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摘 要：鸡新城疫（ND）又称亚洲鸡瘟、伪鸡瘟或非典型鸡瘟，是由鸡新城疫病毒（NDV）引起的急性、高度接触性传染病，同时感染其他病原菌，如大肠杆菌而引起的内源性感染，导致蛋鸡产蛋最下降，加大育成鸡死亡率，给养鸡业造成严重的经济损失。基于此，笔者介绍了某养鸡户发生一例鸡新城疫与大肠杆菌病混合感染的情况，通过及时的诊断和治疗，有效控制了疫情，现报告如下，以供参阅。
关键词：鸡新城疫；大肠杆菌；混合感染；诊断；防治
一、发病情况
2016年9月，某养鸡户饲养的育成鸡约2000羽，于80日龄时突然发病，随后病死数量增多，发病后一周，共死亡96只，死亡率4.8%。病鸡临床发病特征主要为产蛋率下降，呼吸道感染，肿头、闭眼、流泪和腹泻等，该养鸡户采用阿莫西林、电解多维饮水，饲料中加入黄芪多糖、新霉素等药物治疗，效果均不理想，遂前来就诊。
二、临床症状
经现场勘查，病鸡体温升高达41℃，精神颓废，羽毛蓬乱无光泽，翅膀下垂，食欲减退或废绝，表现出显著呼吸道症状，张口伸颈，呼吸时发出“呼噜”’声，气喘，呼吸困难，有喘鸣声，咳嗽，口腔中分泌物增多，有摇头和吞咽动作，试图将粘性分泌物排出；随着病情加重发展，病鸡眼睑肿胀，腿、翅麻痹，歪头，出现神经症状，下痢，排黄白色或黄绿色稀粪，冠和肉髯发绀，眼半闭或全闭似昏睡状态，病鸡相继出现死亡。
三、剖检病变
病死鸡皮肤干燥，脱水明显，喉头和气管黏膜充血、出血，嗉囊内充满混浊而又酸臭的液体；内脏浆膜和粘膜出血，心包膜浑浊，增厚，附有大量的纤维素样渗出物；鸡腺胃乳头肿胀，有显著出血点，肌胃角质层下有轻微的出血点及出血斑，有的形成不规则的溃疡；肝脏肿大，肝脏包膜上被搜灰白色薄膜，脾、肾多有充血和瘀血；小肠黏膜有出血点，盲肠扁桃体肿胀、出血，直肠黏膜出血；泄殖腔黏膜出血，其内积白色石灰样物。
四、实验室检验
1.细菌学检查：（1）涂片镜检：取病变的卵泡、肝、脾、心包膜涂片，常规的革兰氏染色，镜检可见单个或成对的两端饨圆、中等大小的粉红色革长氏阴性杆苗。（2）细菌分离培养：无菌采取病死鸡的心、血肝、脾、肾和输卵管内容物等分别接种在普通琼脂、麦康凯琼脂和SS琼脂培养基上，在37℃条件下培养24 h观察，在普通瓊脂培养基上形成乳白色、湿润、扁平微凸起的小菌落；在麦康凯培养基上形成深红色、湿润、不规则圆形菌落：在SS琼脂培养基上没有菌落生长。（3）生化试验：将纯培养物接种于生化培养管中，可发酵葡萄糖、乳搪、甘露醇、麦芽糖、蔗糖，产酸产气。VP试验阴性，MR阳性。产生靛基质，不产生硫化氢，不分解尿素，不液化明胶，甲基红试验阳性。（4）药敏试验：取分离菌按常规纸片法进行药物敏感试验，结果该菌对丁胺卡那霉素、氟哌酸、恩诺沙星、新霉素、强力霉素高度敏感，为临床治疗提供了药物选用依据。
