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目的:
考察凉粉草醇提物对高脂饮食引起的高脂血症大鼠的血脂水平、肝脏脂质代谢、肝脏病理变化、血清游离脂肪酸、血清脂酰肉碱和粪便短链脂肪酸的变化，探究凉粉草醇提物对大鼠脂质水平的影响。并利用16SrDNA高通量测序方法，比较凉粉草醇提物对高脂血症大鼠肠道菌群丰度及多样性的影响。并考察凉粉草醇提物不同极性部位的抗氧化活性和对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶以及胰脂肪酶的抑制作用，研究凉粉草体外抗氧化和对酶的抑制作用。
方法:
1.凉粉草醇提物对高脂血症大鼠的治疗作用
1.1凉粉草醇提物对高脂饮食诱导的大鼠降脂实验
选用SD雄性大鼠48只，随机分为空白组8只，剩余40只进行造模，造模成功后再平均分成5组(每组8只)，即模型组，辛伐他汀组(8mg·kg-1·d-1)，凉粉草醇提物低、中、高剂量组(凉粉草醇提物低、中、高剂量分别为2、4、8g·kg-1·d-1)，连续给药4周，实验给药结束后进行分析。
1.2凉粉草醇提物对高脂大鼠血清游离脂肪酸定量分析
使用气相-质谱联用仪(GC-MS)测定各组大鼠血清中游离脂肪酸的含量，探究凉粉草对高脂饮食大鼠血清中游离脂肪酸的影响。
1.3凉粉草醇提物对高脂大鼠血清脂酰肉碱定量分析
使用超高效液相-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定各组大鼠血清中脂酰肉碱的含量，探究凉粉草对高脂饮食大鼠血清中脂酰肉碱的影响。
1.4凉粉草醇提物对高脂大鼠粪便短链脂肪酸定量分析
使用气相-质谱联用仪(GC-MS)测定各组大鼠粪便中短链脂肪酸的含量，探究凉粉草对高脂饮食大鼠粪便中短链脂肪酸的影响。
1.5凉粉草醇提物对高脂大鼠肠道菌群的调节作用
利用16SrDNA高通量测序方法，比较凉粉草醇提物不同剂量对高脂饮食大鼠肠道菌群丰度及多样性的影响，利用Illumina测序平台进行肠道菌群丰度以及多样性分析。
2.凉粉草的醇提物不同极性部位的抗氧化活性和对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶以及胰脂肪酶的抑制作用研究
2.1凉粉草醇提物不同极性部位抗氧化活性研究
对凉粉草不同极性部位进行DPPH自由基，ABTS+自由基清除能力及FRAP值的测定，考察不同部位的抗氧化能力;
2.2凉粉草不同极性部位对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶以及胰脂肪酶抑制作用研究
分别采用PNPG法、PNPP法和DNS法测定不同极性部位对α-葡萄糖苷酶、胰脂肪酶和α-淀粉酶的抑制作用。
结果:
1.凉粉草醇提物对高脂血症大鼠的治疗作用
1.1高脂饲料诱导的高脂大鼠组血清中TC、TG、LDL-C较正常组显著升高，HDL-C显著降低。凉粉草对高脂饮食引起的高血脂具有一定的抑制作用，高、中、低剂量凉粉草醇提物组均可显著降低大鼠血清TC、TG和LDL-C水平，中、低剂量凉粉草醇提物组均可显著升高HDL-C水平。凉粉草醇提物各剂量组均能显著降低肝脏中的TG含量，肝脏的病理切片也进一步证实了凉粉草的肝脏保护作用，减轻了肝脏的损伤。
1.2高脂模型大鼠血清中肉豆蔻酸、十五烷酸、棕榈酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、木蜡酸、三十三烷酸等饱和脂肪酸含量均显著性升高，棕榈油酸、反油酸、油酸、亚油酸、花生四烯酸等不饱和脂肪酸含量均显著降低。而采用凉粉草提取物给药后，凉粉草给药组显著改善大鼠血清中饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸含量的异常变化，调节紊乱的游离脂肪酸趋于正常。
1.3大鼠血清中分析筛选得到了35个脂酰肉碱，其中主要的脂酰肉碱是游离肉碱，占总脂酰肉碱的50％，其次是乙酰肉碱占总脂酰肉碱的40％。与空白组相比，模型组大鼠C0(游离肉碱)含量显著降低，阳性组、低剂量组和中剂量组与模型组相比显著性升高。在短链脂酰肉碱中，与模型组相比，凉粉草中、高剂量组大鼠血清的C2∶0(乙酰肉碱)、C4∶0(丁酰肉碱)和C5i∶0(异戊酰肉碱)含量显著性降低，低剂量组的C5i∶0含量也显著性降低。在长链脂酰肉碱中，与空白组相比，模型组大鼠血清的C18∶0(十八碳酰肉碱)显著性升高，C18∶1(十八碳一烯酰肉碱)显著性降低;与模型组相比，凉粉草中剂量组血清的C18∶0显著性升高，中、高剂量组血清的C18∶1显著性升高。其他肉碱含量无显著性差异。
