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端粒位于染色体末端，它包括了端粒DNA和端粒结合蛋白两个组分，它功能的正常维持对于细胞生长和分裂有着重要的作用。端粒DNA的延伸依赖于端粒酶，而端粒正常结构和功能的维持则依赖于多种相关的端粒结合蛋白及端粒酶相关蛋白，因此，端粒结合蛋白及端粒酶相关蛋白是端粒功能实现至关重要的因素。 端粒酶相关蛋白p28的定位和功能研究主要针对本实验室在大鼠肝脏细胞中发现的一种新型的端粒单链结合蛋白p28，针对其在细胞核内的亚细胞定位以及其表达所导致的功能做了相关探索。通过检测p28蛋白与端粒的定位关系，发现p28蛋白与大鼠细胞内的端粒标志蛋白Rap1蛋白的共定位比例很低，说明p28蛋白虽然有端粒单链结合能力，但它并不是一个常驻于端粒的蛋白。我们检测了p28蛋白与端粒酶的定位关系，发现p28蛋白在大多数时候不会与端粒酶共定位，但在某些特定的时候，p28蛋白与端粒酶能够发生很高比例（超过50％）的共定位，并且体外pull-down实验说明p28蛋白与端粒酶存在直接的作用，这说明了p28蛋白与端粒酶在体内确实存在功能上的关联。近年的研究表明Cajal bodies是端粒酶组装和成熟的场所，为了了解p28蛋白在细胞内是如何与端粒酶发生相互结合的，我们检测了p28蛋白、端粒酶和Cajal bodies三者的共定位关系，发现p28蛋白能够与端粒酶共同聚集于Cajal bodies中，表明p28蛋白与端粒酶是在Cajal bodies中完成组装。为了进一步证实p28蛋白在体内与端粒酶之间功能的联系，我们检测了p28蛋白，端粒酶和端粒三者的共定位关系，我们发现p28蛋白和端粒酶能够同时定位于端粒上。因此，我们推断，p28蛋白和端粒酶在Cajal bodies中完成了组装，然后到端粒上对端粒进行延伸，并且p28作为端粒酶延伸反应的一个促进因子（根据本实验室体外实验相关结果）。针对这个推断，我们又将p28蛋白在大鼠肝细胞中做了过量表达，并追踪这种过量表达对端粒长度带来的影响，结果表明大鼠肝细胞中端粒长度与p28蛋白的表达量呈现正相关。基于以上结果，我们可以确定p28蛋白作为一个端粒酶的辅助因子，能够协助端粒酶顺利完成对端粒末端的延伸，参与端粒长度的调节。 另外，基于stacking的基本原理，我建立了一种新的能够准确反映端粒酶延伸产物长度的TRAP的方法，通过该方法能够得到直接反映端粒酶延伸产物真实长度的PCR产物条带，并可以直接应用于端粒酶活性的检测。