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本实验以桑树栽培品种842（Octoploid variety，即八倍体桑品种）的桑树枝条韧皮部（简称桑枝皮）为实验材料，先采用醇-水提取，后经过大孔树脂(D101)、葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)的吸附与分离进一步提纯，再利用半制备HPLC-DAD技术提取出主要活性单体成分，经过高效液相色谱二极管阵列(HPLC-DAD)检测和与标准品紫外光谱比对分析，最后鉴定分离到的高纯单体为桑皮苷A(mulberrosideA)。以制备的桑皮苷A绘制线性方程定量分析待测样品中桑皮苷A的含量，线性方程为y=7535.64716+1508590x，相关系数R2=0.997。因此，在0.1-2.0μg范围内桑皮苷A浓度与其吸光度具有很好的线性关系。本文以此HPLC-DAD检测技术为基础，对紫外辐射和水杨酸处理对离体桑枝条皮层中桑皮苷A的水平变化进行了系统分析。首先，本文对桑皮苷A的毒性进行了动物实验。用桑皮苷A处理正常ICR小鼠，采用尾静脉每天注射的方式，研究了桑皮苷A对小鼠生长与发育的影响。动物实验表明，桑皮苷A处理(50mg/kg)后，样品处理组小鼠体重增加减缓，肝脏系数增大，但统计分析表明与正常对照组的差异不显著；而样品处理组小鼠血清中SOD和GSH-PX水平均有所上升，与正常组没有显著差异；肝脏中SOD和GSH-PX水平均略有下降，但与正常组的差异不显著；而样品处理组小鼠血清与肝脏中总蛋白含量明显增高，统计分析表明与正常组差异显著，但是仍在正常波动范围内；观察肝脏HE染色切片，发现桑皮苷A处理后肝脏细胞出现轻微损伤。综合以上结果显示，桑皮苷A对体重的增长和肝脏系数无明显影响；对血液和肝组织中各项氧化指标无明显影响，但是对肝脏细胞有轻微损伤作用。其次，我国蚕区每年会产生大量的桑枝，研究这些废弃桑枝的活性成分及其高效利用具有重要的现实意义。桑皮苷A是一种氧化白藜芦醇二糖苷，是一种桑树的次生代谢产物，在桑根和桑枝中都存在，具有多种生物活性和药理作用。为了研究提高离体桑枝中桑皮苷A含量的方法，并且保证实验的准确性，所以以桑树栽培品种842的桑枝为试验材料，选用相同位置的枝条，分别用紫外线辐射和水杨酸进行处理。用三种不同波长范围的紫外线（紫外ultraviolet C (UVC)、ultraviolet B (UVB)、ultraviolet A (UVA)）对刚剪下来的新鲜842桑枝条进行辐射处理。结果显示，用UVC辐射处理8分钟时，桑皮苷A的含量达到最大(0.72μg/mg)，达到处理前的2.2倍；用UVB处理仅2分钟后，桑皮苷A的含量最大(0.61μg/mg)，达到处理前的2.7倍；而用UVA处理6分钟时，桑皮苷A的含量达到最大(0.48μg/mg)，达到处理前的1.2倍。这些结果表明，三种紫外光辐射都能明显刺激桑枝皮层的细胞，促使皮层细胞分泌桑皮苷A增加。其中紫外波长290-320nm范围的UVB辐射处理对桑皮苷A含量增加的效果最显著。分别以不同浓度的水杨酸浸泡不同时间对刚剪下来的新鲜842桑枝条进行处理。当在60μg/mL浓度的水杨酸中浸泡80s，其桑皮苷A含量升高最快(0.64μg/mg)，达到处理前的2.1倍。当缩短浸泡时间(20s)和提高浓度(80μg/mL)同样可以提高桑皮苷A的含量2.0倍(0.62μg/mg)。这说明水杨酸处理对桑枝皮层的细胞也有显著的刺激作用，从而促使皮层细胞分泌桑皮苷A增多。此外，同一根枝条上下不同部位皮层中桑皮苷A的含量差异非常明显，枝条顶部嫩皮层含量很低(0.14μg/mg)，越到下部含量越高，含量高达15倍。桑枝条剪伐的时期对紫外辐射和水杨酸处理的效果也有很大的影响，剪伐的时期越晚，桑树枝条生长时间延长，其韧皮部细胞对处理条件的敏感性变得越差，因而刺激细胞合成桑皮苷A的速度变得越慢。综上所述，本文利用HPLC-DAD技术建立了一套完整的桑枝皮中桑皮苷A的分离、纯化、鉴定和快速分析检测的方法，为大量废弃桑枝中桑皮苷A的医用开发提供了良好的检测手段。动物毒性试验表明桑皮苷A不会影响正常小鼠生长与发育，对小鼠没有毒性作用。紫外辐射和水杨酸浸渍均能激活离体桑枝皮层细胞，促进桑皮苷A合成。这些试验方法和实验结果为今后桑枝皮中桑皮苷A的分离与高级保健品或生物药物的开发奠定了良好的基础，为促进桑枝生物资源的高效和充分利用作出有益的尝试。