黄淮海地区玉米纹枯病菌的遗传分化及玉米种质资源的抗病性鉴定

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随着紧凑型玉米品种的大面积种植,玉米栽培密度提高,氮肥用量增加,形成有利于玉米纹枯病发生的小气候条件。自80年代以来,该病在一些地区危害日益严重,成为玉米上的一种重要病害。黄淮海地区是我国夏玉米主产区,玉米纹枯病对该地区玉米的危害呈逐年加重的趋势,本研究对该地区玉米纹枯病菌进行了系统研究并对部分玉米种质进行了抗病性评价。具体结果有以下几个方面:1.从黄淮海地区采集玉米纹枯病标本250余份,分离得到176个丝核菌菌株。融合群测定结果表明,这些菌株分别属于多核丝核菌的AG1-IA、AG1-IB、AG4-HG-I、AG-5、WAG-Z融合群及双核丝核菌的AG-A、AG-Ba融合群。AG1-IA是优势融合群,占分离菌株总数的64.20%,其次是AG-Ba,占12.50%。其中AG-Ba融合群是国内首次在玉米上分离得到。2.对玉米纹枯病菌不同融合群的代表菌株进行生物学特性研究。结果表明玉米纹枯病菌不同融合群菌株间其最适生长温度差异较大。AG1-IA、WAG-Z和AG-5融合群菌株的最适温度为30℃,而AG-A、AG-Ba、AG1-IB和AG4-HG-I融合群菌株最适温度为25℃。不同融合群最适pH值为5-7,偏向于弱酸性,属于喜微酸菌群。3.采用麦麸—土壤接种法对玉米纹枯病菌不同融合群菌株进行致病性测定,结果表明,AG1-IA融合群菌株致病性最强,其次是AG-Ba融合群菌株,AG-A融合群菌株致病性最弱。采用小木棒—叶鞘接种法对分离得到的优势致病菌AG1-IA和AG-Ba融合群的129个菌株进行了致病性测定,结果表明,同一融合群内不同菌株致病力也有显著差异,属于AG1-IA群菌株的致病力分化明显,对三个玉米品种的平均病情指数为6.67%-75.56%;属于AG-Ba群菌株也存在明显分化,对三个玉米品种的平均病情指数为7.78%-55.56%。4.利用5.8S rDNA-ITS、mt SSU和β-tubulin基因序列分析方法,对玉米纹枯病菌不同融合群菌株进行了遗传分化研究。结果表明,对供试的不同菌株的5.8S rDNA-ITS区序列进行比对分析,发现相同融合群(或亚群)的菌株,序列相似率达97-100%,而不同融合群(或亚群)菌株之间的相似率仅为64%-91%。供试菌株的mt SSU序列分析结果与5.8S rDNA-ITS区序列分析结果类似,隶属于相同融合群或亚群的菌株,其mt SSU序列的相似率达99-100%,而不同融合群菌株之间的相似率为81-99%。说明5.8S rDNA-ITS、mt SSU基因序列分析是区分丝核菌属真菌不同融合群或亚群菌株的有效方法。而β-tubulin基因序列分析结果发现,同一融合群或亚群的菌株间存在较大的变异,序列的相似率也较低,说明利用该序列可以检测到相同融合群或亚群不同菌株间也存在丰富的遗传多样性。5.用优势致病群AG1-IA的强致病性菌株(YWK-198)对部分玉米种质材料进行抗病性鉴定。结果表明,在温室中对59份玉米组合材料进行了苗期的抗病性鉴定,其中,29份属于高感材料,所占比例为49.15%,18份属于感病材料,占30.51%,12份属于中抗材料,占20.34%,尚未发现免疫和高抗材料。在大田中,对393份玉米自交系进行了抗病性鉴定,依据接种30天后调查的病情指数对玉米自交系的抗病性进行了评价,在鉴定的393份玉米材料中,发现高抗材料(HR)5份,占1.27%,抗性材料(R)27份,占6.87%,中感(S)、感病(MS)和高感(HS)的比例分别为22.14%、46.82%和22.9%。依据接种60天后(蜡熟期)调查的病情指数对玉米自交系的抗病性再次进行了评价,发现高抗材料(HR)和抗性材料(R)所占的比例分别为14.25%和23.16%,明显高于第一次的调查结果,中感(S)、感病(MS)和高感(HS)的比例分别为19.34%、22.90%和20.36%。此结果表明,玉米苗期抗病性的鉴定结果与玉米成株期的鉴定结果有一定的差异,应综合考虑其两个不同阶段的鉴定结果。
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