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瘙痒和疼痛是机体遭遇危险或不良状况时产生的对身体所遭受伤害的警告信号，目的是提醒机体远离伤害刺激。但是长时间的疼痛和瘙痒会严重降低人的生活品质，甚至给人的身体造成伤害。关于痛、痒安全且有效的治疗一直是临床亟待解决的难题。MJS是一种天然产物，本研究发现MJS可以有效抑制小鼠TRPV4（Transient receptor potential V4）通路激活诱发的痛、痒反应，随通过建立多种疼痛与瘙痒模型，进一步探究MJS对实验性疼痛和瘙痒的调节作用及其可能的作用机制。
目的：
探讨MJS对小鼠试验性疼痛和瘙痒的调节作用及其可能的作用机制。
方法：
1.小鼠急性疼痛模型：分别采用热板法（48℃、52℃、56℃）、热浸润甩尾法（48℃、50℃、52℃）、冰醋酸（0.6%）扭体法、福尔马林足爪注射法制备疼痛模型。将小鼠随机分为模型组、MJS组。在实验开始前30min，模型组尾静脉注射生理盐水，MJS组尾静脉注射MJS（7.5mg/kg）。在实验过程中，热板法和热浸润甩尾法分别记录小鼠痛阈反应时间；冰醋酸扭体法记录小鼠注射冰醋酸后15min内的扭体次数；福尔马林实验记录小鼠0-10min、10-60min内抬起右后足（包括舔舐右后足）的累计时间（s）。
2.小鼠急性瘙痒模型：分别采用颈背部皮下注射组胺（Histmine，hist）、C48/80（Compound48/80）、氯喹（Chloroquine，CQ）、牛肾上腺髓质8-22肽（Bovine adrenal medulla8-22，BAM8-22）的方法制备小鼠急性痒模型，颈背部皮下注射致痒物质Hist（200μg/只）、C48/80（100μg/只），CQ（200μg/只）、BAM8-22（50μg/只）前30分钟尾静脉注射给予MJS（7.50mg/kg），记录统计颈背部皮下注射致痒物质后30分钟内每5分钟的小鼠后肢抓挠的次数及30分钟内小鼠抓挠的总次数。
3.小鼠颊部注射TRPV4通路激动剂痛痒模型：取20只小鼠，随机分为2组：模型组、MJS组。在实验开始前30min分别注射生理盐水和MJS（7.5mg/kg），在小鼠的颊部注射TRPV4通路特异性激动剂GSK101679A（GSK101,10μg/只），观察记录小鼠30min内的行为学视频，分别统计单侧前肢擦拭颊部以及后肢抓挠颊部的次数，并记录时间。
4.采用药理学手段干预小鼠慢性AEW瘙痒模型：取50只小鼠，随机分为5组：正常组、AEW模型组、H1受体拮抗剂氯苯那敏（Chlorpheniramine，CLP，400mg/kg）组、TRPV4通路拮抗剂HC067047（250ng/kg）组、MJS（7.50mg/kg）组，采用连续颈背部皮肤涂布化学刺激剂的方法制备小鼠慢性干性皮肤病瘙痒模型（Acetone ether and water，AEW），使用在丙酮和乙醚1：1混合液中完全浸润的棉花敷在小鼠颈背部剃毛后的裸露皮肤30秒，之后立即用蒸馏水浸润的棉花敷在相同位置15秒。以上操作每天两次，连续重复7天，每天采用视频记录瘙痒情况。从造模第4天起每天腹腔注射连续注射5天，注射时间为每天第一次造模前90分钟，记录行为学视频的时间是每天第一次造模前60分钟。实验结束后分别取小鼠造模处皮肤组织进行HE染色观察病理组织学变化；取小鼠L2、L3背根神经节（Dorsal root ganglion，DRG）免疫荧光检测TRPV4受体的表达；免疫印迹（Western blot，WB）检测造模处皮肤组织TRPV4受体的表达。
结果：
MJS（7.50mg/kg）能显著延长小鼠热板法和热浸润法的痛阈值，显著减少小鼠扭体实验中的扭体次数，显著减少福尔马林实验中小鼠足部抬起的累计时间；MJS（7.50mg/kg）能显著抑制Hist、C48/80、CQ、BAM8-22引起的小鼠急性瘙痒的抓挠次数；MJS（7.50mg/kg）能显著抑制由GSK101颊部注射引起的擦拭次数和抓挠次数；CLP（400mg/kg）、HC067047（250ng/kg）、MJS（7.50mg/kg）能显著抑制AEW慢性瘙痒引起的抓挠。免疫荧光结果显示，在L2、L3段DRG神经元细胞中，AEW模型组TRPV4平均荧光强度明显高于正常组，而与AEW模型组相比，CLP组、HC067047组和MJS组均无统计学差异。WB结果显示，皮肤组织AEW模型组TRPV1的灰度值高于正常组，而与AEW模型组相比，CLP组、HC067047组和MJS组均未见差异。
结论：
