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目的:本课题主要研究β-arrestins在大肠癌细胞侵袭迁移方面的作用，并从该角度探讨至真方对大肠癌侵袭迁移的影响，为至真方防治大肠癌的临床应用提供实验依据。 方法: 第一部分:Western Blot法检测六种人大肠癌细胞株中β-arrestin-1、β-arrestin-2的蛋白表达量，筛选人大肠癌β-arrestins高表达细胞株并将其作为后续实验用细胞株;构建β-arrestins干扰及阴性对照质粒，使用Real-time PCR、Western Blot法分别检测质粒瞬时转染对人大肠癌细胞中β-arrestins基因及蛋白表达的影响;Transwell法检测干扰β-arrestins表达对人大肠癌细胞的侵袭能力及迁移能力的影响;Western Blot法检测干扰β-arrestins表达对人大肠癌细胞中β-catenin蛋白表达的影响。 第二部分:CCK-8法检测至真方提取物对人大肠癌细胞生长的抑制作用，并确定该提取物细胞实验所需的低、中、高作用剂量;Transwell法检测低、中、高剂量的至真方提取物对人大肠癌细胞侵袭能力及迁移能力的影响;Western Blot法检测低、中、高剂量至真方提取物对人大肠癌细胞中β-arrestins、β-catenin蛋白表达的影响。 第三部分:构建人大肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤荷瘤模型，建立人大肠癌细胞裸鼠原位移植瘤模型;将造模成功的裸鼠分为空白对照组(NC)，化疗组（5-FU）和至真方组(ZZR)并给予相应的实验干预;HE染色进行移植瘤的病理分析;WesternBlot检测各组移植瘤中β-arrestins、β-catenin蛋白的表达量。 结果: 第一部分:β-arrestins对人大肠癌细胞侵袭迁移的影响及机制研究 1、Western Blot结果显示LoVo、HCT8、HCT116、HT29、SW480、SW620六株大肠癌细胞株中，HT29、SW480、SW620组中β-arrestin-1蛋白的表达量高于LoVo、HCT8、HCT116(P＜0.01)，SW620组中β-arrestin-1蛋白的表达量(4.48±0.30)最高;HCT8、HCT116、SW480、SW620组中β-arrestin-2蛋白的表达量高于LoVo、HT29组(P＜0.01)，SW620组(1.71±0.15)、HCT116组(2.00±0.07)中β-arrestin-2蛋白的表达量较高。实验提示SW620细胞中β-arrestin-1、β-arrestin-2的表达量均较高，故选择SW620细胞作为主要研究对象。 2、Real-time PCR结果显示转染β-arrestin siRNA1、β-arrestin siRNA2质粒组中β-arrestins mRNA的表达量(0.33±0.06)、(0.21±0.01)低于空白对照组(1.00±0.22)(P＜0.01)。Western Blot结果显示转染β-arrestin siRNA1组中β-arrestin-1蛋白的表达量(0.22±0.17)低于空白对照组(1.00±0.07)(P＜0.01)，β-arrestin-2蛋白的表达量(0.79±0.01)低于空白对照组(1.00±0.13)(P＜0.05);转染β-arrestinsiRNA2质粒组中β-arrestin-1蛋白的表达量(0.53±0.10)低于空白对照组(1.00±0.07)(P＜0.05)，β-arrestin-2的表达量(0.31±0.02)低于空白对照组(1.00±0.13)（P＜0.01）。实验提示β-arrestin siRNA1、β-arrestin siRNA2两个干扰质粒抑制β-arrestins基因、蛋白表达的效果均较好。 3、Transwell结果显示转染β-arrestin siRNA1、β-arrestin siRNA2质粒组中SW620侵袭细胞数(264±9)、(207±12)少于空白对照组(535±17)(P＜0.01);转染β-arrestin siRNA1、β-arrestin siRNA2质粒组中SW620迁移细胞数(153±5)、(150±4)少于空白对照组(286±8)(P＜0.01)。实验提示抑制β-arrestins的表达可以降低SW620细胞的侵袭能力和迁移能力。 