精源性新基因ssp411在男性生殖细胞中的功能研究

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本文为探讨精子细胞特异表达的新基因ssp411在男性生殖细胞中的功能,通过构建体外氧化损伤模型,研究不同大小的人ssp411基因在细胞中的表达定位,设计、构建并筛选以ssp411基因为靶点的RNA干扰表达载体siRNA—ssp411s,以及研究人ssp411mRNA在不育男性精子细胞中的差异表达等多个实验方向,同时借助了细胞转染、实时荧光定量PCR等技术手段,对ssp411基因的功能有了初步的认识和了解:通过次黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶体系建立氧化损伤的细胞模型,发现ssp411 mRNA的表达与氧化损伤的程度和时间均相关,因此推测ssp411基因可能具有硫氧还蛋白酶活性;根据ssp411基因片段在细胞中的表达定位从细胞质转移到了细胞核,故推测ssp411基因可能通过翻译后修饰作用,在精子成熟过程中保存了下来,可能在以后的受精及胚胎发育过程中发挥作用;通过构建及共转染技术,筛选出体外干扰效率可达70%以上的有效干扰质粒,从而为建立ssp411体内转染,进一步阐明ssp411基因的生殖生物学功能打好基础;对人精子在ssp411编码区的研究表明,ssp411的表达在男性精子细胞mRNA中存在多态性,且ssp411基因的表达下降可能是精子发生氧化损伤的一个分子标志,可为男性不育的病因诊断提供新的思路。
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