptibility of bacterial vaginosis. Methods The cervicovaginal lavage was collected from 45BV patients,25 RBV patients and 30 normalwomen.The levels of MBL from cervicovaginal lavage fluid were determined by using enzyme linked mimunosorbent assay(ELISA) and the MBL exonⅠ codon 54 gene polymorphisms was analyzed by polymerase chain reaction restriction fragment lengthpoly morphism(PCR-RFLP). Results The concentration of MBL in lavage fluid from BV patients(8.95±1.47) ng/mLwas higher than in the control group (4.79±1.98) ng/mL(P＜0.05),but it was obviousely lower in the RBV patiens(2.88±1.54) ng/mL. Genemutation frequency of codon 54 (31.11%)in BV group was higher than that in controlgroup(10.34%), and the RBV group（84.00%）was significant higher than that in control group(P＜0.05). Conclusion The decrease of MBL concentration in vagina and the mutation of MBL exon I codon 54 gene in vaginal epithelial cell which may caused by the former may be one of the susceptive factor in recurrentbacterial vaginosis.
[Key words] Mannose binding lectin;Gene polymorphism;Recurrent bacterial vaginosis
细菌性阴道病（bacterial vaginosis， BV）是育龄妇女常见的阴道感染性疾病，是以阴道乳杆菌减少或消失，革兰阴性菌和厌氧菌增多为主要微生物特点的临床症候群[1]， BV可导致许多妇科和产科并发症[1-2]，如子宫内膜炎、术后感染、胎膜早破、流产、早产及新生儿感染等。以往治疗BV的方法是阴道冲洗、口服或局部放置抗生素，短期有效，但停药后易复发。复发性BV（RBV）是指BV在1年内反复发作4次或以上。甘露糖结合凝集素 （mannose binding lectin，MBL）是人类天然免疫中非常重要的一线抗感染分子，Pellis等[3]研究发现MBL存在于女性阴道内，它可与线索细胞和真菌结合，可能在女性生殖道局部免疫防御中起着重要的作用。本研究旨在对MBL在BV及RBV的发病及机体免疫防御机制中的作用进行相关研究。
1 资料与方法
1.1 一般资料
按BV诊断标准，选取2010 年3月～ 2011年3月在笔者
所在医院妇科门诊就诊的BV患者46例作为BV组，平均年龄（31.04±4.74）岁。RBV是指1年内 BV反复发作 4次以上，曾使用其他药物和方法治疗者。RBV组：按诊断标准选择同期RBV患者25例，平均年龄（32.12±3.66）岁。正常对照组：选取同期于笔者所在医院体检中心进行健康体检的女性30例，平均年龄（32.34±3.56）岁。BV诊断标准为：①阴道分泌物均质稀薄；②阴道分泌物 pH＞4.5 ；③胺试验阳性； ④阴道线索细胞阳性，符合以上4项中的3项，即可诊断为BV。3组患者均月经规则，无肾炎、桥本氏病、系统性红斑狼疮、类风湿等自身免疫性疾病病史，3个月内未服用甾体类激素，近1周内无性生活及阴道灌洗、上药。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 3组研究对象外阴消毒后用5 mL灭菌生理盐水冲洗宫颈及阴道上段，于阴道后穹隆处吸出灌洗液 4.5～5.0 mL。1 000 r/min离心10 min，后分为上清液和细胞成分两部分， 分别置于-20℃冰箱备用。
