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中外学者从上世纪50年代起即对香附的化学成分进行了大量的研究，并从中分离鉴定了100多个化合物，香附的现代药理学研究主要集中在其抗炎、镇痛和雌激素样作用等活性方面，未涉及其抗HBV活性。前期利用HepG2.2.15细胞模型，发现香附的90％乙醇和50％乙醇提取部位具有较强的抑制HBV DNA复制活性，半数抑制浓度(IC50)分别为29.0μg/mL和25.2μg/mL，选择指数(SI)分别为20.8和4.1;此外，90％乙醇提取部位还对HBeAg的分泌显示较强的抑制作用，IC50值为42.8μg/mL(SI=14.1)。为了阐明香附抗HBV活性的物质基础，本研究利用各种色谱方法（常压柱层析:硅胶、氧化铝、葡聚糖凝胶LH-20;中压制备;HPLC半制备）和各种波谱分析手段(UV, IR MS，1D-，2D-NMR)从香附总提取物中分离鉴定了倍半萜、三萜、生物碱、黄酮等73个化合物，其中6个为新化合物，41个化合物为首次从该植物中分离得到。 利用HepG2.2.15细胞模型测试了从香附中分离得到的37个倍半萜体外抗HBV活性，结果表明:23个化合物对乙肝病毒表面抗原(HBsAg)，15个化合物对乙肝病毒e抗原(HBeAg)，33个化合物对HBV DNA复制具有抑制作用。其中，2个广藿香烷型倍半萜3β-hydroxycyperenoic acid(4)和cyperenoic acid(8)对HBsAg的分泌具有一定的抑制活性，其IC50值分别为46.6±14.3和77.2±13.0μM，选择指数分别为31.0和1.7。9个桉烷型倍半萜对HBV DNA的复制具有抑制作用，IC50值在10.1±0.7到42.7±5.9μM之间，且细胞毒性较低，选择指数在53.2到大于259.6之间。 本研究首次发现香附具有抗HBV活性，并初步研究了其抗HBV活性的物质基础，为香附治疗病毒性乙型肝炎提供了化学和药理学参考。 抑郁症是严重威胁人类健康的常见精神疾病，传统医学认为抑郁症患者常见兴趣下降，功能减退，与中医肾精不足的表现相似，并认为肝肾同源，肾精亏虚，会导致肝气郁结;因此，对抑郁症采用补肾阳和疏肝解郁法进行治疗。现代医学研究表明:抑郁症和睡眠障碍等常见的精神疾病，与5-羟色胺(5-hydroxytryptamin，5-HT)和褪黑素(melatonin，MT)等受体密切相关，现已知5-HT受体至少有7种(5-HT1～5-HT7)，MT受体有3种(MT1，MT2，MT3)，每种受体还有很多亚型，它们的功能都不尽相同，其中，5-HT1A，5-HT2C，MT1和MT2等受体与抑郁症和睡眠障碍的发生和发展最为相关，这些受体的激动剂和拮抗剂常作为临床治疗药物使用。 我们基于中医和现代医学对抑郁等精神疾病的认识，选择可治疗精神萎靡、神志恍惚、睡眠障碍等症状的中药远志为研究对象，以其对5-HT1A，5-HT2C和MT1受体的激动作用为指导，进行抗精神疾病活性研究。 远志(Polygala tenuifolia)为中药远志最重要的基源植物，具有安神益智，祛痰利窍之功效，是临床上治疗心肾不交、失眠多梦、健忘惊悸、神志恍惚等症的常用中药。远志的化学成分主要为三萜皂苷和糖酯类，此外，还有(山)酮、少量生物碱。我们前期研究发现远志乙醇提取物在383.27μg/ml浓度时对5-HT1A，5-HT2C和MT1受体均有激动作用，激动率分别为82.54％，129.92％和117.51％。 为了揭示其活性物质基础，本研究应用活性追踪法从中药远志活性部位中分离得到14个三萜皂苷类化合物，并测试了这14个三萜皂苷对5-HT1A，5-HT2C和MT1受体的激动作用，发现10个化合物在0.1mM浓度时对5-HT1A，5-HT2C和MT1受体均显示一定的激动活性，其中，这10个化合物对5-HT1A受体的激动率在55.99±17.13％到217.39±8.52％之间，对5-HT2C受体的激动率在101.96±18.54％到241.05±32.64％之间，对MT1受体的激动率在134.01±13.92％到205.00±19.93％之间。6个化合物(75～76，79，82，84，87)对5-HT1A，5-HT2C和MT1三个受体均有较好的激动作用，其激动率均分别大于100％。此外，我们利用LC-MS技术指认了远志中糖酯类成分富集的流份，并从该流份中分离得到两个糖酯类化合物，活性测试结果表明:富含糖酯类成分的部位及两个糖酯类化合物sibricose A5和sibricose A6在所测试浓度时对5-HT1A，5-HT2C和MT1受体均没有激动作用。 