调更汤对18月龄雌性SD大鼠卵巢功能调节作用的实验研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhushaoxiang2009
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[目的]  通过观察18月龄雌性SpragueDawley(SD)大鼠卵巢中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、雌二醇(E2)及其受体ERα、ERβ、瘦素(Leptin)及其受体基因(ob-RmRNA)表达、UCP2蛋白含量及其基因(UCP2mRNA)表达的变化,探索调更汤对围绝经期大鼠卵巢功能的调节作用。  [方法]  采用18月龄自然衰老的雌性SD大鼠模拟围绝经期模型,通过大鼠阴道角化上皮细胞变化和血清E2、促卵泡成熟激素(FSH)、促黄体生成素(LH)的改变来检验实验模型是否成功。倍美力作为阳性对照药物,设立中药组(调更汤组)、西药组(倍美力组)、模型组、青年组(5月龄SD大鼠)进行比较研究。在给药8周后,将大鼠处死。观察大鼠卵巢组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力;用Westernblot和RT-PCR检测卵巢UCP2蛋白及其基因(UCP2mRNA)表达、雌激素α受体蛋白含量及其基因表达(ERαmRNA)、雌激素β受体蛋白含量及其基因表达(ERβmRNA)、瘦素受体基因表达(ob-RmRNA)及用免疫法检测血清雌二醇(E2)、卵巢雌二醇(E2)、瘦素(Leptin)的变化;了解调更汤干预后大鼠卵巢功能的变化。  [结果]  1、模型组SD大鼠的血清E2水平较青年组显著降低(P<0.01),血清FSH水平显著升高(P<0.01),LH水平也显著升高(P<0.05),符合围绝经期内分泌改变的特点。  2、氧化损伤方面,模型组SD大鼠卵巢MDA含量较青年组显著升高(P<0.01);SOD活力显著降低(P<0.01)。经过药物干预后,调更汤和倍美力能够明显降低大鼠卵巢MDA含量(P<0.05),提高SOD水平(P<0.01)。  3、在E2及其受体方面,模型组大鼠血清E2较青年组显著降低(P<0.01),药物干预后,西药组和中药组大鼠血清中E2水平都显著升高(P<0.05);模型组大鼠卵巢E2较青年组显著降低(P<0.01),经过药物干预后,西药组大鼠卵巢E2水平较模型组明显提高(P<0.05),中药组大鼠卵巢E2水平也有显著升高(P<0.05);与青年组比较,模型组大鼠卵巢ERαmRNA、ERβmRNA表达及蛋白含量显著降低(P<0.01);经过药物干预后,西药组、中药组卵巢ERα、ERβ蛋白和mRNA表达和蛋白水平明显高于模型组水平(P<0.01)。  4、在Leptin方面,模型组大鼠血清Leptin水平较青年组显著升高(P<0.01);模型组大鼠卵巢ob-RmRNA水平显著高于青年组(P<0.01),经过药物干预后,中药组和西药组卵巢ob-RmRNA水平有下降趋势(P<0.01)。  5、在UCP2蛋白及其基因表达方面,模型组SD大鼠卵巢UCP2蛋白及UCP2mRNA水平显著低于青年组(P<0.01);经过药物干预后,西药组与中药组卵巢UCP2蛋白及UCP2mRNA水平均较模型组显著提高(P<0.01)。  [结论]  1.调更汤通过升高大鼠卵巢E2水平和升调ERα、ERβ蛋白含量及其基因表达延缓卵巢功能衰退。  2.调更汤通过提高大鼠卵巢UCP2水平改善卵巢组织氧化损伤,延缓卵巢功能衰退。  3.调更汤可能通过减少大鼠卵巢中异常升高的ob-R基因表达来减轻高水平leptin对卵巢功能的抑制作用,减缓卵巢功能的下降。  
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