脑脊液病原菌诊断芯片的研制及临床应用研究

来源 :山东省医学科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lywy0201
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目的:目前,中枢神经系统(CNS)感染的病原菌诊断仍然靠形态学检查、脑脊液细菌培养以及组织学和免疫学的方法,这些方法缺乏敏感性、特异性,而且费时费力,尤其是厌氧菌和结核杆菌造成的感染,更难检测.由于不同的细菌有不同的抗菌素敏感性,及时准确的诊断才能进行成功的治疗,而早期治疗能降低并发症和死亡率,因此,建立一种早期平行快速诊断方法至关重要.分子生物学技术的发展,为从基因水平诊断脑脊液中的病原菌奠定了基础,使建立一种早期快速的诊断方法成为可能.我们通过查找脑脊液中常见病原菌的基因序列,设计出通用引物和各自特异性寡核苷酸探针,合成后将探针以点样仪点阵于尼龙膜,制备一种寡核苷酸微阵列,用于CNS感染的病原菌诊断性研究,以期为临床提供一种平行、快速、敏感、特异的诊断方法.结论:以最新下载的细菌16S rRNA基因序列,进行聚类分析设计通用引物和特异性探针,用地高辛标记PCR产物,建立起膜微阵列技术,没有放射性污染,不需要酶切和测序,对于脑脊液病原菌能平行、快速、敏感、特异的诊断,其灵敏性和特异性高,符合诊断试剂的质量标准,具有良好的临床应用前景.
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