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目的:
研究冠心病痰浊壅塞证患者外周血中氧化应激诱导、抑制平衡失调程度及内皮祖细胞(EPCs)的生存状态,进一步探讨冠心病痰浊壅塞证患者血液氧化应激水平与EPCs凋亡之间的相关性。
方法:
所有研究对象均来自山东中医药大学第二附属医院2018.01-2019.01心内科住院的冠心病患者及查体中心的健康人群,分为冠心病痰浊壅塞组30例、冠心病气虚血瘀组31例,正常对照组30例,取上述三组实验对象的空腹静脉血,分别进行以下研究:(1)流式细胞仪检测EPCs的凋亡水平:对全血中的细胞进行四重标记,以CD34(PE-Cy7)及VEGFR-2(Alexa Fluor(R)647)标记均为阳性的单核细胞为内皮祖细胞,对此设门后FITC-Annexin V+、PI-为早期凋亡内皮祖细胞,通过Cell Quest软件进行数据分析,计算出早期凋亡EPCs占整个白细胞的比例。(2)氧化应激指标测定:酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血浆中氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、糖基化终末产物(AGEs)含量,酶生化法检测血浆中总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量或活性,按照试剂盒说明书进行。
结果:
(1)基本资料比较:三组在年龄、性别、肥胖、吸烟史、饮酒史等个人史及高血压病、糖尿病、外周动脉粥样硬化并斑块形成、心力衰竭、脑梗死、高脂血症等病史方面差异均无统计学意义,组间具有可比性(P>0.05)。
(2)流式细胞仪结果显示:与正常对照组比较,痰浊壅塞组与气虚血瘀组EPCs凋亡率明显升高,数据有明显差异(P<0.01)。痰浊壅塞组与气虚血瘀组比较,两组数据未见统计学差异(P>0.05),但痰浊壅塞组EPCs凋亡率仍高于气虚血瘀组。
(3)ELISA及酶生化法结果显示:与正常对照组比较,痰浊壅塞组与气虚血瘀组的T-AOC、GSH、CAT水平或含量均明显降低,ox-LDL、AGEs含量明显升高(P<0.05或P<0.01),组间比较具有统计学意义。与气虚血瘀组比较,痰浊壅塞组T-AOC、GSH、CAT水平或含量均降低,ox-LDL、AGEs含量升高(P>0.05),两组数据未见统计学差异。
(4)外周血EPCs凋亡率与各氧化应激水平之间具有极显著相关性(P<0.01),其中与T-AOC、GSH、CAT呈中度负相关,与ox-LDL、AGEs呈中度正相关。
结论:
(1)冠心病患者外周血EPCs凋亡率增加可能与氧化应激诱导成分含量增高、氧化应激抑制成分含量下降有关。
(2)冠心病痰浊壅塞组与气虚血瘀组在EPCs凋亡率及氧化应激水平上未见统计学差异,但冠心病痰浊壅塞组表现出了EPCs凋亡率及氧化应激诱导水平更高、氧化应激抑制水平更低的趋势。
研究冠心病痰浊壅塞证患者外周血中氧化应激诱导、抑制平衡失调程度及内皮祖细胞(EPCs)的生存状态,进一步探讨冠心病痰浊壅塞证患者血液氧化应激水平与EPCs凋亡之间的相关性。
方法:
所有研究对象均来自山东中医药大学第二附属医院2018.01-2019.01心内科住院的冠心病患者及查体中心的健康人群,分为冠心病痰浊壅塞组30例、冠心病气虚血瘀组31例,正常对照组30例,取上述三组实验对象的空腹静脉血,分别进行以下研究:(1)流式细胞仪检测EPCs的凋亡水平:对全血中的细胞进行四重标记,以CD34(PE-Cy7)及VEGFR-2(Alexa Fluor(R)647)标记均为阳性的单核细胞为内皮祖细胞,对此设门后FITC-Annexin V+、PI-为早期凋亡内皮祖细胞,通过Cell Quest软件进行数据分析,计算出早期凋亡EPCs占整个白细胞的比例。(2)氧化应激指标测定:酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血浆中氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、糖基化终末产物(AGEs)含量,酶生化法检测血浆中总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量或活性,按照试剂盒说明书进行。
结果:
(1)基本资料比较:三组在年龄、性别、肥胖、吸烟史、饮酒史等个人史及高血压病、糖尿病、外周动脉粥样硬化并斑块形成、心力衰竭、脑梗死、高脂血症等病史方面差异均无统计学意义,组间具有可比性(P>0.05)。
(2)流式细胞仪结果显示:与正常对照组比较,痰浊壅塞组与气虚血瘀组EPCs凋亡率明显升高,数据有明显差异(P<0.01)。痰浊壅塞组与气虚血瘀组比较,两组数据未见统计学差异(P>0.05),但痰浊壅塞组EPCs凋亡率仍高于气虚血瘀组。
(3)ELISA及酶生化法结果显示:与正常对照组比较,痰浊壅塞组与气虚血瘀组的T-AOC、GSH、CAT水平或含量均明显降低,ox-LDL、AGEs含量明显升高(P<0.05或P<0.01),组间比较具有统计学意义。与气虚血瘀组比较,痰浊壅塞组T-AOC、GSH、CAT水平或含量均降低,ox-LDL、AGEs含量升高(P>0.05),两组数据未见统计学差异。
(4)外周血EPCs凋亡率与各氧化应激水平之间具有极显著相关性(P<0.01),其中与T-AOC、GSH、CAT呈中度负相关,与ox-LDL、AGEs呈中度正相关。
结论:
(1)冠心病患者外周血EPCs凋亡率增加可能与氧化应激诱导成分含量增高、氧化应激抑制成分含量下降有关。
(2)冠心病痰浊壅塞组与气虚血瘀组在EPCs凋亡率及氧化应激水平上未见统计学差异,但冠心病痰浊壅塞组表现出了EPCs凋亡率及氧化应激诱导水平更高、氧化应激抑制水平更低的趋势。