1.2.2 MBL浓度测定 采用ELISA法测定上清液中MBL的浓度，采用人甘露糖结合凝集素试剂盒（荷兰HBT公司），实验步骤严格参照试剂盒说明书进行。
1.2.3 MBL基因多态性分析 采用盐析法提取阴道上皮细胞DNA， 采用PCR法扩增 MBL外显子ⅠDNA，采用多聚酶连反应限制性片段长度多态性法（PCR-RFLP）检测。引物序列参照Sumiya等[4]所用序列，擴增片段长度为328 bp。①PCR扩增所需物质及参数： dNTP （各10 mmol /L） 0.25μL，10 ×PCR 缓冲液 （MgCl2 浓度15 mmol/L ） 25μL， Taq酶（ 5 U/μL） 0.25μL， 模板DNA 2μL，上下游引物 （各10 pmol/μL） 0.5μL，双蒸水补至25μL。扩增条件： 94℃下预变性4 min；循环条件： 94℃变性60 s， 57℃退火30 s， 72℃延伸30 s，连续35个循环； 72℃延伸5 min；②限制性内切酶：Ban Ⅰ（20 000 U/mL） 0.5μL。反应条件： 37℃下孵育60 min； ③酶切产物分析： 采用3%琼脂糖胶凝电泳。④结果判断：正常MBL基因外显子Ⅰ的第 54位密码子存在GGC/GAC的变异， 表现为野生纯合子GGC/GGC， 杂合子 GGC/GAC 和变异型纯合子GAC/GAC。MBL基因 的PCR产物大小为 328 bp ， 野生纯合子可被 Ban Ⅰ识别，并完全切割为 246 bp和 82 bp的2条片段；突变杂合子型经酶切后得到328 bp、 246 bp 和82 bp 3条片段，而变异型纯合子限制性内切酶切位点消失，不能被切开，仍为 1条 328 bp的条带。
1.3 统计学处理
实验数据采用 SPSS11.5软件，计量资料用（）表示。BV组和对照组年龄及月经周期分布情况的比较采用x2检验，BV和 RBV组与对照组MBL浓度的比较采用t检验，BV和 RBV组与对照组 MBL基因突变频率的比较采用x2检验， P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 3组年龄分布和月经周期情况比较（表1）
2.2 3组MBL浓度比较
BV组MBL浓度为（8.95±1.47）ng/mL，明显高于对照组（4.79±1.98） ng/mL，RBV组MBL浓度为（2.88±1.54）ng/mL，则明显低于对照组，差异均有统计学意义（P ＜0.05）。
2.3 3组MBL基因外显子Ⅰ DNA的PCR检测结果
3组MBL基因外显子Ⅰ DNA扩增产物328 bp，对照组中有1例标本细胞太少未能提取到DNA，其余标本均见到清晰的 PCR产物。见图1、2。
2.4 PCR-RFLP分析结果
经x2检验，BV组该位点的突变频率高于对照组 （P＜0.05），RBV组该位点的突变频率显著高于对照组（P＜0.05） 。见表2。
3 讨论
BV是妇女常见的阴道感染性疾病，感染率高达15%～64%[5]。临床上，BV易治疗，但容易复发，30%～40%妇女可能在治疗后 3个月内复发， 而治疗后9个月的复发率则高达80%[6]。RBV的发病机制目前尚未明确，近来越来越多的研究提示BV的复发可能与阴道内某些菌群及人体免疫系统模式识别受体分子的功能异常有关。天然免疫是机体抵抗感染性疾病的首道防线。MBL实质是由肝脏分泌的一种糖蛋白， 非酶非抗体，是一种天然免疫抗感染分子。作为免疫防御系统的重要组成部分之一，主要通过激活补体和调理吞噬的方式发挥其天然的抗感染作用。 MBL系统完全活化后可对病原微生物产生直接的杀伤作用， 使细菌发生膨胀、裂解。但是编码MBL的基因存在多个突变位点， 发生突变后的MBL蛋白变得不稳定，不能发挥正常的天然免疫及防御功能，从而使疾病易感性增加，并且迁延不愈[7]。
近年来，阴道局部的天然免疫成了RBV免疫研究的热点。研究表明，MBL在阴道分泌物及血浆中均有表达。人们发现存在于女性阴道内的MBL， 可以与真菌和线索细胞结合，可能在女性生殖道的局部免疫防御中起重要作用。Giraldo等[8]对MBL的基因多态性与 RBV之间的关系做了相关研究， 结果发现MBL外显子Ⅰ的第54位密码子基因多态性与RBV的发生有关。张瑜等[7]对RBV患者阴道局部MBL的检测及基因多态性分析，发现RBV患者局部MBL的浓度明显低于正常对照组，而MBL基因的突变率为37.84 %，明显高于正常对照组，MBL基因发生突变可能是导致RBV的易感因素之一。由此阴道局部的MBL可能在女性下生殖道的局部免疫防御中发挥着重要的作用。