1.4对大鼠短链脂肪酸含量测定结果表明，与空白组相比，模型组乙酸和丁酸的含量显著降低，丙酸、异丁酸、异戊酸和戊酸的含量均有所增加，其中，异丁酸和异戊酸的含量增加具有显著性;与模型组相比，灌胃凉粉草醇提物后，乙酸含量显著升高，丁酸含量水平有所升高，但无显著性差异，凉粉草中、高剂量组的丙酸、异丁酸、异戊酸和戊酸的含量水平显著性下降。
1.5高脂饮食降低了大鼠肠道菌群丰度和多样性。灌胃凉粉草提取物之后，大鼠肠道菌群的数量和多样性均增加。给药组和正常组的菌群差异性较小。说明凉粉草可以改善大鼠肠道菌群的失衡，使其形成相对稳定肠道菌群结构。其中，在门水平上，厚壁菌门显著降低，而拟杆菌门显著升高;在纲水平上，梭状芽胞杆菌显著降低，拟杆菌显著升高;在目水平上，HMC组梭菌目显著降低，拟杆菌目显著升高;在科水平上，毛螺菌科显著降低，Muribaculaceae科显著升高;在属水平上，毛螺菌属比例有所降低，Muribaculaceae属显著性升高。且发现在空白组几乎没有疣微菌门和劳特氏菌Blautia属，而经喂养高脂饲料后，其丰度显著性增加。
1.凉粉草的醇提物不同极性部位的体外抗氧化活性和对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶以及胰脂肪酶的抑制作用结果
凉粉草不同极性部位抗氧化能力最强的是乙酸乙酯部位，最弱的是石油醚部位，且每个部位随着样品浓度的增大，抗氧化能力增强。对α-葡萄糖苷酶的抑制作用最强的是正丁醇部位，最弱的是水部位;对α-淀粉酶的抑制作用最强的是乙酸乙酯部位，最弱的是氯仿部位;对胰脂肪酶的抑制作用最强的是乙酸乙酯部位，最弱的是石油醚部位和水部位。且每个部位随着样品浓度的增大，对酶的抑制能力增强。总体来看，乙酸乙酯部位和正丁醇部位作用最强。
结论:
凉粉草醇提物能够显著降低高脂饮食诱导的高脂血症大鼠的脂质水平，能改善血清中游离脂肪酸的异常变化，调节粪便中短链脂肪酸变化，改善肠道菌群失调。并且凉粉草醇提物及不同极性部位具有较好的抗氧化活性，对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶以及胰脂肪酶具有较好的抑制作用。
考察凉粉草醇提物对高脂饮食引起的高脂血症大鼠的血脂水平、肝脏脂质代谢、肝脏病理变化、血清游离脂肪酸、血清脂酰肉碱和粪便短链脂肪酸的变化，探究凉粉草醇提物对大鼠脂质水平的影响。并利用16SrDNA高通量测序方法，比较凉粉草醇提物对高脂血症大鼠肠道菌群丰度及多样性的影响。并考察凉粉草醇提物不同极性部位的抗氧化活性和对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶以及胰脂肪酶的抑制作用，研究凉粉草体外抗氧化和对酶的抑制作用。
方法:
1.凉粉草醇提物对高脂血症大鼠的治疗作用
1.1凉粉草醇提物对高脂饮食诱导的大鼠降脂实验
选用SD雄性大鼠48只，随机分为空白组8只，剩余40只进行造模，造模成功后再平均分成5组(每组8只)，即模型组，辛伐他汀组(8mg·kg-1·d-1)，凉粉草醇提物低、中、高剂量组(凉粉草醇提物低、中、高剂量分别为2、4、8g·kg-1·d-1)，连续给药4周，实验给药结束后进行分析。
1.2凉粉草醇提物对高脂大鼠血清游离脂肪酸定量分析
使用气相-质谱联用仪(GC-MS)测定各组大鼠血清中游离脂肪酸的含量，探究凉粉草对高脂饮食大鼠血清中游离脂肪酸的影响。
1.3凉粉草醇提物对高脂大鼠血清脂酰肉碱定量分析
使用超高效液相-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定各组大鼠血清中脂酰肉碱的含量，探究凉粉草对高脂饮食大鼠血清中脂酰肉碱的影响。
1.4凉粉草醇提物对高脂大鼠粪便短链脂肪酸定量分析
使用气相-质谱联用仪(GC-MS)测定各组大鼠粪便中短链脂肪酸的含量，探究凉粉草对高脂饮食大鼠粪便中短链脂肪酸的影响。
1.5凉粉草醇提物对高脂大鼠肠道菌群的调节作用
利用16SrDNA高通量测序方法，比较凉粉草醇提物不同剂量对高脂饮食大鼠肠道菌群丰度及多样性的影响，利用Illumina测序平台进行肠道菌群丰度以及多样性分析。
2.凉粉草的醇提物不同极性部位的抗氧化活性和对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶以及胰脂肪酶的抑制作用研究