4、Western Blot结果显示转染β-arrestin siRNA1、β-arrestin siRNA2质粒组中β-catenin蛋白的表达量(0.53±0.03)、(0.61±0.03)低于空白对照组(1.00±0.11)(P＜0.01)。实验提示抑制β-arrestins的表达可以下调SW620细胞中β-catenin蛋白的表达水平。 第二部分:至真方对人大肠癌细胞侵袭迁移的影响及机制研究 1、CCK-8结果显示真方提取物对人大肠癌SW620细胞的生长有抑制作用，且其抑制作用在所选范围内随提取物溶液浓度的增高而增强。根据至真方提取物对SW620细胞生长的抑制作用确定实验用至真方的低、中、高剂量浓度分别为65μg/ml、130μg/ml、440μg/ml。 2、Transwell结果显示至真方低、中、高剂量三组中SW620的侵袭细胞数(258±11)、(235±6)、(134±9)均少于空白对照组(467±17)（P＜0.01）;至真方低、中、高剂量三组中SW620的迁移细胞数(192±9)、(162±15)、(126±14)均少于空白对照组(271±14)(P＜0.01)。实验提示至真方可以降低人大肠癌SW620细胞的侵袭能力及迁移能力，且其抑制作用在所选范围内随提取物溶液浓度的增高而增强。 3、Western Blot结果显示至真方低剂量组中β-arrestin-1蛋白的表达量(0.53±0.08)低于空白对照组(1.00±0.23)（P＜0.01），β-arrestin-2蛋白的表达量(0.79±0.07)低于空白对照组(1.00±0.15)(P＜0.05);至真方中剂量组中β-arrestin-1蛋白的表达量(0.43±0.06)低于空白对照组(P＜0.01)，β-arrestin-2的表达量(0.69±0.04)低于空白对照组（P＜0.01）;至真方高剂量组中β-arrestin-1蛋白的表达量(0.64±0.12)低于空白对照组(P＜0.05)，β-arrestin-2的表达量(0.41±0.05)低于空白对照组(P＜0.01);且至真方高剂量组中β-arrestin-2蛋白的表达量最低。实验提示至真方可以下调人大肠癌SW620细胞中β-arrestin-1、β-arrestin-2蛋白的表达水平。 Weaern Blot结果显示至真方低、中、高剂量组中β-catenin蛋白的表达量(0.63±0.12)、(0.73±0.06)、(0.31±0.07)低于空白对照组(1.00±0.12)(P＜0.01)。实验提示至真方可以下调人大肠癌SW620细胞中β-catenin蛋白的表达水平。 第三部分:至真方对人大肠癌细胞裸鼠原位移植瘤模型的影响 1、观察各组裸小鼠的整体状况发现空白对照组裸小鼠的食量少、精神状态较差、行动迟缓、相互撕咬严重，至真方组及化疗组裸小鼠精神状态相对较好，食量及活动大致正常。至真方组的瘤重(0.43±0.12)g低于空白对照组(1.02±0.57)g(P＜0.0125)，化疗组(0.51±0.15)g与空白对照组两组瘤重无差异(P＞0.0125)，至真方组与化疗组两组瘤重无差异(P＞0.0125)。实验提示至真方能够抑制人大肠癌SW620裸鼠细胞原位移植瘤的生长。 2、Western Blot结果显示至真方组移植瘤中β-arrestin-1蛋白的表达量(0.53±0.07)低于空白对照组(1.00±0.08)(P＜0.01)，β-arrestin-2蛋白的表达量(0.73±0.08)低于空白对照组(1.00±0.11)(P＜0.05);化疗组移植瘤中β-arrestin-1蛋白的表达量(0.21±0.02)低于空白对照组(P＜0.01)，β-arrestin-2蛋白的表达量(0.36±0.07)低于空白对照组(P＜0.01);化疗组移植瘤中β-arrestin-1、β-arrestin-2蛋白的表达量均最低。实验提示至真方能够下调移植瘤中β-arrestin-1、β-arrestin-2蛋白的表达水平。 Western Blot结果显示至真方组、化疗组移植瘤中β-catenin蛋白的表达量(0.72±0.06)、(0.36±0.02)均低于空白对照组(1.00±0.05)(P＜0.01)，且化疗组移植瘤中β-catenin蛋白的表达量最低。实验提示至真方能够下调移植瘤中β-catenin蛋白的表达水平。 结论: 1、β-arrestins可以调节人大肠癌SW620细胞的侵袭与迁移，其取效可能与β-arrestins调节β-catenin的表达有关。 2、至真方可以抑制人大肠癌SW620细胞的侵袭与迁移，此机制可能与至真方下调β-arrestins、β-catenin的表达相关。