2.新城疫检查：（1）病毒分离培养。无菌采取病死鸡的脾、脑、肺等病料混合磨碎，加生理盐水制成5-10倍组织乳剂，加抗生素作用2-4h，经离心沉淀，取上清液0.1mL接种于发育8-10日龄鸡胚的尿囊腔内。接种2-5d后鸡胚死亡。取尿囊液，用制备好的0.5%-1%红细胞液与之进行红细胞凝集试验。红胞凝集试验为阳性者，再用已知的新城疫阳性血清进行红细胞凝集抑制试验。（2）血清学诊断。应用红细胞凝集抑制试验鉴定待检病鸡血清中的特异性抗体。凡未接种新城疫疫苗的鸡，血清凝集抑制抗体在1：40以上稀释皮，能抑制已知病毒与红细胞起凝集作用者，即可诊断为新城疫阳性鸡。a.扩散试脸：分别取上述组织悬液和死亡鸡胚尿囊液与NDV标准阳性血清作琼脂扩散试脸；同时无菌抽取病鸡血，分离血清与NDV标准抗原作琼扩试脸，为阳性；b.血凝和血凝抑制试验：取上述鸡胚尿囊液与NDV标准阳性血清作血凝和血凝抑制试脸，为阳性。（3）动物试验：取病料悬浮液和鸡胚尿囊液分别接种20日龄的雏鸡，每只鸡肌肉注射0.2 mL，同时设立对照组，接种鸡于接种后3-6d发病死亡，死前表现的临床症状和死后的病理解剖特征和自然发病病例相似。
根據临床症状、剖检变化及实验室检查结果，可确诊该养鸡场发生鸡新城疫与大肠杆菌病混合感染。
五、防治措施
1.鉴于新城疫发病急和传播快，需立即将病鸡与假定健康鸡群隔离。对污染场地和圈舍用消毒剂进行喷洒消毒。同时，紧急接种新城疫I系疫苗5羽份/羽，全群鸡接种本场分离出的大肠杆菌制成的灭活苗1 mL/羽。用苗的同时在饲料中加入水溶性多种维生素及电解质药物，给予鸡群，以增强鸡体的免疫力，提高免疫效果；在饮水中分别加入环丙沙星1. 5 g/L、恩诺沙星100 mg/L，每天集中饮用2次，连用4 d。
2.加强护理，病鸡常出现厌食症状，为此可将原来投喂的大鸡料转为小鸡料，并在饲料中添加多种维生素、氨基酸、香味素及板蓝根，以提高适口性。提高舍内温度。坚持每天冲洗栏舍一次，保持舍内空气清新，减少臭味，并使用消毒药剂进行消毒，防止病原体扩散。
通过采取上述措施后，鸡群精神明显好转，采食量增加，死亡减少直至停止。有效控制了该鸡场疫情。
六、小结与讨论
1.该场对疫情未引起足够重视，对外来车辆、人员消毒不严，再加上炎热多雨季节，天气潮湿，鸡只容易感染大肠杆菌病，造成机体局部免疫和体液免疫水平下降，难以抵御外来新城疫强病毒株的入侵，导致新城疫的发生。大肠杆菌是一种条件性病原菌，在卫生条件差、通风不良、饲养管理不当时往往引发疾病，也常成为许多传染病的继发性疾病，使症状复杂，病情加重，诊治困难。
2.用新城疫I系疫苗接种时正确的注射部位是翅膀无毛肌肉处，但临床上多采用腹部肌肉注射，因而导致免疫失败，发生鸡新城疫。对于新城疫的防治，关键是做好免度接种。建议5日龄时用鸡新城疫及传支二联菌饮水免疫，30日龄用新城皮I系疫苗3羽份在翅膀无毛肌肉处接种。在免疫接种后3-4d不能消毒，以确保免疫质量。
