二甲双胍和有氧运动对糖尿病大鼠肾脏AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路介导的炎症反应的影响

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“炎症学说”理论很好的作为一种解释肥胖导致糖尿病的全新理论而出现。很多不同的原因都能导致炎症反应的发生,AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路与能量代谢紧密相关,AMPK/SIRT1/NF-κB所介导的炎症反应主要受到机体能量代谢改变的影响。其中AMPK能够直接感受到机体能量代谢变化,然后活化下游的SIRT1分子,SIRT1活性会对NF-κB的活性造成反作用,导致NF-κB的活性降低,进而改善机体的氧化应激的发生。而有规律的长期有氧运动(如游泳运动)和二甲双胍口服药可以大大改善机体内的炎症状态,可以有效预防胰岛素抵抗II型糖尿病并且增强机体的抗炎症状态的能力。目的:本研究希望通过研究糖尿病大鼠肾脏的AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路各蛋白的表达水平和肾脏氧化应激程度以及二甲双胍口服药、有氧运动对糖尿病大鼠炎症反应和信号通路各蛋白表达的影响。希望研究发现这两种干预因素对糖尿病大鼠肾脏中信号通路介导的炎症反应的影响机制。探讨药物和运动带给机体的积极作用,为改善II型糖尿病发病和后期产生的的肾脏炎症及降低胰岛素抵抗性提供新思路。方法:购买8周龄雄性SD大鼠45只,随机选取5只为空白组(N组),其余大鼠喂养高脂饲料并注射STZ制备成Ⅱ型糖尿病模型,然后选择提示造模成功的糖尿病大鼠随机分为五组,分别是D组(糖尿病对照组)、O组(有氧组)、M组(药物组)、OM组(有氧药物综合干预组),每组10只。有氧组的运动方案具体为将所有的O组大鼠进行一个礼拜的适应性训练,保证它们对游泳运动的适应,然后正式实验的时候每周游泳六次,每次持续一个小时,每周休息一天。运动方案时间结束之后断头处死大鼠,马上取出肾脏组织处理并保存,后期测定各种需要的数据,然后分析比较不同组间差异,得出结论。结果:1、O,M,OM,D组大鼠在实验结束后体重都出现了不同程度的下降,但是O,M,OM三组与D组大鼠的体重比较没有显著性差异(P>0.05),表明有氧运动和药物干预对大鼠体重的变化没有直接影响作用。2、O,M,OM三组施加了干预因素的大鼠血糖水平出现了明显下降,其中O组与M组的血糖下降程度与D组相比下降的程度具有非常显著的差异(P<0.01),OM组与D组相比血糖的下降有显著性差异(P<0.05)3、O组的MDA含量较D组出现了非常显著性的降低(P<0.01),M组和OM组的MDA含量也有显著性的降低(P<0.05)。对比D组(156.31)和N组(236.43)的T-SOD值可以发现,糖尿病可以显著降低肾组织中T-SOD活性。有氧运动可以显著增加肾组织中T-SOD活性,对比D组(156.31)和O组(201.87)。对比M组(173.41)和D组(156.31)之后发现,二甲双胍对于增加肾组织T-SOD活性有一定的帮助,但是远远没有有氧运动带来的作用有效。表明了有氧运动和二甲双胍对改善大鼠体内的氧化应激水平都能带来不同程度上的改善作用。4、D组大鼠肾脏组织相对于其他组别大鼠而言出现了明显的病变。5、O组的AMPK和NF-κB蛋白表达量相比较于D组来说都有显著性变化,其中AMPK表达量显著性升高,NF-κB蛋白表达量显著性降低,M组AMPK表达相较于D组也有显著性增加,但是对于NF-κB蛋白表达量的减少没有明显帮助。两种干预因素综合干预的情况下,OM组的两种蛋白表达量虽然相对于D组也有积极变化,但是不如单一有氧组改善来的明显。结论:1、有氧运动和二甲双胍都可以对II型糖尿病的控制和治疗带来积极效果,具体表现在可以控制和改善各项生理指标,降低体内氧化应激水平方面2、大鼠长时间处于糖尿病状态下,肾脏中的促炎性因子表达增加,抗炎性因子表达减少,同时AMPK/SIRT1/NF-κB炎症信号通路被抑制。长期有氧运动(游泳运动)可减少糖尿病大鼠肾脏中促炎性因子的表达,同时促进抗炎性因子的表达。这个过程可能是通过影响AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路来实现的。3、机体的有氧运动能力可能会受到二甲双胍的影响,原因可能是二甲双胍产生更多的乳酸并且降低机体的血乳酸清除能力,导致体内血乳酸浓度显著升高。从而增加机体在运动中的疲劳感,降低其有氧运动能力。
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