基于ACTA/Smads信号通路探讨调任通督针刺法对PCOS患者IVF-ET妊娠结局及KGN细胞的影响

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huzhan_dong
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目的:
  观察调任通督针刺法对接受体外受精-胚胎移植的多囊卵巢综合征不孕患者的临床疗效。通过制备经针刺后的志愿者的血清培养卵巢颗粒细胞,分别观察调任通督针刺法、普通针刺法对卵巢颗粒细胞中ACTA、ACTRⅡB、ALK4、Smad2、Smad3、Smad4mRNA表达,探究调任通督针刺后血清对卵巢颗粒细胞于ACTA/Smads信号通路的影响,为临床使用调任通督针刺法提供理论依据和实验基础。
  方法:
  临床部分:选取2018年1月至2019年3月于深圳市妇幼保健院生殖科门诊就诊并符合多囊卵巢综合征不孕症诊断的预行体外受精-胚胎移植的患者共83例,随机数字表法分为调任通督针刺组(n=40)及对照组(n=43)。入组患者于月经来潮的2~3天行血清LH、FSH、T、AMH的检测,两组患者均行黄体中期长方案降调节,其中调任通督针刺组在控制性超促排卵(COH)前一月经周期及COH过程中配合应用调任通督针刺治疗。统计各组患者在COH中的Gn用量、用药天数、HCG日子宫内膜形态及厚度、HCG日血清E2及P水平、妊娠率及活产率。
  实验部分:通过培养人卵巢颗粒细胞瘤细胞(KGN)细胞,采用实时荧光定量PCR方法分别检测经过调任通督针刺法针刺人血清、普通针刺法针刺人血清、空白组人血清干预后KGN细胞中ACTA、ACTRⅡB、ALK4、Smad2、Smad3、Smad4mRNA的变化,计算各目的基因表达的相对定量(RQ)值。
  结果:
  临床部分:
  1.调任通督组临床妊娠29例,妊娠率72.5%,对照组临床妊娠21例,妊娠率48.8%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组活产率无显著差异(30%vs16.3%,P>0.05)。
  2.调任通督组HCG日A型子宫内膜26例(65.0%)较对照组A型子宫内膜16例(37.2%)差异有统计学意义(P<0.05)。HCG日子宫内膜厚度(9.77±2.59mmvs9.39±1.98mm),无显著差异(P>0.05)。
  3.调任通督组Gn用量(2141.25±714.33)与用药时间(10.95±2.29天)均低于对照组Gn用量(2394.13±893.58)与用药时间(11.77±3.18天),但差异没有统计学意义(P>0.05)。调任通督组HCG日血清E2水平(3311.38±1224.27pg/ml)较对照组血清E2水平(3891.26±1192.22pg/ml)降低,调任通督组HCG日P(1.40±0.93ug/L)水平较对照组P(1.03±0.46ug/L)升高,差异有统计学意义(P<0.05)。
  实验部分:
  1.调任通督针刺组及普通针刺组较空白组颗粒细胞中ACTAmRNA表达量均增加(P<0.05),而调任通督针刺组较普通针刺组颗粒细胞中ACTAmRNA表达量增加明显(P<0.05)。
  2.调任通督针刺组及空白组中ALK4mRNA表达量较普通针刺组增加(P<0.05)。
  3.调任通督针刺组中Smad3mRNA表达量较普通针刺组及空白组均增加(P<0.05)。
  4.调任通督针刺组与普通针刺组中ACTⅡBmRNA表达量较空白组增加,普通针刺组与空白组相比较差异有统计学意义(P<0.05),但调任通督针刺组增加量与空白组相比无显著差异(P>0.05)。
  5.三组Smad2、Smad4mRNA的表达量无显著差异(P>0.05)。
  结论:
  1.调任通督针刺法可以提高行体外受精-胚胎移植的多囊卵巢综合征不孕症患者HCG日A型子宫内膜比例、降低HCG日血清E2并升高P水平,从而提高妊娠率。
  2.调任通督针刺法人血清可以上调KGN细胞ACTA/Smads信号通路中ACTA、ALK4、Smad3mRNA的表达,从而提高卵泡质量。
  3.调任通督针刺法可能通过上调ACTA及其Smads信号通路发挥其疗效,其机制可能是上调颗粒细胞中的ACTA与Ⅱ型受体(ACTRⅡB)表达,从而募集更多Ⅰ型受体磷酸化细胞内的信号因子Smad3来调节信号转导。
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