3.完善兽医卫生防疫制度。平时要加强对鸡群的饲养管理，认真落实鸡场兽医卫生防疫措施，建立健全免疫接种档案。认真落实预防免疫和消毒工作，改善鸡舍环境条件，及时清除鸡粪和垫料，做好鸡舍通风换气。育雏阶段鸡舍内过分干燥是雏鸡感染大肠杆菌病的重要原因。由于鸡舍内干燥，导致舍内尘埃飞扬，大肠杆菌附着于尘埃上进入鸡的呼吸道，从而引发疫病。因此在育雏阶段，保证鸡舍内有合适的温度和湿度能够最大程度上防控大肠杆菌病的发生。
关键词：鸡新城疫；大肠杆菌；混合感染；诊断；防治
一、发病情况
2016年9月，某养鸡户饲养的育成鸡约2000羽，于80日龄时突然发病，随后病死数量增多，发病后一周，共死亡96只，死亡率4.8%。病鸡临床发病特征主要为产蛋率下降，呼吸道感染，肿头、闭眼、流泪和腹泻等，该养鸡户采用阿莫西林、电解多维饮水，饲料中加入黄芪多糖、新霉素等药物治疗，效果均不理想，遂前来就诊。
二、临床症状
经现场勘查，病鸡体温升高达41℃，精神颓废，羽毛蓬乱无光泽，翅膀下垂，食欲减退或废绝，表现出显著呼吸道症状，张口伸颈，呼吸时发出“呼噜”’声，气喘，呼吸困难，有喘鸣声，咳嗽，口腔中分泌物增多，有摇头和吞咽动作，试图将粘性分泌物排出；随着病情加重发展，病鸡眼睑肿胀，腿、翅麻痹，歪头，出现神经症状，下痢，排黄白色或黄绿色稀粪，冠和肉髯发绀，眼半闭或全闭似昏睡状态，病鸡相继出现死亡。
三、剖检病变
病死鸡皮肤干燥，脱水明显，喉头和气管黏膜充血、出血，嗉囊内充满混浊而又酸臭的液体；内脏浆膜和粘膜出血，心包膜浑浊，增厚，附有大量的纤维素样渗出物；鸡腺胃乳头肿胀，有显著出血点，肌胃角质层下有轻微的出血点及出血斑，有的形成不规则的溃疡；肝脏肿大，肝脏包膜上被搜灰白色薄膜，脾、肾多有充血和瘀血；小肠黏膜有出血点，盲肠扁桃体肿胀、出血，直肠黏膜出血；泄殖腔黏膜出血，其内积白色石灰样物。
四、实验室检验
1.细菌学检查：（1）涂片镜检：取病变的卵泡、肝、脾、心包膜涂片，常规的革兰氏染色，镜检可见单个或成对的两端饨圆、中等大小的粉红色革长氏阴性杆苗。（2）细菌分离培养：无菌采取病死鸡的心、血肝、脾、肾和输卵管内容物等分别接种在普通琼脂、麦康凯琼脂和SS琼脂培养基上，在37℃条件下培养24 h观察，在普通瓊脂培养基上形成乳白色、湿润、扁平微凸起的小菌落；在麦康凯培养基上形成深红色、湿润、不规则圆形菌落：在SS琼脂培养基上没有菌落生长。（3）生化试验：将纯培养物接种于生化培养管中，可发酵葡萄糖、乳搪、甘露醇、麦芽糖、蔗糖，产酸产气。VP试验阴性，MR阳性。产生靛基质，不产生硫化氢，不分解尿素，不液化明胶，甲基红试验阳性。（4）药敏试验：取分离菌按常规纸片法进行药物敏感试验，结果该菌对丁胺卡那霉素、氟哌酸、恩诺沙星、新霉素、强力霉素高度敏感，为临床治疗提供了药物选用依据。
