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口蹄疫(Foot-and-mouth disease，FMD)是引起偶蹄类动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，是世界性重大动物疫病之一，被国际兽医局(the Office des Epizooties，OIE)列为烈性传染病之首。目前，使用传统灭活疫苗免疫和扑杀相结合仍是防控口蹄疫的主要措施。但是仍然不能控制FMDV的感染与传播，这就促使人们寻求有效的措施防控口蹄疫。
RNA干扰(RNA interference，RNAi)是最近几年发展起来的一种新的能在体外有效抑制病毒复制的方法，是由与靶基因序列同源的dsRNA引发的广泛存在于动植物中的序列特异性基因转录后的沉默过程。腺病毒载体因具有感染细胞种类多、感染效率高、外源基因表达水平高且既适于体外又适于体内研究等特点而被作为转基因载体。
本研究根据siRNA设计原则，分别选择O型FMDV的L、VP1和2B基因上保守序列作为可能的干扰位点，设计、合成了3个siRNAs，分别将这些siRNAs克隆到pSIREN-Shuttle中，获得3个siRNA重组表达载体pShuttle-L、pShuttle-VP1和pShuttle-2B。用限制性内切酶PI-Sce I和I-Ceu I双酶切3个siRNA重组表达载体和腺病毒质粒载体pAdeno-X，利用体外连接法获得了重组质粒。经过PCR扩增、酶切鉴定及序列测定，证明成功构建了重组腺病毒质粒pAdeno-L、pAdeno-VP1和pAdeno--2B。
利用脂质体转染法，将Pac I线性化的重组腺病毒质粒pAdeno-VP1转染HEK293细胞，包装成重组腺病毒rAdeno-VP1。经过PCR鉴定正确后大量增殖，增殖的重组腺病毒经过浓缩、纯化得到了高滴度的病毒。用终点稀释法测定病毒滴度为2.5×109pfu/mL。
将重组腺病毒rAdeno-VP1以MOI分别为5、10、50的量感染细胞密度为1×105/ml的：IBRS-2细胞，吸附12h后，再加入10OTCIDso的FMDV O/HKN/2003，间隔12h观察一次细胞，并在BHK-21细胞上测定加入FMDV 12h、24h、36h、48h、60h、72h时细胞培养上清液中：FMDV的TCIDso，同时设立病毒对照(不加腺病毒，只加FMDV)、空白对照。结果显示，随着重组腺病毒量的增加对FMDV复制的抑制效果增强。重组腺病毒量MOI为10和50的抑制时间可以持续三天，在72h后抑制效果减弱；MOI为5对FMDV只可以抑制一天。