2.1凉粉草醇提物不同极性部位抗氧化活性研究
对凉粉草不同极性部位进行DPPH自由基，ABTS+自由基清除能力及FRAP值的测定，考察不同部位的抗氧化能力;
2.2凉粉草不同极性部位对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶以及胰脂肪酶抑制作用研究
分别采用PNPG法、PNPP法和DNS法测定不同极性部位对α-葡萄糖苷酶、胰脂肪酶和α-淀粉酶的抑制作用。
结果:
1.凉粉草醇提物对高脂血症大鼠的治疗作用
1.1高脂饲料诱导的高脂大鼠组血清中TC、TG、LDL-C较正常组显著升高，HDL-C显著降低。凉粉草对高脂饮食引起的高血脂具有一定的抑制作用，高、中、低剂量凉粉草醇提物组均可显著降低大鼠血清TC、TG和LDL-C水平，中、低剂量凉粉草醇提物组均可显著升高HDL-C水平。凉粉草醇提物各剂量组均能显著降低肝脏中的TG含量，肝脏的病理切片也进一步证实了凉粉草的肝脏保护作用，减轻了肝脏的损伤。
1.2高脂模型大鼠血清中肉豆蔻酸、十五烷酸、棕榈酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、木蜡酸、三十三烷酸等饱和脂肪酸含量均显著性升高，棕榈油酸、反油酸、油酸、亚油酸、花生四烯酸等不饱和脂肪酸含量均显著降低。而采用凉粉草提取物给药后，凉粉草给药组显著改善大鼠血清中饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸含量的异常变化，调节紊乱的游离脂肪酸趋于正常。
1.3大鼠血清中分析筛选得到了35个脂酰肉碱，其中主要的脂酰肉碱是游离肉碱，占总脂酰肉碱的50％，其次是乙酰肉碱占总脂酰肉碱的40％。与空白组相比，模型组大鼠C0(游离肉碱)含量显著降低，阳性组、低剂量组和中剂量组与模型组相比显著性升高。在短链脂酰肉碱中，与模型组相比，凉粉草中、高剂量组大鼠血清的C2∶0(乙酰肉碱)、C4∶0(丁酰肉碱)和C5i∶0(异戊酰肉碱)含量显著性降低，低剂量组的C5i∶0含量也显著性降低。在长链脂酰肉碱中，与空白组相比，模型组大鼠血清的C18∶0(十八碳酰肉碱)显著性升高，C18∶1(十八碳一烯酰肉碱)显著性降低;与模型组相比，凉粉草中剂量组血清的C18∶0显著性升高，中、高剂量组血清的C18∶1显著性升高。其他肉碱含量无显著性差异。
1.4对大鼠短链脂肪酸含量测定结果表明，与空白组相比，模型组乙酸和丁酸的含量显著降低，丙酸、异丁酸、异戊酸和戊酸的含量均有所增加，其中，异丁酸和异戊酸的含量增加具有显著性;与模型组相比，灌胃凉粉草醇提物后，乙酸含量显著升高，丁酸含量水平有所升高，但无显著性差异，凉粉草中、高剂量组的丙酸、异丁酸、异戊酸和戊酸的含量水平显著性下降。
1.5高脂饮食降低了大鼠肠道菌群丰度和多样性。灌胃凉粉草提取物之后，大鼠肠道菌群的数量和多样性均增加。给药组和正常组的菌群差异性较小。说明凉粉草可以改善大鼠肠道菌群的失衡，使其形成相对稳定肠道菌群结构。其中，在门水平上，厚壁菌门显著降低，而拟杆菌门显著升高;在纲水平上，梭状芽胞杆菌显著降低，拟杆菌显著升高;在目水平上，HMC组梭菌目显著降低，拟杆菌目显著升高;在科水平上，毛螺菌科显著降低，Muribaculaceae科显著升高;在属水平上，毛螺菌属比例有所降低，Muribaculaceae属显著性升高。且发现在空白组几乎没有疣微菌门和劳特氏菌Blautia属，而经喂养高脂饲料后，其丰度显著性增加。
1.凉粉草的醇提物不同极性部位的体外抗氧化活性和对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶以及胰脂肪酶的抑制作用结果
凉粉草不同极性部位抗氧化能力最强的是乙酸乙酯部位，最弱的是石油醚部位，且每个部位随着样品浓度的增大，抗氧化能力增强。对α-葡萄糖苷酶的抑制作用最强的是正丁醇部位，最弱的是水部位;对α-淀粉酶的抑制作用最强的是乙酸乙酯部位，最弱的是氯仿部位;对胰脂肪酶的抑制作用最强的是乙酸乙酯部位，最弱的是石油醚部位和水部位。且每个部位随着样品浓度的增大，对酶的抑制能力增强。总体来看，乙酸乙酯部位和正丁醇部位作用最强。
结论:
凉粉草醇提物能够显著降低高脂饮食诱导的高脂血症大鼠的脂质水平，能改善血清中游离脂肪酸的异常变化，调节粪便中短链脂肪酸变化，改善肠道菌群失调。并且凉粉草醇提物及不同极性部位具有较好的抗氧化活性，对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶以及胰脂肪酶具有较好的抑制作用。