2.新城疫检查：（1）病毒分离培养。无菌采取病死鸡的脾、脑、肺等病料混合磨碎，加生理盐水制成5-10倍组织乳剂，加抗生素作用2-4h，经离心沉淀，取上清液0.1mL接种于发育8-10日龄鸡胚的尿囊腔内。接种2-5d后鸡胚死亡。取尿囊液，用制备好的0.5%-1%红细胞液与之进行红细胞凝集试验。红胞凝集试验为阳性者，再用已知的新城疫阳性血清进行红细胞凝集抑制试验。（2）血清学诊断。应用红细胞凝集抑制试验鉴定待检病鸡血清中的特异性抗体。凡未接种新城疫疫苗的鸡，血清凝集抑制抗体在1：40以上稀释皮，能抑制已知病毒与红细胞起凝集作用者，即可诊断为新城疫阳性鸡。a.扩散试脸：分别取上述组织悬液和死亡鸡胚尿囊液与NDV标准阳性血清作琼脂扩散试脸；同时无菌抽取病鸡血，分离血清与NDV标准抗原作琼扩试脸，为阳性；b.血凝和血凝抑制试验：取上述鸡胚尿囊液与NDV标准阳性血清作血凝和血凝抑制试脸，为阳性。（3）动物试验：取病料悬浮液和鸡胚尿囊液分别接种20日龄的雏鸡，每只鸡肌肉注射0.2 mL，同时设立对照组，接种鸡于接种后3-6d发病死亡，死前表现的临床症状和死后的病理解剖特征和自然发病病例相似。
根據临床症状、剖检变化及实验室检查结果，可确诊该养鸡场发生鸡新城疫与大肠杆菌病混合感染。
五、防治措施
1.鉴于新城疫发病急和传播快，需立即将病鸡与假定健康鸡群隔离。对污染场地和圈舍用消毒剂进行喷洒消毒。同时，紧急接种新城疫I系疫苗5羽份/羽，全群鸡接种本场分离出的大肠杆菌制成的灭活苗1 mL/羽。用苗的同时在饲料中加入水溶性多种维生素及电解质药物，给予鸡群，以增强鸡体的免疫力，提高免疫效果；在饮水中分别加入环丙沙星1. 5 g/L、恩诺沙星100 mg/L，每天集中饮用2次，连用4 d。
2.加强护理，病鸡常出现厌食症状，为此可将原来投喂的大鸡料转为小鸡料，并在饲料中添加多种维生素、氨基酸、香味素及板蓝根，以提高适口性。提高舍内温度。坚持每天冲洗栏舍一次，保持舍内空气清新，减少臭味，并使用消毒药剂进行消毒，防止病原体扩散。
通过采取上述措施后，鸡群精神明显好转，采食量增加，死亡减少直至停止。有效控制了该鸡场疫情。
六、小结与讨论
1.该场对疫情未引起足够重视，对外来车辆、人员消毒不严，再加上炎热多雨季节，天气潮湿，鸡只容易感染大肠杆菌病，造成机体局部免疫和体液免疫水平下降，难以抵御外来新城疫强病毒株的入侵，导致新城疫的发生。大肠杆菌是一种条件性病原菌，在卫生条件差、通风不良、饲养管理不当时往往引发疾病，也常成为许多传染病的继发性疾病，使症状复杂，病情加重，诊治困难。
2.用新城疫I系疫苗接种时正确的注射部位是翅膀无毛肌肉处，但临床上多采用腹部肌肉注射，因而导致免疫失败，发生鸡新城疫。对于新城疫的防治，关键是做好免度接种。建议5日龄时用鸡新城疫及传支二联菌饮水免疫，30日龄用新城皮I系疫苗3羽份在翅膀无毛肌肉处接种。在免疫接种后3-4d不能消毒，以确保免疫质量。
3.完善兽医卫生防疫制度。平时要加强对鸡群的饲养管理，认真落实鸡场兽医卫生防疫措施，建立健全免疫接种档案。认真落实预防免疫和消毒工作，改善鸡舍环境条件，及时清除鸡粪和垫料，做好鸡舍通风换气。育雏阶段鸡舍内过分干燥是雏鸡感染大肠杆菌病的重要原因。由于鸡舍内干燥，导致舍内尘埃飞扬，大肠杆菌附着于尘埃上进入鸡的呼吸道，从而引发疫病。因此在育雏阶段，保证鸡舍内有合适的温度和湿度能够最大程度上防控大肠杆菌病的发生。