本研究中BV组MBL浓度明显高于对照组，推测可能是由于机体对阴道内菌群失衡的免疫防御性反应增加所致，从而有助于结合病原微生物，并通过调理吞噬和激活补体方式，达到清除病原微生物的目的。而RBV患者阴道局部MBL浓度则明显低于对照组，因此，笔者推测RBV患者阴道局部MBL浓度减少可能是导致BV反复发作的原因之一。这种浓度的减少可能与其编码基因的多态性有关。基因结构改变可能影响MBL表达水平的高低，外显子Ⅰ及启动子多位点发生突变都可以导致MBL的表达异常或缺陷，从而使其免疫调理和促吞噬作用功能低下或缺乏，最终导致机体的免疫防御能力下降，表现为阴道菌群失调， 优势菌（阴道乳杆菌）不能正常建立（减少或消失），而厌氧菌、阴道加德纳菌等致病菌生长过盛，即形成BV。本研究BV组的突变率（31.11%）高于对照组（10.34%），而RBV组的突变率更高（84.00%），因此可推测BV患者的MBL外显子Ⅰ第54号密码子突变基因可能导致MBL表达异常，从而使发挥防御功能的MBL浓度下降或功能失常，更容易反复发作。但是，BV组突变频率高于对照组，而阴道局部MBL浓度也高于对照组，本研究分析，对未发生基因突变的患者，可能由于机体对阴道菌群失衡的免疫防御反应性增加，从而导致MBL表达水平升高，进而掩盖了发生基因突变患者导致的MBL降低。
目前已有外源性MBL成功应用于外阴阴道假丝酵母菌病患者的相关报道[9]。有关阴道局部MBL浓度及其基因多态性与RBV的关系，本研究小样本结果显示可能由MBL外显子Ⅰ第54号密码子突变及可能由其导致的阴道局部MBL浓度降低可能与RBV的发生有关，这为RBV的预防和治疗提供了科学根据，MBL基因治疗有可能成为RBV治疗的新方向。
[参考文献]
[1]曹泽毅.中华妇产科学[M].第2版.北京：人民卫生出版社，2004：1352-1354.
[2] 樊尚荣，刘小平.细菌性阴道病的研究进展[J].中国妇产科临床杂志，2006，7（3）：224-226.
[3] Pellis V, De Seta F, Crovella S, et al.Mannose binding lectin and C3 act as recognition molecules forinfectious agents in the vagina [J]. Clin Expimmunol,2005,139(1):120-126.
[4] Sumiya M,SuperM,Tabona P, et al.Molecular basis of opsonic defect in immunodeficient children [J]. Lancet,1991,337(14): 1569-1570.
[5] Platz-Christensen JJ,Sundstrm E,Larsson PG.Bacterial vaginosis and cervical intraepithelial neoplasia[J].Acta Obstet Gynecol Scand,1994,73(7):586-588.
[6] 程惠娟，汪长中，乐红霞，等.细菌生物膜与细菌性阴道病复发相关性的研究[J].热带病与寄生虫学, 2005, 3（1）： 5-9.
[7] 张瑜，彭景，张怡.甘露糖结合凝集素基因多态性与复杂性细菌性阴道病易感性的关系[J].实用妇产科杂志,2010,26（10）：752-755.
[8] Giraldo PC,Babula O,Goncalves AK.Mannose-binding-lectingene poymorphism,vulvovaginal candidiasis, and bacterial vaginosis[J].Obstet Gynecol,2007,109(5):1123-1128.
[9] Valdimarsson H,Stefansson M,Vikingsdottir T,et al.Reconstit ution of opsonizⅠng activity by infusion of mannan-binding-lectin (MBL) to MBL deficient humans[J].Scand J Immunoi,1998, 48(2):116-123.