以上结果表明:远志中三萜皂苷类成分对5-HT1A，5-HT2C和MT1三个受体均有不同程度的激动作用;然而，远志中另一类重要成分糖酯类在所测试浓度时对上述受体无明显激动活性。本研究丰富了对远志抗精神疾病物质基础的认识和理解，同时为远志的进一步开发和应用提供科学参考。 论文的最后还对香附和远志的化学成分及其药理活性进行了综述。 第一章香附抗乙肝病毒活性成分研究 香附为莎草科植物莎草(Cyperus rotundus L.)的干燥根茎，具有疏肝解郁，调经止痛之功效。中药香附临床上也用于慢性乙型肝炎的治疗。中外学者从上世纪50年代起即对香附所含的化学成分进行了大量的研究，并从中分离鉴定了100多个化合物，主要包括萜类（单萜、倍半萜、三萜），黄酮和生物碱类等。现代药理学研究主要集中在香附抗炎、镇痛和雌激素样作用等活性方面，至今，未见对其抗HBV活性成分和机制的研究报道。我们前期利用HepG2.2.15细胞模型对香附进行了初步的抗HBV活性研究。结果表明:香附的90％乙醇和50％乙醇提取部位具有较强的抑制HBV DNA复制活性，IC50分别为29.0μg/mL和25.2μg/mL，选择指数(SI)分别为20.8和4.1;90％乙醇提取部分对HBeAg的分泌也具有一定的抑制作用，IC50值为42.8μg/mL(SI=14.1)。为了寻找香附抗HBV活性成分，本研究利用各种色谱方法（常压柱层析:硅胶、氧化铝、葡聚糖凝胶LH-20;中压制备;HPLC半制备）和各种波谱分析手段(UV, IR，MS，1D-，2D-NMR)从香附醇提取物中分离鉴定了各类化合物73个，其中6个为新化合物(1～6)，41个化合物(18～19，22，24～26，29～33，35～38，46～53，56～73)为首次从该种植物中分离得到。测试了其中37个倍半萜类化合物体外抗HBV活性，结果表明:23个化合物对乙肝病毒表面抗原(HBsAg)，15个化合物对乙肝病毒e抗原(HBeAg)，33个化合物对乙肝病毒DNA复制具有一定的抑制作用。 第二章远志抗精神疾病活性成分研究 中药远志为远志科远志(Polygala tenuifolia Willd.)或卵叶远志(P.sibirica L.)的根，具有安神益智、祛痰、消肿之功效。用于心肾不交引起的失眠多梦、健忘惊悸、神志恍惚、咳痰不爽、疮荡肿毒等症。我们前期研究发现远志乙醇提取物在383.27μg/ml浓度时对5-HT1A,5-HT2C和MT1受体均有激动作用，激动率分别为82.54％，129.92％和117.51％。为了揭示其活性物质基础，本研究应用活性追踪法从中药远志活性部位中分离得到14个三萜皂苷类化合物，并从其非活性部位中分离得到两个糖酯类化合物。 测试了14个三萜皂苷对5-HT1A，5-HT2C和MT1受体的激动作用，发现10个化合物在0.1 mM浓度时对5-HT1A，5-HT2C和MT1受体均显示一定的激动活性，其中，10个化合物对5-HT1A受体的激动率在55.99±17.13％到217.39±8.52％之间，对5-HT2C受体的激动率在101.96±18.54％到241.05±32.64％之间，对MT1受体的激动率在134.01±13.92％到205.00±19.93％之间。6个化合物(75～76，79，82，84，87)对5-HT1A，5-HT2C和MT1三个受体均有较好的激动作用，其激动率均分别大于100％。两个糖酯类化合物sibricose A5和sibricose A6在所测试浓度时对5-HT1A，5-HT2C和MT1受体均没有激动作用。 第三章香附化学成分和药理活性研究进展 香附为莎草科植物莎草Cyperus rotundus L.的干燥根茎，始载于《名医别录》，为《中国药典》历版所收载，其性平，味辛、微苦，具有疏肝解郁，调经止痛之功效。现代药理研究表明其具有抗菌、镇痛、抗肿瘤、抑制乙酰胆碱酯酶和抗糖尿病等活性。迄今为止从香附中已分离得到100多个化合物，其中80多个为倍半萜类化合物，其骨架类型多样，有桉烷型、广藿香烷型、胡椒烷型、rotundane型等，此外，还有黄酮类和三萜类化合物等。本章对香附化学和药理活性进行综述，为其进一步的开发利用提供参考。 第四章远志化学成分和药理活性研究进展 远志(Polygala tenuifolia Willd.)是传统中药远志最重要的基源植物，具有安神益智、祛痰、消肿之功效。远志中化学成分主要为三萜皂苷类、糖酯类、(山)酮类，及少量的生物碱。现代药理学研究表明，远志具有抗抑郁、抗痴呆、神经保护、镇静、抗惊厥、祛痰镇咳、保护心脑血管等方面的活性。本章主要对远志的化学成分及其药理活性进行综述，为远志的进一步研究与应用提供参考。