人类同种异体小肠移植术后病理形态分析及急性排异反应监测指标的研究

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研究目的:   1、观察人类同种异体小肠移植术后肠粘膜活检组织的病理形态改变,寻找其变化规律。   2、研究CD4+和CD8+淋巴细胞在小肠移植术后肠粘膜组织中的动态变化及对急性排异反应诊断的价值和指导治疗的意义。   3、探讨体液介导的免疫反应在小肠移植后急性排异反应中的作用及意义;   4、探讨组织胺代谢酶DAO和HNMT在小肠移植急性排异反应中的表达及意义。   材料和方法:   收集南京军区南京总医院病理科2003-2009年间10名实行小肠移植术患者的276例次肠粘膜活检标本进行系统复习。并应用免疫组织化学技术Envision法标记淋巴细胞亚型CD4、CD8;补体C4d,组织胺代谢酶DAO和HNMT。实验结果应用SPSS16.0软件进行统计,采用单因素方差分析,非参数检验和Pearson相关性分析。   结果:   1、10例小肠移植术患者中,男性6例,女性4例。中位年龄为24.5岁(16岁-41岁)。276例次中,发生频率最多的为无排异反应,共244次。组织形态学符合急性排异反应32次,其中可疑急性排异反应12次,轻度急性排异反应10次,中度急性排异反应7次,重度急性排异反应3次。此外,移植肠再灌注损伤、淋巴回流恢复、肠功能改变、霉菌感染、病毒感染、急性血管性排异反应和亚临床型排异反应现象均可见。   2、CD8+淋巴细胞计数随着急性排异反应程度的升高而升高(P>0.05);CD4+淋巴细胞则随着急性排异反应程度的升高而降低(P>0.05),但差异无统计学意义。CD8+/CD4+比值随急性排异反应程度的升高而升高(P<0.01),且与急性排斥反应的程度呈正相关(P<0.01)。   3、C4d的表达以沉积在血管内皮细胞和淋巴滤泡生发中心为主。C4d的阳性表达率与小肠移植急性排异反应的严重程度呈正相关性。非排异反应阶段与可疑急性排异反应阶段则无明显差别。此外,C4d在正常对照组和克隆恩肠病中均不表达。   4、DAO定位于小肠粘膜上皮细胞和淋巴细胞胞核,HNMT定位于小肠组织粘膜上皮细胞胞质,部分淋巴细胞着色。二者表达与小肠移植急性排异反应的严重程度无相关性。   结论:   1、小肠移植术后肠粘膜活检病理组织形态学仍然是监测排异反应比较可靠的手段,连续动态地观察可以有效地监测术后急性排异反应的发生、发展,并对治疗效果进行评价。移植肠粘膜结构、隐窝上皮损伤、炎细胞浸润等形态学的变化是诊断急性排异反应的有效指标。2003年第八届国际小肠移植会议制定的诊断标准可以较为准确地评估小肠移植急性排异反应并为临床治疗提供依据。   2、CD4+淋巴细胞可能是急性排异反应的始动因素,而CD8+淋巴细胞则可能在急性排异反应的后期发挥作用。CD4+淋巴细胞和CD8+淋巴细胞相互作用,共同推动了小肠移植急性排异反应的发生和发展。CD8+/CD4+比值可以作为监测急性排异反应的一项辅助指标。   3、CAd介导的体液免疫反应在小肠移植中也是存在的,此不仅为病理医师在判断小肠移植是否发生急性捧异反应提供了一项参考指标,更为临床医师治疗小肠移植急性排异反应补充了新的途径。   4、组织胺代谢酶DAO和HNMT在小肠移植急性排异反应中无诊断意义。
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