抑制GATA-3基因表达的RNAi载体构建和筛选

• 作 者: 周兵 郑铭 王妍 杜芝燕 王彤
• 机 构: 首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科,军事医学科学院基础医学研究所
• 出 处: 中国实验血液学杂志
• 发表日期: 2007年6期
• 关键词: GATA-3 Th2细胞极化 RNAi质粒载体 RNA干扰 基因表达 GATA-3 Th2 cell polarization RNAi plasmid
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目,编号30471871,国家和北京市新世纪百千万人才工程培养经费个人资助项目

GATA-3在Th2免疫网络中起至关重要的作用。本研究的目的是构建和筛选出能够高效、特异性抑制GATA-3基因表达的siRNA质粒载体。在小鼠P815细胞中转染以GATA-3作为靶基因的PSi338、PSi717和PSil232的干涉质粒载体，通过RT—PCR和Westernblot方法分别从转录和蛋白质水平观察它们对GATA-3基因表达的影响。结果表明：PSi338、PSi717均能明显抑制P815细胞中GATA-3mRNA的表达和GATA-3蛋白的合成。结论：成功地构建和筛选出两条高效、特异性抑制GA