槲寄生提取物抗缺血性心律失常作用的研究

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目的:研究槲寄生提取物(Viseum Coloratura Extract VCE)抗缺血性心律失常的药理作用。方法制备VCE并得到样品的薄层色谱和高效液相色谱图。序贯法测VCE的半数致死量。采用结扎大鼠冠状动脉左前降支的方法建立心肌梗死模型,尾静脉注射VCE,观察VCE对冠脉结扎大鼠心律失常发生率和心肌梗死面积的影响。制备大鼠离体右心房标本,使浴槽中药物剂量按等比数列累计增加并测定右心房标本收缩幅度的变化和20min内收缩频率的变化。在浴槽中分别用异丙肾上腺素(ISO)10-7mol/l、强心苷(2μg/mL)预孵育,10min后加入高剂量VCE,观察VCE对ISO作用的影响和对强心苷正性肌力的影响;用阿托品(AT)(10-6mol/l)预孵育,10min后使浴槽中药物剂量按等比数列累计增加,测定大鼠离体右心房标本收缩幅度变化,观察阿托品对VCE量效曲线的影响;用高剂量VCE预孵育,10min后在浴槽中按等比数列剂量累计加入CaCl2并绘制CaCl2量效曲线,观察高剂量VCE对CaCl2量效曲线的影响。取豚鼠乳头肌标本,给予电刺激使其搏动,使浴槽中药物剂量按上述等比数列累计增加,观察VCE对豚鼠乳头肌收缩性的影响;用成对刺激法,测定乳头肌有效不应期(ERP),比较加入高剂量VCE前后ERP的变化;用不同波宽的矩形脉冲刺激标本,测定各刺激引起标本收缩的最小电压,绘制强度-时间曲线,比较给药前后两曲线的变化,观察高剂量VCE对乳头肌兴奋性的影响。结果薄层色谱、高效液相色谱如图所示。LD50的95%可信限=3235.94±112mg/kg。尾静脉注射VCE各剂量组与模型对照组比较,VPB的首发时间和发生频数各组均有推迟和减少(p<0.05);(30、15 mg/kg)组未发生VT和VF(p<0.01)。尾静脉注射VCE(30、15mg/kg)组与模型对照组比较,大鼠心肌梗死面积分别缩小46.6%和26.7%(p<0.05)。(7.5mg/kg)组与模型对照组比较,大鼠心肌梗死面积缩小12.9%,但差异不显著。与K-H液溶剂对照组比较,VCE(625mg/mL)20μL、40μL、80μL可使大鼠离体右心房呈现正性肌力,而160μL、320μL可使大鼠离体右心房呈现负性肌力(p<0.01)。对大鼠离体右心房收缩频率,VCE(625mg/mL)40μL无显著差异;80μL使频率加快36.2%(P<0.05);160、320μL使频率频率分别减慢34%和38.7%(P<0.05)。ISO预孵育实验中,高剂量VCE使ISO心肌收缩幅度降低了100%(P<0.01),心肌频率降低了28%(P<0.01);阿托品预孵育实验中,阿托品预孵育组与未孵育组比较VCE(160、320μL)阶段曲线上移即负性肌力作用被阿托品阻断(P<0.05);VCE对强心苷所致的收缩力增强无影响(P>0.05);与未孵育组比较,高剂量VCE孵育组使CaCl2量效曲线下移(P<0.01);豚鼠离体乳头肌实验中,VCE(625mg/mL)40μL、80μL(P<0.05)可使豚鼠乳头肌收缩力呈现正性肌力,而160μL(P<0.05)、320μL(P<0.01)阶段可使豚鼠乳头肌收缩力呈现负性肌力;高剂量VCE能延长豚鼠乳头肌有效不应期(P<0.05)且对乳头肌兴奋性无影响(P>0.05)。结论 VCE是槲寄生中分离出的活性提取物,含有若干个化学成分。VCE有抗缺血性心律失常的作用而且毒性低,高剂量VCE能使大鼠离体右心房表现为负性肌力和负性频率作用,还能对抗异丙肾上腺素和氯化钙的正性作用,但对强心苷的作用无影响。VCE能延长豚鼠乳头肌有效不应期,但对其兴奋性没有影响。VCE抗缺血性心律失常作用可能与其激动M受体或其某一个亚型有关。
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