基于微物控芯片电泳的结合珠蛋白显型分析

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本研究分为两个部分。第一部分是利用微流控芯片电泳结合激光诱导荧光检测的方法对人血清结合珠蛋白(Hp)的两种不同亚型(1-1型和2-2型)进行分离分析。Hp1-1和Hp2-2用异硫氰酸荧光素(FITC)进行标记,然后在SDS处理的玻璃微流控芯片上进行分离。通过对pH值,缓冲溶液浓度,样品中SDS浓度,电压的优化,Hp1-1和Hp2-2两种亚型能够在150 s内区分,并且获得了较低的检出限,分别是0.39和0.62μg/mL。实验中还将这种方法应用于健康人和肝癌病人血清的分析。同时该方法也证实了肝癌病人Hp浓度的降低。快速高效、简单易行和在实际样品分析中的应用,使得本方法在疾病的诊断和蛋白质组学研究中有着潜在的优势。第二部分,采用共价键合的方式将大黄酚光敏剂包裹在上转换荧光纳米材料的二氧化硅壳层中,合成了一种新型的、多功能的光敏剂,即UCNP@SiO2(chrysophanol)-NH2。同时在壳层表面接上叶酸。利用叶酸与肿瘤细胞中高度表达的叶酸受体之间的亲和力,将纳米材料靶向目标物。在近红外光激发下,纳米材料将近红外光转换为可见光,然后可见光进一步激发光敏剂产生单线态氧去杀死肿瘤细胞。这种方法被应用于叶酸受体阳性肿瘤细胞例如人宫颈癌细胞(Hela细胞)的研究,并经过共聚焦荧光显微成像,由实验现象可以得出一个结论--合成的这种物质可导致Hela细胞的凋亡。
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