（收稿日期：2011-11-22）
[关键词] 甘露糖结合凝集素;基因多态性;复发性细菌性阴道病
[中图分类号] R711.31 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2011）23-38-03
Relationship between mannose binding lectin level and gene polymorphism and the susceptibility of bacterial vaginosis
HUANG Xiaomin CHEN Yonglian LIU Xiaochun ZHENG Yuhua CAI Qiaosheng
Departmemt of Gynecology, Foshan City Maternal and Child Health Hospital,Foshan 528000,China
[Abstract] Objective To study the relationship between the mannose binding lectin level and exon Ⅰ codon 54 gene polymorphism and the susceptibility of bacterial vaginosis. Methods The cervicovaginal lavage was collected from 45BV patients,25 RBV patients and 30 normalwomen.The levels of MBL from cervicovaginal lavage fluid were determined by using enzyme linked mimunosorbent assay(ELISA) and the MBL exonⅠ codon 54 gene polymorphisms was analyzed by polymerase chain reaction restriction fragment lengthpoly morphism(PCR-RFLP). Results The concentration of MBL in lavage fluid from BV patients(8.95±1.47) ng/mLwas higher than in the control group (4.79±1.98) ng/mL(P＜0.05),but it was obviousely lower in the RBV patiens(2.88±1.54) ng/mL. Genemutation frequency of codon 54 (31.11%)in BV group was higher than that in controlgroup(10.34%), and the RBV group（84.00%）was significant higher than that in control group(P＜0.05). Conclusion The decrease of MBL concentration in vagina and the mutation of MBL exon I codon 54 gene in vaginal epithelial cell which may caused by the former may be one of the susceptive factor in recurrentbacterial vaginosis.
[Key words] Mannose binding lectin;Gene polymorphism;Recurrent bacterial vaginosis
细菌性阴道病（bacterial vaginosis， BV）是育龄妇女常见的阴道感染性疾病，是以阴道乳杆菌减少或消失，革兰阴性菌和厌氧菌增多为主要微生物特点的临床症候群[1]， BV可导致许多妇科和产科并发症[1-2]，如子宫内膜炎、术后感染、胎膜早破、流产、早产及新生儿感染等。以往治疗BV的方法是阴道冲洗、口服或局部放置抗生素，短期有效，但停药后易复发。复发性BV（RBV）是指BV在1年内反复发作4次或以上。甘露糖结合凝集素 （mannose binding lectin，MBL）是人类天然免疫中非常重要的一线抗感染分子，Pellis等[3]研究发现MBL存在于女性阴道内，它可与线索细胞和真菌结合，可能在女性生殖道局部免疫防御中起着重要的作用。本研究旨在对MBL在BV及RBV的发病及机体免疫防御机制中的作用进行相关研究。
1 资料与方法
1.1 一般资料
按BV诊断标准，选取2010 年3月～ 2011年3月在笔者
