大熊猫和朱鹮胶质细胞源神经营养因子(GDNF)的克隆及表达研究

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胶质细胞源神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)是Lin等人于1993年从B49胶质细胞系中首次分离并纯化得到的.研究结果表明,GDNF对于神经系统具有很强的保护及恢复作用,对视网膜变性的感光细胞具有挽救作用.此外,GDNF在外周组织如肾脏的发育和精子的发生等方面,具有显著的调节功能.该项研究经PCR引物设计后,以大熊猫和朱鹮的基因组DNA为模板,克隆了大熊猫和朱鹮的GDNF成熟蛋白基因.序列比较表明,大熊猫和朱鹮的GDNF基因与人、猕猴、大鼠、小鼠及鸡的GDNF具有非常高的同源性,分别为86.8﹪和5.4﹪、86.8﹪和76.6﹪、82.3﹪和68.7﹪、83.1﹪和67.9﹪,70.1﹪和94.3﹪.将大熊猫和朱鹮的GDNF基因片段分别克隆至pGEX-4T-3表达载体,并经IPTG诱导,表达出了预期大小的蛋白,该蛋白用Glutathione Sepharose 4B MicroSpin Column进行了纯化.
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