论文部分内容阅读
目的：检测脂多糖(LPS)与三磷酸腺苷(ATP)处理单核细胞THP-1模拟炎症反应后P2X7受体与NALP3表达情况,了解P2X7受体及NALP3的相互关系；同时用钾离子拮抗剂格列本脲、Pannexin-1拮抗剂CBX及青蒿琥酯处理对照组与实验组,进一步探讨P2X7受体影响NALP3表达的可能机制。 方法：(1) FCM检测炎症反应中细胞THP1表达P2X7受体及NALP3的情况。(2)MTT法检测LPS、ATP处理细胞后细胞生长及凋亡情况,选择最适作用浓度。(3) qPCR、FCM、Western blotting分别检测LPS、ATP处理细胞模拟炎症反应后,P2X7、NALP3表达的变化,同时通过格列本脲、CBX及青蒿琥酯分析P2X7影响NALP3及IL-1的可能机制。 结果：(1)LPS与ATP共同作用细胞后,P2X7与NALP3的表达明显高于单个药物的处理(2)钾离子拮抗剂格列本脲处理已用LPS孵育过的细胞,发现P2X7受体与NALP3表达变化不大；但作用ATP孵育或LPS与ATP共同孵育过的细胞,P2X7受体与NALP3表达明显降低(3)Pannexin-1拮抗剂CBX处理LPS单独处理的细胞,P2X7受体与NALP3表达变化不大；但作用ATP孵育或LPS与ATP共同孵育过的细胞,P2X7受体与NALP3表达明显降低(4)青蒿琥酯处理ATP单独处理细胞,P2X7受体与NALP3表达变化不大；但作用LPS孵育或LPS与ATP共同孵育过的细胞,P2X7受体与NALP3表达明显降低(5)格列本脲、CBX与青蒿琥酯共同处理LPS与ATP共同孵育过的细胞, P2X7受体与NALP3表达降低 结论：炎症反应中P2X7受体与NALP3均有表达,并且在ATP的持续刺激下,P2X7受体与NALP3均明显升高,但当用钾离子拮抗剂格列本脲或Pannexin-1拮抗剂CBX处理,其表达明显降低,说明P2X7受体可能是通过钾离子通道或Pannexin-1非特异孔道调节NALP3炎症小体；用青蒿琥酯、格列本脲及CBX共同作用,P2X7受体与NALP3的表达与分别单独用药处理没有明显区别,说明青蒿琥酯通过P2X7受体-NALP3途径发挥抗炎作用的可能性不大。本研究结果提示P2X7受体在炎症反应中起着重要的作用,可作为炎症治疗和预防的潜在靶点。