论文部分内容阅读
目的:研究一氧化碳(Carbon monoxide，CO)中毒后大鼠胼胝体损伤情况及神经生长抑制因子A(Neurite outgrowth inhibitor-A，Nogo-A)的表达情况。 方法:健康雄性SD大鼠，使用八臂迷宫实验测试并训练其认知能力，将经筛选合格的大鼠随机分为中毒组、拮抗组和对照组。中毒组及拮抗组以腹腔内分次注射CO气体方法造成迟发性脑病（Delayed neuropsychologic sequelae，DNS）模型，拮抗组在末次腹腔注射CO气体后0小时、24小时、2至7天连续腹腔内注射Nogo-66(Nogo-A的酸性残基，由66个氨基酸残基组成的环状结构)受体的特异竞争性拮抗剂(Nogo extra cellular peptide residues1-40，NEP1-40)。中毒组和拮抗组分别于中毒造模成功后及拮抗后0小时、12小时、24小时、3天、7天取大鼠胼胝体;对照组以相同方法腹腔注射空气，在相同时间段取胼胝体，进行HE染色观察细胞形态、变色酸染色观察脱髓鞘改变、免疫组化观察Nogo-A表达情况、荧光定量聚合酶链式反应(Real time polymerase chain reaction，RT-PCR)检测Nogo-A mRNA表达。中毒组、对照组及拮抗组于造模成功后及拮抗后第7天取胼胝体，电镜下观察胼胝体超微结构变化。使用SPSS17.0进行统计学分析。 结果:HE染色光镜下，中毒组胼胝体出现神经元肿胀、固缩等变化;拮抗组胼胝体同样出现以上改变。变色酸染色光镜下可见中毒组胼胝体出现白质疏松、脱髓鞘等变化，以造模成功后0小时变化较明显，随后逐渐好转，于第7天再次加重;拮抗组胼胝体同样出现以上变化，没有中毒组明显。免疫组化显示中毒组Nogo-A阳性细胞表达率在各时间点均高表达（与对照组相比，P＜0.05）;拮抗组第7天Nogo-A表达低于中毒组(P＜0.05)。RT-PCR显示Nogo-A mRNA正常状态下在胼胝体即有表达，中毒组及拮抗组分别于造模成功后及拮抗后0、12、24小时高表达（与对照组相比，P＜0.05），0小时为高峰，其后逐渐下降，第3天与对照组无明显差异，中毒组第7天表达再次升高（与对照组相比，P＜0.05);拮抗组第7天表达未明显升高。电镜下中毒组及拮抗组胼胝体出现髓鞘疏松、溶解、断裂，轴索密度稀疏，拮抗组髓鞘疏松、轴索密度稀疏等变化较中毒组轻，胶质细胞周围出现较多新生髓鞘。 结论:CO中毒后大鼠胼胝体出现脱髓鞘损伤，且与Nogo-A表达相关。CO中毒后腹腔内注射Nogo-A受体拮抗剂在一定程度上可以抑制Nogo-A第二次上调，减轻大脑脱髓鞘改变。