神经生长抑制因子GIF(MT-Ⅲ)分离纯化、结构与功能研究

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该论文系统研究了猪脑神经生长抑制因子Cu<,4>Zn<,3>MT-Ⅲ(GIF)的分离、纯化过程并将其二级结构与其它金属硫蛋白做了对比;研究了GIF与脱金属碳酸酐酶之间的锌转移动力学;首次用FT-IR和FT-Raman方法研究了GIF的二级结构;此外还首次研究了GIF与OH<·>自由基和O<,2><-·>自由基在体外的相互作用.主要创新点如下:[1]建立了由猪脑中分离、提取及纯化神经生长抑制因子的新方法.[2]用去卷积红外光谱以及激光喇曼光谱首次测定了猪脑MT-Ⅲ的二级结构.其中26-28﹪是β转角和半转角结构,13-14﹪为3<,10>螺旋,47-49﹪为无规肽链.11-12﹪为β折叠片结构.[3]首次研究了猪脑Cu<,4>Zn<,3>MT-Ⅲ中Zn<2+>转移到脱金属碳酸酐酶(apoCA)的转移动力学,发现其转移速率比其他MT-Ⅰ/Ⅱ快.表明Cu<,4>Zn<,3>MT-Ⅲ除具有神经生长抑制功能外,在脑组织中可能还有储存、运送Zn<2+>离子功能.[4]用脉冲辐解和核黄素-蛋氨酸光照方法研究了Cu<,4>Zn<,3>MT-Ⅲ和OH自由基及O<,2><-·>自由基的作用,首次揭示了该蛋白具有清除OH<·>和O<,2><-·>自由基的功能.表明Cu<,4>Zn<,3>MT-Ⅲ能防止OH<·>和O<,2><-·>自由基对脑组织的氧化性损伤.MT-Ⅲ的下调降低了脑组织防御OH<·>、O<,2><-·>伤害的能力,这可能和老年痴 呆症的发病相关.
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