MJS能够抑制热板法、热浸润甩尾法、扭体实验和福尔马林实验引起的疼痛反应；MJS能抑制Hist、C48/80、CQ、BAM8-22引起的急性瘙痒；MJS能够抑制GSK101引发的痛痒反应；MJS能抑制AEW模型引起的慢性瘙痒；TRPV4在AEW所致慢性瘙痒中起重要作用；MJS抑制瘙痒作用可能与抑制TRPV4通路有关，待进一步深入研究。
目的：
探讨MJS对小鼠试验性疼痛和瘙痒的调节作用及其可能的作用机制。
方法：
1.小鼠急性疼痛模型：分别采用热板法（48℃、52℃、56℃）、热浸润甩尾法（48℃、50℃、52℃）、冰醋酸（0.6%）扭体法、福尔马林足爪注射法制备疼痛模型。将小鼠随机分为模型组、MJS组。在实验开始前30min，模型组尾静脉注射生理盐水，MJS组尾静脉注射MJS（7.5mg/kg）。在实验过程中，热板法和热浸润甩尾法分别记录小鼠痛阈反应时间；冰醋酸扭体法记录小鼠注射冰醋酸后15min内的扭体次数；福尔马林实验记录小鼠0-10min、10-60min内抬起右后足（包括舔舐右后足）的累计时间（s）。
2.小鼠急性瘙痒模型：分别采用颈背部皮下注射组胺（Histmine，hist）、C48/80（Compound48/80）、氯喹（Chloroquine，CQ）、牛肾上腺髓质8-22肽（Bovine adrenal medulla8-22，BAM8-22）的方法制备小鼠急性痒模型，颈背部皮下注射致痒物质Hist（200μg/只）、C48/80（100μg/只），CQ（200μg/只）、BAM8-22（50μg/只）前30分钟尾静脉注射给予MJS（7.50mg/kg），记录统计颈背部皮下注射致痒物质后30分钟内每5分钟的小鼠后肢抓挠的次数及30分钟内小鼠抓挠的总次数。
3.小鼠颊部注射TRPV4通路激动剂痛痒模型：取20只小鼠，随机分为2组：模型组、MJS组。在实验开始前30min分别注射生理盐水和MJS（7.5mg/kg），在小鼠的颊部注射TRPV4通路特异性激动剂GSK101679A（GSK101,10μg/只），观察记录小鼠30min内的行为学视频，分别统计单侧前肢擦拭颊部以及后肢抓挠颊部的次数，并记录时间。
4.采用药理学手段干预小鼠慢性AEW瘙痒模型：取50只小鼠，随机分为5组：正常组、AEW模型组、H1受体拮抗剂氯苯那敏（Chlorpheniramine，CLP，400mg/kg）组、TRPV4通路拮抗剂HC067047（250ng/kg）组、MJS（7.50mg/kg）组，采用连续颈背部皮肤涂布化学刺激剂的方法制备小鼠慢性干性皮肤病瘙痒模型（Acetone ether and water，AEW），使用在丙酮和乙醚1：1混合液中完全浸润的棉花敷在小鼠颈背部剃毛后的裸露皮肤30秒，之后立即用蒸馏水浸润的棉花敷在相同位置15秒。以上操作每天两次，连续重复7天，每天采用视频记录瘙痒情况。从造模第4天起每天腹腔注射连续注射5天，注射时间为每天第一次造模前90分钟，记录行为学视频的时间是每天第一次造模前60分钟。实验结束后分别取小鼠造模处皮肤组织进行HE染色观察病理组织学变化；取小鼠L2、L3背根神经节（Dorsal root ganglion，DRG）免疫荧光检测TRPV4受体的表达；免疫印迹（Western blot，WB）检测造模处皮肤组织TRPV4受体的表达。
结果：
MJS（7.50mg/kg）能显著延长小鼠热板法和热浸润法的痛阈值，显著减少小鼠扭体实验中的扭体次数，显著减少福尔马林实验中小鼠足部抬起的累计时间；MJS（7.50mg/kg）能显著抑制Hist、C48/80、CQ、BAM8-22引起的小鼠急性瘙痒的抓挠次数；MJS（7.50mg/kg）能显著抑制由GSK101颊部注射引起的擦拭次数和抓挠次数；CLP（400mg/kg）、HC067047（250ng/kg）、MJS（7.50mg/kg）能显著抑制AEW慢性瘙痒引起的抓挠。免疫荧光结果显示，在L2、L3段DRG神经元细胞中，AEW模型组TRPV4平均荧光强度明显高于正常组，而与AEW模型组相比，CLP组、HC067047组和MJS组均无统计学差异。WB结果显示，皮肤组织AEW模型组TRPV1的灰度值高于正常组，而与AEW模型组相比，CLP组、HC067047组和MJS组均未见差异。
结论：
MJS能够抑制热板法、热浸润甩尾法、扭体实验和福尔马林实验引起的疼痛反应；MJS能抑制Hist、C48/80、CQ、BAM8-22引起的急性瘙痒；MJS能够抑制GSK101引发的痛痒反应；MJS能抑制AEW模型引起的慢性瘙痒；TRPV4在AEW所致慢性瘙痒中起重要作用；MJS抑制瘙痒作用可能与抑制TRPV4通路有关，待进一步深入研究。