1,25-二羟维生素D<,3>抑制大鼠角膜移植术后免疫排斥反应的实验研究

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目的:研究1,25-二羟维生素D3对大鼠穿透性角膜移植术后免疫排斥反应的免疫抑制作用及其机制。方法:以30只SD大鼠为受体,15只Wistar大鼠为供体,建立同种异体穿透性角膜移植模型,受体SD大鼠随机分成实验组、实验对照组,每组15只;另15只SD大鼠行自体穿透性角膜移植,构成对照组。术后0~13 d,实验组腹腔注射1,25-二羟维生素D3 1.0μg·kg-1·d-1,对照组和实验对照组腹腔注射灭菌花生油2 ml/d。术后每天显微镜观察角膜植片存活情况并评分;于术后14 d、21 d、30 d三个时间点,每组随机处死5只大鼠,进行角膜植片病理学检查,ELISA检测外周血IL-1β、IL-2、IL-8、IL-10,流式细胞分析技术检测外周血中T细胞亚群变化、CD4+/CD8+比值。结果:1.对照组角膜植片平均存活时间为(21.7±6.8) d,实验对照组为(11.2±2.5) d,实验组为(19.3±5.2) d。实验组角膜植片平均存活时间较实验对照组明显延长,差异有统计学意义(P < 0.01)。2.实验组排斥反应指数(RI)在手术后14 d、21 d、30 d均低于实验对照组,差异有统计学意义(P < 0.01)。3.病理学检查显示实验组淋巴细胞浸润和新生血管均较实验对照组少。4.实验组外周血中IL-1β、IL-2、IL-8含量与实验对照组相比明显下降, IL-10含量明显增高,差异有统计学意义(P < 0.01)。5.术后同一时间点实验组CD4+均较实验对照组下降(P < 0.01),而CD8+明显增多(P < 0.01),实验组CD4+/CD8+比值较实验对照组均明显降低(P < 0.01),差异有统计学意义。结论:1. 1,25-二羟维生素D3能显著延长同种异体大鼠角膜移植术后角膜植片的存活时间。2. 1,25-二羟维生素D3能有效抑制同种异体大鼠角膜移植术后免疫排斥反应。3. 1,25-二羟维生素D3可以明显抑制同种异体大鼠角膜移植术后Th1细胞分泌的IL-1β、IL-2、IL-8;并且显著提高Th2细胞分泌的IL-10。4. 1,25-二羟维生素D3可使同种异体大鼠角膜移植术后外周血CD4+下降,CD8+上升,CD4+/CD8+比值下降,即通过调节T细胞亚群数量及其比值,抑制T细胞介导的角膜移植排斥反应。
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