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目的： 选取前期实验筛选出来的针对 survivin外显子的干扰质粒PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-1和PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-2沉默人宫颈癌HeLa细胞的survivin基因，检测抑制survivin基因后20种lncRNA(long non-coding RNA,lncRNA)表达水平的变化。初步探讨survivin基因的RNA干扰与lncRNA表达水平变化的关系。 方法： 1.根据已报道的国内外文献，选择20种在人宫颈癌HeLa细胞中表达并与细胞生长、增殖和凋亡有关的lncRNA。 2.根据实验需要设置未转染组， PGP-U6-GFP-neo-NC组、PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-1组和PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-2组。用LipofectaminTM3000将重组质粒转染至HeLa细胞。 3.用实时荧光定量PCR和Western Blot分别检测转染后HeLa细胞survivin基因的RNA水平和蛋白水平变化。 4.用Annexin V-FITC和PI双染色检测细胞凋亡情况。 5. MTT检测转染后HeLa细胞增殖能力的变化。 6.用实时荧光定量PCR检测这20种lncRNA表达水平变化。 结果： 1.脂质体转染48h后，荧光显微镜观察显示 PGP-U6-GFP-neo-NC组、PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-1组和PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-2组的转染效率达到70%以上。 2. RT-qPCR结果显示，空白未转染组和PGP-U6-GFP-neo-NC组之间的差异无统计学意义(p>0.05)， PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-1组和PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-2组细胞中的 survivin mRNA明显下调(p<0.01），其中 PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-2组效果优于PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-1组。 3. Western Blot结果显示，空白未转染组和PGP-U6-GFP-neo-NC组之间的差异无统计学意义(p>0.05)， PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-1组和PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-2组细胞中的 survivin蛋白表达量明显下降(p<0.01），其中 PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-2组效果优于PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-1组。 4. Annexin V-FITC和PI双染色显示，实验组凋亡率明显高于空白组和NC组，其中 PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-2组凋亡率高于PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-1组。 5. MTT结果表明，实验组细胞生长速度减缓，增殖能力明显被抑制。 6.实时荧光定量PCR显示，转染PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-1组和转染 PGP-U6-GFP-neo-survivin-shRNA-2组长链非编码 RNA H19、MALAT1、HOTAIR、UCA1、HOTTIP、GAS5、Dleu2、SRA、FAL1、MDC1-AS表达量有不同程度增高，差异有统计学意义（P<0.05）；长链非编码RNA EBIC、LET、TUG1、AFAP1-AS1、CARLo-5表达量有不同程度降低，差异有统计学意义（P<0.05）；长链非编码RNA ANRIL和BC200表达量无明显变化；长链非编码RNA MEG3、TUSC8、BANCR因CT值大于30，不符合实验要求被剔除。 结论： 转染针对survivin基因的干扰质粒后，HeLa细胞中survivin基因明显被抑制，细胞凋亡明显增加。同时，15种lncRNA的表达发生了不同变化，说明在宫颈癌HeLa细胞中survivin基因与这15种lncRNA存在一定的相关性。