乳腺癌细胞异位表达GPIbα促进肿瘤侵袭和转移

• 作 者: 章成
• 机 构: 安徽医科大学
• 出 处: 安徽医科大学
• 发表日期: 2020年期
• 关键词: 乳腺癌

乳腺癌由于逐年增加的发生率及死亡率已然成为威胁全球女性生命健康的癌症类型，而影响乳腺癌预后的主要因素是乳腺癌的侵袭转移，寻找影响乳腺癌侵袭转移的关键靶点已成为研究热点问题。GPIbα是表达于血小板细胞膜上的关键粘附因子，近年来多项研究发现在结肠癌、胃癌细胞、乳腺癌细胞等多种类型恶性肿瘤细胞表面检测到GPIbα蛋白的表达，其在乳腺癌细胞表面的高表达是否影响肿瘤细胞侵袭转移恶性进展是本课题探究的重点。
　　目的：探讨GPIbα在各类型乳腺癌组织和细胞表面的表达情况及GPIbα蛋白的表达对乳腺癌细胞侵袭迁徙行为的影响。
　　方法：1.通过免疫组化法检测GPIbα在人乳腺癌临床组织及相应癌旁组织的表达情况，通过分析组织来源的年龄、肿瘤大小、淋巴结转移的病理特征情况判断GPIbα的表达与临床病理相关性。
　　2.通过细胞免疫组化，WB及qPCR技术分别检测GPIbα在乳腺细胞MCF-10A，乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-453表面的表达情况。利用transwell小室实验检测MCF-7，MDA-MB-453，MCF-7细胞侵袭迁移能力。
　　3.利用质粒转染过表达技术MDA-MB-453细胞表面过表达GPIbα，再利用transwell小室实验检测癌细胞侵袭转移能力的变化，WB检测GPIbα表达对转移标志分子MMP-2，MMP-9表达影响情况。
　　4.siRNA技术敲低MCF-7表面的GPIbα，再利用transwell小室实验检测癌细胞侵袭迁徙能力的变化，WB检测GPIbα表达对转移标志分子MMP-2，MMP-9表达影响情况。
　　5.Hoechst活细胞染色实验检测乳腺癌细胞表达GPIbα与HUVEC内皮细胞粘附能力的变化情况。
　　6.通过WB检测EMT标志物蛋白E-钙粘蛋白和波形蛋白的表达变化。
　　结果：1.临床乳腺癌组织中GPIbα的表达与相应癌旁组织相比呈现具有统计学意义高表达。GPIbα的高表达与乳腺癌组织的大于2cm、淋巴结转移呈相关性。
　　2.与MCF-10A乳腺细胞相比，MCF-7、MDA-MB-453乳腺癌细胞表面高表达GPIbα，具有统计学意义。细胞侵袭迁徙能力与与GPIbα蛋白表达量成正比。
　　3.MDA-MB-453乳腺癌细胞过表达GPIbα后，癌细胞侵袭迁徙能力呈显著性升高，转移相关分子MMP-2、MMP-9表达也呈现升高。
　　4.MCF-7细胞siRNA降低细胞表面GPIbα蛋白表达后，细胞侵袭迁徙能力呈现明显下降，同时转移标志分子MMP-2、MMP-9表达明显下降。
　　5.MDA-MB-453细胞过表达GPIbα后，与HUVEC细胞粘附能力增高，同时MCF-7细胞降低GPIbα表达后，与HUVEC细胞粘附能力随之下降。
　　6.EMT标志蛋白波形蛋白在乳腺癌细胞表面的表达与GPIbα的高表达呈正比，同时E-钙粘蛋白在乳腺癌细胞表面的表达与GPIbα的高表达呈反比。
　　结论：乳腺癌临床组织及细胞表面高表达GPIbα，乳腺癌细胞高表达的GPIbα可能通过EMT机制促进乳腺癌的侵袭迁徙。