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目的:基于肾-唾相关及脾-涎相关理论,观察脾虚体质与肾虚体质大鼠的生长发育状况、唾液腺组织病理变化,以及唾液γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等的差异性表达,从免疫学角度探讨脾肾与唾液的关系,为疾病的辨识和防治提供客观依据,为藏象理论的研究提供新的思路。
方法:以“恐伤肾”“饮食劳倦伤脾”理论为指导,建立大鼠肾虚质、脾虚质模型。选用3月龄清洁级SD大鼠,随机分为肾虚质组、脾虚质组和正常对照组。肾虚质组大鼠采用“猫吓鼠”经典造模方法使母鼠肾精受损,子鼠先天肾精不足,接着定时对子鼠进行恐吓刺激,造成先天肾精不足+后天恐吓的复合型肾虚质模型。脾虚质组大鼠采用“劳倦伤脾”与“饮食失节”混合造模方法,让子鼠每日进行运动至力竭,且在饮食上通过改变喂养方式使其饥饱无度。正常对照组对大鼠不做任何干预。观察各组大鼠的生长发育状况及唾液腺病理切片,检测各组大鼠唾液腺组织中IFN-γ、IL-10、TNF-α含量的变化,进行统计学处理分析。
结果:①大鼠一般状况比较:正常对照组大鼠饮食正常,精神状态良好,反应灵敏,大小便正常。肾虚质组大鼠敏感易惊,生长发育迟缓,毛发稀疏且光泽欠佳,瑟缩少动。脾虚质组大鼠饮食减少,形态消瘦,精神萎靡不振,大便量增多且不成型。②唾液腺组织病理观察:正常对照组大鼠腺管结构排列紧密,导管及腺泡细胞密集,偶见腺泡局灶性萎缩。肾虚质组与脾虚质组大鼠均出现不同程度的唾液腺组织损伤,可见腺泡萎缩、闰管减少、少量纤维素样渗出物和炎细胞浸润,腺上皮细胞出现脱落甚至坏死等。③唾液腺中细胞因子含量检测:肾虚体质组较正常对照组IFN-γ、IL-10的含量均显著下降,有统计学意义(P<0.01),TNF-α的含量上升但无统计学意义(P>0.05)。脾虚质组较正常对照组唾液中TNF-α含量显著上升、IFN-γ、IL-10的含量显著下降,均有统计学意义(P<0.01)。脾虚质组较肾虚质组TNF-α、IFN-γ浓度有所升高,但无统计学意义(P>0.05),脾虚质组在IL-10浓度上低于肾虚质组,且具有差异性(P<0.05)。
结论:先天不足+后天恐吓的复合型肾虚质动物模型及饮食不节+劳倦伤脾的复合型脾虚质动物模型,突出中医体质特色,与肾虚质、脾虚质形成的多因素特点相符,两种模型具有中医理论特色和实践上的可行性;肾虚质与脾虚质大鼠均存在有免疫稳态失衡,唾液腺组织出现了不同程度的损伤;唾液中细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-10的含量变化与脾虚质、肾虚质有一定的相关性;肾虚质组较脾虚质组,除大鼠一般生理活动表现及唾液中IL-10的浓度外,在所观测指标上没有显著性差异,这提示了唾液可能为脾肾共同所主。
方法:以“恐伤肾”“饮食劳倦伤脾”理论为指导,建立大鼠肾虚质、脾虚质模型。选用3月龄清洁级SD大鼠,随机分为肾虚质组、脾虚质组和正常对照组。肾虚质组大鼠采用“猫吓鼠”经典造模方法使母鼠肾精受损,子鼠先天肾精不足,接着定时对子鼠进行恐吓刺激,造成先天肾精不足+后天恐吓的复合型肾虚质模型。脾虚质组大鼠采用“劳倦伤脾”与“饮食失节”混合造模方法,让子鼠每日进行运动至力竭,且在饮食上通过改变喂养方式使其饥饱无度。正常对照组对大鼠不做任何干预。观察各组大鼠的生长发育状况及唾液腺病理切片,检测各组大鼠唾液腺组织中IFN-γ、IL-10、TNF-α含量的变化,进行统计学处理分析。
结果:①大鼠一般状况比较:正常对照组大鼠饮食正常,精神状态良好,反应灵敏,大小便正常。肾虚质组大鼠敏感易惊,生长发育迟缓,毛发稀疏且光泽欠佳,瑟缩少动。脾虚质组大鼠饮食减少,形态消瘦,精神萎靡不振,大便量增多且不成型。②唾液腺组织病理观察:正常对照组大鼠腺管结构排列紧密,导管及腺泡细胞密集,偶见腺泡局灶性萎缩。肾虚质组与脾虚质组大鼠均出现不同程度的唾液腺组织损伤,可见腺泡萎缩、闰管减少、少量纤维素样渗出物和炎细胞浸润,腺上皮细胞出现脱落甚至坏死等。③唾液腺中细胞因子含量检测:肾虚体质组较正常对照组IFN-γ、IL-10的含量均显著下降,有统计学意义(P<0.01),TNF-α的含量上升但无统计学意义(P>0.05)。脾虚质组较正常对照组唾液中TNF-α含量显著上升、IFN-γ、IL-10的含量显著下降,均有统计学意义(P<0.01)。脾虚质组较肾虚质组TNF-α、IFN-γ浓度有所升高,但无统计学意义(P>0.05),脾虚质组在IL-10浓度上低于肾虚质组,且具有差异性(P<0.05)。
结论:先天不足+后天恐吓的复合型肾虚质动物模型及饮食不节+劳倦伤脾的复合型脾虚质动物模型,突出中医体质特色,与肾虚质、脾虚质形成的多因素特点相符,两种模型具有中医理论特色和实践上的可行性;肾虚质与脾虚质大鼠均存在有免疫稳态失衡,唾液腺组织出现了不同程度的损伤;唾液中细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-10的含量变化与脾虚质、肾虚质有一定的相关性;肾虚质组较脾虚质组,除大鼠一般生理活动表现及唾液中IL-10的浓度外,在所观测指标上没有显著性差异,这提示了唾液可能为脾肾共同所主。