所在医院妇科门诊就诊的BV患者46例作为BV组，平均年龄（31.04±4.74）岁。RBV是指1年内 BV反复发作 4次以上，曾使用其他药物和方法治疗者。RBV组：按诊断标准选择同期RBV患者25例，平均年龄（32.12±3.66）岁。正常对照组：选取同期于笔者所在医院体检中心进行健康体检的女性30例，平均年龄（32.34±3.56）岁。BV诊断标准为：①阴道分泌物均质稀薄；②阴道分泌物 pH＞4.5 ；③胺试验阳性； ④阴道线索细胞阳性，符合以上4项中的3项，即可诊断为BV。3组患者均月经规则，无肾炎、桥本氏病、系统性红斑狼疮、类风湿等自身免疫性疾病病史，3个月内未服用甾体类激素，近1周内无性生活及阴道灌洗、上药。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 3组研究对象外阴消毒后用5 mL灭菌生理盐水冲洗宫颈及阴道上段，于阴道后穹隆处吸出灌洗液 4.5～5.0 mL。1 000 r/min离心10 min，后分为上清液和细胞成分两部分， 分别置于-20℃冰箱备用。
1.2.2 MBL浓度测定 采用ELISA法测定上清液中MBL的浓度，采用人甘露糖结合凝集素试剂盒（荷兰HBT公司），实验步骤严格参照试剂盒说明书进行。
1.2.3 MBL基因多态性分析 采用盐析法提取阴道上皮细胞DNA， 采用PCR法扩增 MBL外显子ⅠDNA，采用多聚酶连反应限制性片段长度多态性法（PCR-RFLP）检测。引物序列参照Sumiya等[4]所用序列，擴增片段长度为328 bp。①PCR扩增所需物质及参数： dNTP （各10 mmol /L） 0.25μL，10 ×PCR 缓冲液 （MgCl2 浓度15 mmol/L ） 25μL， Taq酶（ 5 U/μL） 0.25μL， 模板DNA 2μL，上下游引物 （各10 pmol/μL） 0.5μL，双蒸水补至25μL。扩增条件： 94℃下预变性4 min；循环条件： 94℃变性60 s， 57℃退火30 s， 72℃延伸30 s，连续35个循环； 72℃延伸5 min；②限制性内切酶：Ban Ⅰ（20 000 U/mL） 0.5μL。反应条件： 37℃下孵育60 min； ③酶切产物分析： 采用3%琼脂糖胶凝电泳。④结果判断：正常MBL基因外显子Ⅰ的第 54位密码子存在GGC/GAC的变异， 表现为野生纯合子GGC/GGC， 杂合子 GGC/GAC 和变异型纯合子GAC/GAC。MBL基因 的PCR产物大小为 328 bp ， 野生纯合子可被 Ban Ⅰ识别，并完全切割为 246 bp和 82 bp的2条片段；突变杂合子型经酶切后得到328 bp、 246 bp 和82 bp 3条片段，而变异型纯合子限制性内切酶切位点消失，不能被切开，仍为 1条 328 bp的条带。
1.3 统计学处理
实验数据采用 SPSS11.5软件，计量资料用（）表示。BV组和对照组年龄及月经周期分布情况的比较采用x2检验，BV和 RBV组与对照组MBL浓度的比较采用t检验，BV和 RBV组与对照组 MBL基因突变频率的比较采用x2检验， P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 3组年龄分布和月经周期情况比较（表1）
2.2 3组MBL浓度比较
BV组MBL浓度为（8.95±1.47）ng/mL，明显高于对照组（4.79±1.98） ng/mL，RBV组MBL浓度为（2.88±1.54）ng/mL，则明显低于对照组，差异均有统计学意义（P ＜0.05）。
2.3 3组MBL基因外显子Ⅰ DNA的PCR检测结果
3组MBL基因外显子Ⅰ DNA扩增产物328 bp，对照组中有1例标本细胞太少未能提取到DNA，其余标本均见到清晰的 PCR产物。见图1、2。
2.4 PCR-RFLP分析结果
经x2检验，BV组该位点的突变频率高于对照组 （P＜0.05），RBV组该位点的突变频率显著高于对照组（P＜0.05） 。见表2。
3 讨论
BV是妇女常见的阴道感染性疾病，感染率高达15%～64%[5]。临床上，BV易治疗，但容易复发，30%～40%妇女可能在治疗后 3个月内复发， 而治疗后9个月的复发率则高达80%[6]。RBV的发病机制目前尚未明确，近来越来越多的研究提示BV的复发可能与阴道内某些菌群及人体免疫系统模式识别受体分子的功能异常有关。天然免疫是机体抵抗感染性疾病的首道防线。MBL实质是由肝脏分泌的一种糖蛋白， 非酶非抗体，是一种天然免疫抗感染分子。作为免疫防御系统的重要组成部分之一，主要通过激活补体和调理吞噬的方式发挥其天然的抗感染作用。 MBL系统完全活化后可对病原微生物产生直接的杀伤作用， 使细菌发生膨胀、裂解。但是编码MBL的基因存在多个突变位点， 发生突变后的MBL蛋白变得不稳定，不能发挥正常的天然免疫及防御功能，从而使疾病易感性增加，并且迁延不愈[7]。
