肤康合剂制备及质量控制

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  1.长江大学附属第一医院,湖北 荆州 434000;2.荆州市第三人民医院,湖北 荆州 434000;3.荆州市中心医院,湖北 荆州 434020
  摘要:目的 研制肤康合剂,并建立该制剂的质量控制方法。方法 采用薄层色谱法鉴别肤康合剂中黄芩、白花蛇舌草,高效液相色谱法测定制剂中黄芩苷、芍药苷的含量。色谱柱:Agilent EclipseXDB-C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 ?m)。黄芩苷流动相为甲醇-2%醋酸(55∶45),流速1.0 mL/min,检测波长315 nm;芍药苷流动相为甲醇-水(35∶65),流速0.8 mL/min,检测波长230 nm。柱温为常温,灵敏度为0.08 AUFS,进样量20 ?L。结果 薄层色谱能明显检出黄芩、白花蛇舌草。制剂中黄芩苷和芍药苷的含量分别为2.103~2.145 g/L、1.569~1.650 g/L。黄芩苷进样量在0.54~4.32 ?g范围内呈良好线性关系,平均回收率为99.80%,RSD=1.76%(n=6);芍药苷进样量在0.14~0.70 ?g范围内呈良好线性关系,平均回收率为99.10%,RSD=1.08%(n=6)。结论 该制备工艺简单,质量控制方法准确可靠、重复性好。
  关键词:肤康合剂;质量控制;薄层色谱法;高效液相色谱法;黄芩苷;芍药苷
  DOI:10.3969/j.issn.1005-5304.2012.11.018
  中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2012)11-0046-03
  肤康合剂[鄂药制字(2001)第LZ01-057号]系荆州市中心医院在总结多年临床经验的基础上,根据中医药理论研制的医院制剂,由蒲公英、土茯苓、黄芩等15味中药材组成,具有祛风止痒、活血化瘀等功效,临床主要用于各类皮炎(脂溢性皮炎、神经性皮炎、接触性皮炎)、湿疹、痤疮、银屑病等皮肤病的治疗[1-3]。为更好地控制该制剂的内在质量,保证其临床疗效,本试验采用薄层色谱法(TLC)对制剂中的黄芩、白花蛇舌草进行定性鉴别,用高效液相色谱法(HPLC)测定该制剂中有效成分黄芩苷、芍药苷的含量,现报道如下。
  1 仪器与试药
  Agilent-1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司), Agilent-1100系列四元泵,Agilent VWD检测器,Chemstation色谱工作站;超声清洗机KQ-100E型(工作频率40 kHz,昆山市超声仪器有限公司)。
  黄芩苷对照品(批号110715- 200212)、芍药苷对照品(批号110736-200629)、齐墩果酸对照品(批号110709-200505)均购自中国药品生物制品检定所;肤康合剂(荆州市中心医院制备,规格250 mL,批号060713、060904、061116、070102);甲醇为色谱纯;试验用水为多效蒸馏水;其余试剂均为分析纯。
  2 处方及制备
  处方:蒲公英33.3 g,土茯苓100 g,青蒿33.3 g,柴胡33.3 g,土鳖虫16.67 g,蒲黄33.3 g,桔梗20 g,甘草20 g,黄芩53.3 g,白鲜皮53.3 g,槐花33.3 g,牡丹皮33.3 g,夏枯草33.3 g,赤芍100 g,白花蛇舌草66.6 g,蔗糖及防腐剂适量,制成1 000 mL。
  制备方法:将15味药加入约10倍量水,煎煮沸腾2 h后,倒出煎出液,再向药渣中加入适量体积水煎煮2次,煎煮时间均为2 h,合并3次煎出液,静置,过滤,滤液浓缩至约600 mL,加适量蔗糖及防腐剂,搅拌使溶解,用水调至1 000 mL,煮沸,过滤,分装,即得。
  3 质量控制
  3.1 性状
  本品为棕褐色的液体;味苦、微甜。
  3.2 薄层色谱鉴别
  3.2.1 黄芩的鉴别 取本品10 mL,蒸干,残渣加水15 mL搅拌使溶解,滤过,滤液加稀盐酸调节pH值至1~2,用醋酸乙酯振摇提取2次,每次10 mL,合并醋酸乙酯液,蒸干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为供试品溶液。另按处方比例和工艺同法制成缺黄芩的阴性对照液备用。再取黄芩苷对照品,加甲醇制成1.0 g/L的对照品溶液。照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一部)附录Ⅵ B]试验,吸取上述3种溶液各5 ?L,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以2%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中,在与对照品色谱相应位置上,显相同颜色的斑点,而阴性对照无干扰。
