【摘 要】
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新鲜猪脑提取液经过Sephadex G-50分子筛层析,S-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析,mono-S FPLC及HPLC分离得到分子量为21k-Da的蛋白.根据N-末端和水解片断的氨基酸序列分析
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新鲜猪脑提取液经过Sephadex G-50分子筛层析,S-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析,mono-S FPLC及HPLC分离得到分子量为21k-Da的蛋白.根据N-末端和水解片断的氨基酸序列分析,该蛋白与磷脂酰乙醇氨结合蛋白(PEBP亦称RKIP)家族有同源性.对小鼠腹腔注射吗啡后,再经侧脑室或尾静脉注射该蛋白均能显著抑制吗啡引起的抗伤害作用.用Trypsin将此蛋白降解,微量HPLC分离,结合活性检测,找到一个活性片断(21KD-13肽).利用噬菌体展示技术,筛选到此蛋白的可溶性单链可变区抗体片断(scfv),在小鼠侧脑室注入scfv可显著增强吗啡的抗伤害作用.这些都提示脑内存在的21 kD蛋白具有拮抗吗啡伤害作用,而且可能是一种新的抗阿片肽前体物.
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