近年来，阴道局部的天然免疫成了RBV免疫研究的热点。研究表明，MBL在阴道分泌物及血浆中均有表达。人们发现存在于女性阴道内的MBL， 可以与真菌和线索细胞结合，可能在女性生殖道的局部免疫防御中起重要作用。Giraldo等[8]对MBL的基因多态性与 RBV之间的关系做了相关研究， 结果发现MBL外显子Ⅰ的第54位密码子基因多态性与RBV的发生有关。张瑜等[7]对RBV患者阴道局部MBL的检测及基因多态性分析，发现RBV患者局部MBL的浓度明显低于正常对照组，而MBL基因的突变率为37.84 %，明显高于正常对照组，MBL基因发生突变可能是导致RBV的易感因素之一。由此阴道局部的MBL可能在女性下生殖道的局部免疫防御中发挥着重要的作用。
本研究中BV组MBL浓度明显高于对照组，推测可能是由于机体对阴道内菌群失衡的免疫防御性反应增加所致，从而有助于结合病原微生物，并通过调理吞噬和激活补体方式，达到清除病原微生物的目的。而RBV患者阴道局部MBL浓度则明显低于对照组，因此，笔者推测RBV患者阴道局部MBL浓度减少可能是导致BV反复发作的原因之一。这种浓度的减少可能与其编码基因的多态性有关。基因结构改变可能影响MBL表达水平的高低，外显子Ⅰ及启动子多位点发生突变都可以导致MBL的表达异常或缺陷，从而使其免疫调理和促吞噬作用功能低下或缺乏，最终导致机体的免疫防御能力下降，表现为阴道菌群失调， 优势菌（阴道乳杆菌）不能正常建立（减少或消失），而厌氧菌、阴道加德纳菌等致病菌生长过盛，即形成BV。本研究BV组的突变率（31.11%）高于对照组（10.34%），而RBV组的突变率更高（84.00%），因此可推测BV患者的MBL外显子Ⅰ第54号密码子突变基因可能导致MBL表达异常，从而使发挥防御功能的MBL浓度下降或功能失常，更容易反复发作。但是，BV组突变频率高于对照组，而阴道局部MBL浓度也高于对照组，本研究分析，对未发生基因突变的患者，可能由于机体对阴道菌群失衡的免疫防御反应性增加，从而导致MBL表达水平升高，进而掩盖了发生基因突变患者导致的MBL降低。
目前已有外源性MBL成功应用于外阴阴道假丝酵母菌病患者的相关报道[9]。有关阴道局部MBL浓度及其基因多态性与RBV的关系，本研究小样本结果显示可能由MBL外显子Ⅰ第54号密码子突变及可能由其导致的阴道局部MBL浓度降低可能与RBV的发生有关，这为RBV的预防和治疗提供了科学根据，MBL基因治疗有可能成为RBV治疗的新方向。
[参考文献]
[1]曹泽毅.中华妇产科学[M].第2版.北京：人民卫生出版社，2004：1352-1354.
[2] 樊尚荣，刘小平.细菌性阴道病的研究进展[J].中国妇产科临床杂志，2006，7（3）：224-226.
[3] Pellis V, De Seta F, Crovella S, et al.Mannose binding lectin and C3 act as recognition molecules forinfectious agents in the vagina [J]. Clin Expimmunol,2005,139(1):120-126.
[4] Sumiya M,SuperM,Tabona P, et al.Molecular basis of opsonic defect in immunodeficient children [J]. Lancet,1991,337(14): 1569-1570.
[5] Platz-Christensen JJ,Sundstrm E,Larsson PG.Bacterial vaginosis and cervical intraepithelial neoplasia[J].Acta Obstet Gynecol Scand,1994,73(7):586-588.
[6] 程惠娟，汪长中，乐红霞，等.细菌生物膜与细菌性阴道病复发相关性的研究[J].热带病与寄生虫学, 2005, 3（1）： 5-9.
[7] 张瑜，彭景，张怡.甘露糖结合凝集素基因多态性与复杂性细菌性阴道病易感性的关系[J].实用妇产科杂志,2010,26（10）：752-755.
[8] Giraldo PC,Babula O,Goncalves AK.Mannose-binding-lectingene poymorphism,vulvovaginal candidiasis, and bacterial vaginosis[J].Obstet Gynecol,2007,109(5):1123-1128.
[9] Valdimarsson H,Stefansson M,Vikingsdottir T,et al.Reconstit ution of opsonizⅠng activity by infusion of mannan-binding-lectin (MBL) to MBL deficient humans[J].Scand J Immunoi,1998, 48(2):116-123.
（收稿日期：2011-11-22）