【摘 要】
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迟钝爱德华氏菌是一种胞内寄生的鱼类致病菌,能引起多种鱼类感染发病,目前严重危害各种经济养殖鱼种。本课题基于反向疫苗学的基本原理,以迟钝爱德华氏菌全基因组序列为基础,
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迟钝爱德华氏菌是一种胞内寄生的鱼类致病菌,能引起多种鱼类感染发病,目前严重危害各种经济养殖鱼种。本课题基于反向疫苗学的基本原理,以迟钝爱德华氏菌全基因组序列为基础,利用生物信息学方法预测候选保护性抗原。对筛选的候选抗原进行大规模克隆、表达及纯化,进一步用斑马鱼动物模型评价其对迟钝爱德华氏菌的特异性保护作用。实验中成功纯化到36个候选抗原蛋白,同时在斑马鱼上完成了相对免疫保护率分析实验,共获得6个相对免疫保护率达50％以上的重组蛋白,其中FlgD和FliD的相对免疫保护率达70％左右。后续对免疫保护力较好的FlgD蛋白在临床鱼种大菱鲆上进行了免疫效果分析,并利用斑马鱼遗传背景清楚的特点进行了相关的的免疫应答机理研究,结果表明FlgD蛋白是一个较好的保护性抗原,并且其免疫应答过程以细胞免疫为主,这为后续迟钝爱德华氏菌疫苗开发奠定了基础。
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