绵羊毛囊差异表达基因的定位研究

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羊毛纤维的生长是由遗传因子控制的,其品质与产量受绵羊皮肤结构和毛囊性状所决定,同品种不同个体之间的产毛量与羊毛品质具有明显的差别,即使同一个体不同部位之间的产毛量与羊毛品质也存在很大的差异,这种差异与基因的差异表达有一定的内在联系。本文以中国美利奴羊作为实验研究对象,应用mRNA差异显示技术筛选绵羊肩、腹、腿皮肤的差异表达基因。实验过程中,选用3种锚定引物,8种随机引物,进行差异显示反转录PCR,扩增产物经过电泳分析、鉴定并回收差异表达的基因片段,进行二次扩增,利用pGEM-T载体将扩增后的片段克隆,经过Northern Blot分析,将检测到的特异表达片段以非放射性(Dig)标记与绵羊染色体进行杂交。通过筛选,获得绵羊肩、腹部表达,腿部不表达的差异基因1个(seqI),获得绵羊腿部特异表达,肩、腹部无表达的基因片段1个(seqII)。利用原位杂交对2个基因片段与染色体DNA进行杂交,差异片段1杂交于绵羊7号染色体,差异片段2杂交于绵羊15号染色体。该研究为绵羊毛囊中基因的定位及基因间相互作用深入研究奠定了基础。
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