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目前，人们逐渐认识到脑卒中是一种能够引起多系统损伤的疾病，而非仅累及中枢神经系统。很多卒中患者死于卒中后中枢神经系统损伤造成的免疫抑制和致死性感染。动物研究发现，缺血性卒中诱导的免疫病理改变是双向的，首先表现为免疫反应被激活，随后出现脾和胸腺的抑制。淋巴器官的激活使免疫细胞移位到脑内，加剧脑梗死损伤。同时，淋巴器官的激活导致脾脏和胸腺免疫细胞的破坏，继之出现免疫抑制。以前的研究发现主要来自于对雄性动物的研究，对于雌性动物在脑卒中后的免疫病理变化尚不知晓。在本实验中，我们将探讨①卒中对免疫状态的影响；②雌激素对脑缺血后免疫抑制状态的影响；③雌激素对免疫抑制状态的改善与脑缺血损伤的关系。
研究目的：1)脑卒中对免疫状态的影响(验证脑卒中后出现的免疫抑制状态)；2)雌激素改善脑缺血后的免疫抑制状态；3)雌激素对免疫状态的改善与脑缺血损伤之间的关系。
研究方法：
①应用C57BL/6雄性小鼠的线拴模型，缺血时间为90分钟，在再灌注6小时、24小时和96小时，取小鼠的脾脏，应用Real-time PCR检测TNF-α，IFN-γ，IL-6等炎性因子的表达；制备脾脏单细胞悬液，进行脾脏细胞计数，比较缺血再灌注6小时，22小时和96小时后的脾脏总细胞数目；用TUNEL法检测脑缺血再灌注22小时和96小时后脾脏的凋亡细胞；
②应用C57BL6雌性小鼠建立线拴模型，实验分卵巢切除组和卵巢切除的同时予雌激素替代治疗组，每组又分为大脑中动脉栓塞(MCAO)组和假手术(Sham)组，缺血再灌注96小时后取脾脏和胸腺，制备单细胞悬液，行脾细胞计数，比较MCAO组和假手术组之间、卵巢切除组和雌激素替代治疗组之间的差别；分析脾脏各细胞亚型的比例，比较各组间的差别；用抗CD3/CD28刺激脾细胞的增殖反应，比较各组间的差别；应用定量PCR检测脾和脑内细胞因子、趋化因子和趋化因子受体的表达；取脑作切片，用TTC染色后分析梗死体积，比较卵巢切除组和雌激素替代治疗组的差别；应用Real-time PCR检测缺血再灌注96小时后脑内细胞因子的表达；
研究结果：
①脑缺血再灌注22小时内，免疫系统被激活，免疫器官产生内免疫因子的表达增多；而在缺血再灌注96小时后，免疫系统受到抑制；
②雌激素减轻了脑缺血再灌注96小时后脾细胞的损失；
③雌激素使脑缺血再灌注96小时后脾细胞各亚型的比例维持在正常水平；
⑤雌激素使脑缺血再灌注96小时后脾细胞对抗原刺激的增殖反映增强；
⑥雌激素使脑缺血再灌注96小时后脾脏内细胞因子、趋化因子和趋化因子受体的表达维持在正常水平；
⑦雌激素使脑缺血再灌注96小时后脑内炎症因子的表达发生改变，这种改变与雌激素对免疫抑制状态的改善相关联。
结论和意义：
1、雌激素改善了脑缺血后的免疫抑制状态；
2、雌激素对脑缺血后免疫抑制状态的改善与雌激素的脑保护作用相关。
意义：本实验提示我们雌激素的脑保护作用与雌激素的免疫调节作用相关联，为揭示雌激素的脑保护作用提供了一个新的视角，也对卒中后的治疗有一定的启发意义；
进一步研究：1、观察雌激素对脑缺血再灌注后脑内淋巴细胞数目的影响，即雌激素对脑缺血后免疫细胞迁移至损伤区域的影响；
2、研究雌激素替代治疗后，脑缺血再灌注的小鼠体内抗原刺激后免疫系统的变化。