中药升降浮沉作用的形态学基础研究

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目的:研究中药升降浮沉作用的形态学基础及其可能的作用机制。   方法:从6本古籍中选取明确记载升降浮沉药性的中药40味,并涵盖所有的性味归经药性,每种药性均出现5次以上。140只ICR/BF1代小鼠随机分组后,按中药临床用量下限折算成小鼠给药剂量,灌胃给药,每天2次,连续3天,空白组给予同等剂量蒸馏水。末次给药后4小时,尾静脉注射14C-2-脱氧葡萄糖12.5μCi/kg。2小时后尾静脉注射乌拉坦2.5g/kg处死动物,解剖取材32种全身器官组织,进行冰冻切片。组织切片同定后,分别进行葡萄糖代谢放射自显影、FeulgenDNA染色、棓花青—铬明矾核酸(DNA+RNA)染色。放射自显影的组织切片H-E染色后,数码相机摄片,Photoshop软件涂伪彩色用于计算机识别各种组织。将伪彩色与放射自显影X线胶片重叠,用显微分析软件自动获取组织放射自显影影像的平均灰度值,作为组织葡萄糖利用量变化的指标。FeulgenDNA染色、棓花青核酸染色的组织切片通过显微拍摄系统随机摄片3张(×200),用IPP软件获取染色后DNA和核酸的平均光密度值,作为组织DNA和核酸含量变化的指标。数据采用SPSS软件进行T检验、单因素方差分析和聚类分析。   结果:与空白组比较,40味中药对小鼠几乎所有组织的葡萄糖利用量、DNA和核酸含量均有影响(p<0.05),但每味中药影响的组织和指标不同。中药升降浮沉对小鼠几乎所有组织的葡萄糖利用量、DNA和核酸含量均有影响(p<0.05),但每种药性影响的组织和指标不同。在影响的总组织数目上,核酸含量变化组织数>DNA含量变化组织数>葡萄糖利用量变化组织数。聚类分析时,神经内分泌免疫器官和消化器官的指标变化起主要作用。用药后的葡萄糖利用量变化的组织聚类成13类时可以将升降浮沉和性味归经29种药性完全区分开来(p<0.05);用药后的DNA和核酸含量变化的组织聚类成8类时均可以将升降浮沉和性味归经29种药性完全区分开来(p<0.05);用药后的所有指标变化的组织聚类成8类时可以将升降浮沉和性味归经29种药性完全区分开来(p<0.05),其中DNA和核酸含量变化占主导作用。升降浮沉5种药性单独聚类与升降浮沉和气味归经29种药性聚类的结果显示:在葡萄糖利用量变化指标上,两者聚类结果分别为7类和13类,存在较大差异;在DNA和核酸含量变化指标上,两者聚类结果基本一致。在影响组织的数日和部位上,升降浮沉作用与性味归经作用对组织的影响都基本一致。   结论:1.单味中药对机体的多靶点效应具有组织特异性和指标特异性。2.中药升降浮沉的作用涉及了本课题取材的所有组织器官,对机体生理功能的调节是整体的、系统的。3.升降浮沉药性之间的多靶点效应具有组织特异性和指标特异性,可以根据其作用部位、程度和性质的不同,将组织器官进行归类以区别升降浮沉。4.升降浮沉的组织特异性主要涉及中枢神经组织、免疫器官、内分泌腺体和消化系统。5.升降浮沉和性味归经等药性之间影响的组织器官类别基本是一致的,但其影响程度、性质和指标是不同的,这是区分不同药性的生物效应基础。
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