【摘 要】
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目的研究核糖体蛋白L22(RPL22)基因表达沉默对细胞周期蛋白D1表达的影响。方法体外培养人肺动脉平滑肌细胞(PASMC),分为空白对照组(A组)、内皮素1(ET~(-1))诱导组(B组)、siRN
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院急诊中心,
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目的研究核糖体蛋白L22(RPL22)基因表达沉默对细胞周期蛋白D1表达的影响。方法体外培养人肺动脉平滑肌细胞(PASMC),分为空白对照组(A组)、内皮素1(ET~(-1))诱导组(B组)、siRNA-RPL22转染组(C组)、siRNA-RPL22~+ET~(-1)组(D组)、siRNA转染组(E组)和siRNA~+ET~(-1)组(F组)。采用RT-PCR和Western blot分别检测RPL22、细胞周期蛋白D1的mRNA和蛋白表达,细胞计数试剂盒检测PASMC增殖情况。结果与A组和E组相比,C组RPL22、细胞周期蛋白D1mRNA和蛋白表达均降低,PASMC增殖减少(P<0.05)。经ET~(-1)诱导后,D组细胞周期蛋白D1mRNA和蛋白表达较B组和F组降低(P<0.05)。结论 RPL22表达沉默能有效抑制PASMC增殖,可能与下调细胞周期蛋白D1表达有关。
Objective To study the effect of silencing ribosomal protein L22 (RPL22) gene expression on cyclin D1 expression. Methods Human pulmonary artery smooth muscle cells (PASMCs) were cultured in vitro and divided into blank control group (group A), ET - 1 induced group (group B), siRNA - RPL22 transfected group (group C) siRNA-RPL22 ~ + ET ~ (-1) group (D), siRNA transfection group (E) and siRNA ~ + ET ~ (-1) group (F group). The mRNA and protein expression of RPL22 and cyclin D1 were detected by RT-PCR and Western blot, respectively. The cell counting kit was used to detect the proliferation of PASMC. Results Compared with group A and group E, the mRNA and protein expressions of RPL22 and cyclin D1 were decreased and the proliferation of PASMC was decreased in group C (P <0.05). After induced by ET ~ (-1), the expression of cyclin D1 mRNA and protein in group D was lower than those in group B and F (P <0.05). Conclusion Silencing RPL22 can effectively inhibit the proliferation of PASMC, which may be related to the down-regulation of cyclin D1 expression.
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