  3.2.2 白花蛇舌草的鉴别 取本品20 mL,加醋酸乙酯20 mL振摇萃取,分取醋酸乙酯液,水浴蒸干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为供试品溶液。另按处方比例和工艺同法制成缺白花蛇舌草的阴性对照液备用。再取齐墩果酸对照品,加甲醇制成1.0 g/L的对照品溶液。照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一部)附录Ⅵ B]试验,吸取上述3种溶液各10 ?L,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-丙酮-醋酸乙酯(12∶3∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,放入烤箱,在110 ℃烘烤5 min。供试品色谱中,在与对照品色谱相应位置上,显相同颜色的斑点,而阴性对照无干扰。
  3.3 一般检查
  相对密度应不低于1.08;pH值应在4.0~7.0之间;其他应符合《中华人民共和国药典》合剂项下有关各项规定。
  4 含量测定
  4.1 色谱条件
  色谱柱:Agilent EclipseXDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,
  5 ?m)。黄芩苷流动相为甲醇-2%醋酸(55∶45),流速1.0 mL/min,检测波长315 nm;芍药苷流动相为甲醇-水(35∶65),流速0.8 mL/min,检测波长230 nm。柱温为常温,灵敏度为0.08 AUFS,进样量20 ?L。   4.2 溶液的制备
  4.2.1 对照品溶液的制备 ①精密称取黄芩苷对照品(105 ℃干燥至恒重)10.8 mg,置10 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为黄芩苷对照品储备液。精密量取该储备液适量,加甲醇制成每1 mL含36 ?g黄芩苷的对照品溶液。②精密称取芍药苷对照品(105 ℃干燥至恒重)5.6 mg,置10 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为芍药苷对照品储备液。精密量取该储备液适量,加甲醇制成每1 mL含28 ?g芍药苷的对照品溶液。
  4.2.2 供试品溶液的制备 ①精密量取肤康合剂5.0 mL,置25 mL量瓶中,加50%乙醇适量,超声处理(频率40 kHz,功率100 W)30 min,放冷,加50%乙醇至刻度,摇匀,静置。精密量取上清液2.0 mL,置25 mL量瓶中,加50%乙醇至刻度,摇匀,用0.45 ?m的微孔滤膜过滤,弃去初滤液,即得黄芩苷供试品溶液。②精密量取肤康合剂2.0 mL,置25 mL量瓶中,加50%乙醇适量,超声处理(频率40 kHz,功率100 W)30 min,放冷,加50%乙醇至刻度,摇匀,静置。精密量取上清液1.0 mL,置10 mL量瓶中,加50%乙醇至刻度,摇匀,用0.45 ?m的微孔滤膜过滤,弃去初滤液,即得芍药苷供试品溶液。
  4.2.3 阴性对照溶液的制备 按处方比例和工艺,分别制成不含黄芩及赤芍、牡丹皮的阴性样品,再按供试品溶液制备方法制得2种阴性对照溶液。
  4.3 系统适用性试验
  分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各20 ?L,按“4.1”项下色谱条件,分别注入液相色谱仪,记录色谱图,结果见图1、4.4 标准曲线的建立
  4.4.1 黄芩苷 分别精密量取黄芩苷对照品储备液一定量,用甲醇稀释成黄芩苷质量浓度分别为27、54、108、162、216 mg/L的标准溶液。分别进样20 ?L,测定峰面积,并以峰面积对进样量进行线性回归,得到回归方程Y=13.81X-13.15, r=0.999 9(n=5)。表明黄芩苷进样量在0.54~4.32 ?g范围内与峰面积呈良好的线性关系。
