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目前,随着研制高效低毒生防制剂的兴起,采用生物防治的方法来治理果实病害已经成为替代化学农药的环保型防治措施,受到了人们的高度重视。而利用拮抗微生物来防治病害是生物防治的一个主要内容,并已显示出很好的应用前景。本文从污水中分离得到了一株对果实真菌病害具有显著拮抗效果的枯草芽孢杆菌,并对该菌株进行了一系列的研究,结果如下:
1、菌株的分离筛选及鉴定
从污水中分离到了具有抗真菌活性的菌株Y,测定该菌的16S rDNA,在系统发育树中,该菌与Bacillus subtilis的亲缘关系较近,结合菌体的形态学特征,将其鉴定为枯草芽孢杆菌。
2、菌株Y抗真菌谱的测定
通过菌株Y抗真菌谱测定的实验表明,菌株Y对多种植物病原菌如灰霉菌(Botrytis cinerea)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、黑曲霉菌(Aspergillus niger)都具有显著的抑菌作用,具有广谱抗菌性。
3、发酵条件优化
条件研究显示,菌株Y产生抗菌活性物质的最适培养基成分和培养条件分别是:葡萄糖2g,酵母粉0.5g,水100mL,pH7.0,30℃下160rpm振荡培养48h。
4、抗菌活性物质初步研究
通过实验表明,该活性物质具有很好的耐热性,在中性及酸性条件下保持着稳定的活性,并不受蛋白酶及蛋白变性剂的影响。另外,通过硫酸铵沉淀实验表明该活性物质可能是由多种小分子量的多肽类物质组成。
5、对果实病原菌拮抗作用的研究
通过苹果、梨和番茄活体抑菌实验发现,菌株Y稀释10倍的发酵液对番茄灰霉菌具有显著的抑制作用(P<0.05)。另外,由菌株Y稀释10倍的培养液对葡萄采后防腐保鲜的实验表明,菌株Y稀释10倍的发酵液能够显著地抑制葡萄上病原菌的生长,延长储藏时间,防腐保鲜效果显著。
生物防治是国内外科学工作者研究的热点。本文旨在发现一种高效的生防菌,为生防制剂的开发和应用提供良好的材料。