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水貂生长激素(minkgrowthhormone，mGH)是由脑垂体前叶细胞分泌的一种蛋白质激素，它是具有广泛的生理功能。人工注射动物自身的生长激素，可以明显加快其生长速度，增加体长，提高毛皮质量。但从水貂脑垂体提取天然生长激素产量甚微，难以大范围的应用到生产实践，而基因工程技术的发展为有效的解决这一问题提供了可能。
本实验采用Trizol一步法从水貂(Mustelavison)脑垂体中分离提取总RNA。根据GenBank发表的水貂生长激素cDNA设计两对特异的引物，通过RT-PCR分别扩增出水貂生长激素前体肽和成熟肽cDNA。PCR产物经凝胶回收纯化，分别克隆到载体pGEM-T，然后转化感受态细胞E.coliDH5α。在含X-gal、IPTG的LB(Amp+)平板上通过蓝白斑筛选阳性克隆，提取质粒作限制性酶切鉴定后，对重组子上的目的片段进行测序。结果表明RT-PCR扩增出的两个cDNA片段碱基数分别为713bp和780bp，用DNAsis2.5软件进行分析表明此扩增序列与GenBank中发表的水貂生长激素cDNA100％同源。前体肽编码区由651bp组成，编码216个氨基酸，包括长度为29个氨基酸的信号肽；成熟肽的开放阅读框全长564bp，编码187个氨基酸，分子量约为21kDa，等电点为7.09。
采用DNA重组技术，将已克隆到的水貂生长激素成熟肽cDNA片段定向插入表达载体pET28b(+)质粒中，经过酶切鉴定以及序列测定可以证实，已获得原核表达载体pET-mGH2。将表达载体通过CaCl2法转化E.coliBL21(DE3)，用菌落PCR方法筛选阳性克隆，以BamHI和XhoI酶切鉴定重组质粒，以IPTG诱导蛋白表达，SDS-PAGE未能检测到目的蛋白。因此，为了提高表达量，我们在保证mGH氨基酸不变的前提下，对mGH基因的cDNA5’端的两个碱基进行突变，将突变的mGH构建表达载体pET-mGH3，以IPTG诱导蛋白表达，通过RT-PCR及SDS-PAGE进行表达分析。RT-PCR分析表明，突变后的pET-mGH3能够在大肠杆菌中正确转录，但由于表达效果不理想，SDS-PAGE仍未能检测到目的蛋白。
本实验在国内首次获得了水貂生长激素前体肽和成熟肽的cDNA，构建了克隆和表达载体，并进行了原核表达的相关研究，为今后高效表达载体的筛选研究提供了借鉴。同时水貂生长激素前体肽cDNA的克隆为将来构建基因药物研究奠定基础。