论文部分内容阅读
本文第一章运用RT-PCR方法从正常成人皮下脂肪组织克隆了Acrp30(adipocyte complement-related protein of 30kD)，该细胞因子又称为脂联素，以及gAcrp30(Acrp30的C端球状区域)基因，并在大肠杆菌中获得了融合表达。注射重组的Acrp30或gAcrp30蛋白能显著降低糖尿病大鼠的血糖浓度，表明Acrp30和gAcrp30具有生物学活性。通过体外培养的3T3-L1脂肪细胞模型，研究了胰岛素(Ins)、地塞米松(Dexa)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)对Acrp30的mRNA表达和蛋白分泌的影响：Ins、Dexa和TNF α均能下调Acrp30 mRNA的表达；Dexa和TNF α减少Acrp30的蛋白分泌；而Ins能瞬时刺激Acrp30的蛋白分泌，当作用时间超过4 h后，对Acrp30的分泌并无影响，这说明血浆Acrp30蛋白浓度在翻译后水平被调节，包括翻译和(或)分泌水平。第三章是利用酵母双杂交方法筛选出一些与Acrp30相互作用的蛋白，其中大部分是一些酶，有一个是甲状腺素转移蛋白，它与转运甲状腺素T3，T4和维生素A代谢有关，而T3、T4直接影响着机体正常的发育和正常的代谢。最后一章则建立了竞争ELISA方法，快速检测体内Acrp30的含量。由此本论文的整个工作为将来进一步研究Acrp30的生理功能打下了基础。