  4.4.2 芍药苷 分别精密量取芍药苷对照品储备液一定量,用甲醇稀释成芍药苷质量浓度分别为7、14、21、28、35 mg/L的标准溶液。分别以20 ?L进样,测定峰面积,并以峰面积对进样量进行线性回归,得到回归方程:Y=1 942X-10.06,r=0.999 9(n=5)。表明芍药苷进样量在0.14~0.70 ?g范围内与峰面积呈良好的线性关系。
  4.5 精密度试验
  分别精密吸取同一份供试品溶液,每次20 ?L,重复进样6次,结果黄芩苷及芍药苷平均峰面积的RSD分别为0.94%、0.49%(n=6),表明精密度良好。
  4.6 重复性试验
  取061116批号的样品各6份,按“4.2.2”项下方法平行制备供试品溶液各6份,按“4.1”项下色谱条件分别进样测定。结果黄芩苷及芍药苷峰面积的RSD分别为1.27%、1.09% (n=6),表明重复性较好。
  4.7 稳定性试验
  取061116批号的同一供试品溶液,分别于配制后0、2、4、6、8、12 h,按“4.1”项下色谱条件进样测定,结果黄芩苷及芍药苷峰面积的RSD分别为1.23%、0.92%(n=6)。结果表明,2种被测成分在12 h内均稳定。
  4.8 加样回收率试验
  将定量对照品加入到已知含量的样品中,按供试品溶液制备方法处理后,依法测定,并计算回收率和RSD,结果见表1。
  4.9 样品含量测定
  分别精密吸取黄芩苷对照品溶液、供试品溶液各20 ?L,注入液相色谱仪,测定峰面积,按外标法[4]计算含量。每批样品测2次,求平均值,结果见表2。根据4批样品测定结果,暂定每1 mL肤康合剂中含黄芩苷不少于2.1 mg,芍药苷不少于1.5 mg。
  5 讨论
  本制剂中赤芍、牡丹皮的主要有效成分均为芍药苷,因此本试验所测为总芍药苷的含量。
  根据黄芩苷及其他成分的理化性质,在HPLC测定中,对黄芩苷检测波长进行了选择,参照文献[4-6],在280 nm波长处测定时,发现阴性样品对黄芩苷的测定有干扰,而在315 nm波长处测定时,阴性样品对黄芩苷的测定几无干扰,且有较大吸收,故选择315 nm作为黄芩苷测定检测波长。
  本试验对HPLC流动相系统组成和比例作了比较,对甲醇-水-磷酸[4-6]、甲醇-醋酸和乙腈-磷酸[7]、甲醇-水等多种溶剂系统进行了选择,根据分离情况,选用以甲醇-2%醋酸(55∶45)测定黄芩苷,甲醇-水(35∶65)测定芍药苷。由色谱图可见,样品峰形对称,分离效果良好,且对柱效要求不高,简单快捷。
  本试验制备供试品溶液时,分别考察了甲醇、乙醇及超声时间对提取效果的影响,结果表明,用甲醇和乙醇超声提取效果无明显差异;在分别超声处理样品25、30、35、40 min后测定,结果表明,超声处理样品30 min时待测成分已被充分提取。由于甲醇毒性大,因此,本试验选用乙醇作溶媒超声处理样品30 min来提取待测成分。
  本试验表明,采用TLC对肤康合剂中黄芩和白花蛇舌草进行定性鉴别,采用HPLC对黄芩苷和芍药苷含量进行测定,精密度高,稳定性和重复性好,黄芩苷和芍药苷在进样范围内均呈良好线性关系,涵盖了样品进样相应组分的含量,回收率也较理想,因此认为,本方法简便快速、灵敏度高、结果准确、重复性好,可作为肤康合剂质量控制标准。
  参考文献:
  [1] 王仑,柳兵,丁小珍,等.肤康合剂治疗脂溢性皮炎120例[J].皮肤病与性病,2006,28(2):23-24.
  [2] 丁小珍,王伦.肤康合剂治疗寻常痤疮的临床疗效观察[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志,2006,5(4):227-228.
  [3] 王仑,柳兵,丁小珍,等.肤康合剂联合郁金银屑片治疗寻常性银屑病42例[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志,2007,6(3):179.
  [4] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[S].2005:211-212.
  [5] 路玫,谢东.高效液相色谱法测定利咽口服液中黄芩苷的含量[J].中国医院药学杂志,2000,20(6):330-331.
  [6] 王海宁,杨翰.HPLC法测定桔贝合剂中黄芩苷的含量[J].中国药房, 2007,18(27):2132-2133.
  [7] 苏强,任慧俊.反相高效液相色谱法测定心脑康胶囊中芍药苷的含量[J].中国医院药学杂志,2002,22(12):736-738.
  (收稿日期:2012-03-26,编辑:陈静)
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