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毛细管电泳又称为高效毛细管电泳,它迅速发展于80年代中后期,是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型分离分析技术。并被认为是90年代分析科学领域中最有影响的分支科学之一。与传统的电泳相比,它具有高效、快速、微量、分离模式多、应用领域广、自动化程度高等优点。高效毛细管电泳在生命科学、医学诊断与药物分析、环境分析等众多领域中都展示出了广阔的应用前景。
近年来,芯片毛细管电泳作为微全分析系统(micro total analysissystems,μ-TAS)中的重要分支,取得了迅速的发展。20世纪90年代初由瑞士的Manz和Widmer提出的微全分析系统(μ-TAS)的目的是通过化学分析设备地微型化与集成化,最大限度地把分析实验室的功能转移到便携的分析设备中,甚至集成到方寸大小的芯片上。
本文是根据毛细管电泳和芯片毛细管电泳在药物及无机离子分析领域的应用开展了相应的研究工作。 1.药物巴洛沙星及其合成中间体的胶束电动毛细管电泳测定
以胶束电动毛细管电泳的方法为基础分离和检测了喹诺酮类药物巴洛沙星及其两种合成中间体。系统优化了缓冲溶液、分离电压、pH值、有机改性剂等条件参数。电泳测定条件为:12.5mM十二烷基硫酸钠(SDS)—25mM磷酸二氢钠(含5%甲醇pH 10.0)操作电压20kv紫外二极管阵列检测器熔融石英毛细管(75μm I.D. 总长度67cm,检测长度50cm)柱温20℃ 20min内巴洛沙星及其两种合成中间体完全分离。并与毛细管区带电泳作了比较,并测定了巴洛沙星片剂和胶囊中的巴洛沙星的含量。线形范围为5.0~40.0μg/ml。最低检测限浓度为1μg/ml。
2.毛细管电泳分离和测定无机阴离子
基于毛细管区带电泳(CzE)间接紫外检测法分离和测定了Br<->、Cl<->、NO<,3><->、SO<,4><2->、CO<,3><2->五种无机阴离子,以CrO<2-><,4>作为间接检测指示剂与电介质,CTAB作为电渗流改向剂,CrO<2-><,4>浓度为20mmol/L,CTAB浓度为0.1mmol/L。电泳条件为:熔融石英毛细管(75μm I.D. 总长度67cm,检测长度50cm);分离电压:10kv(负极进样,正极检测);分离时间:10min;进样时间:3s(压力进样);检测器:紫外PDA检测器(间接检测);柱温:20℃。在0.1~5mM范围内线性关系良好。检测限达到0.01mM。
3.芯片毛细管电泳柱内安培检测法测定无机金属离子
基于PDMS芯片毛细管电泳柱内安培检测法分离和测定了水溶
液中的钾、钠、锂离子。通过探索合适的实验条件,以30mMMES作为背景电解质,800V电压下电动进样2s,在分离电压为1000v的条件下,在毛细管电泳芯片上成功实现了K<+>、Na<+>、Li<+>混合组分的分离。并且在50μM~300μM范围内线性关系良好,回归系数分别为0.9965、0.9980、0.9966,检测限分别为1μM、1μM、4μM。钾钠离子的分离度为1.48。