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目的
通过观察脑出血模型大鼠神经功能缺损体征及血肿周围脑组织线粒体形态学、NGB、Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9的动态变化规律，以及针刺醒脑开窍主穴"人中、内关"对上述因子的影响，探讨针刺治疗脑出血的现代医学机理。
方法
选用健康雄性SD大鼠96只，随机分为对照组（n=24）、模型组（n=24）、穴位组（n=24）、非穴组（n=24）四组，各组再按6h、24h、48h、72h四个时间点随机分为四个亚组，每个亚组6只大鼠。采用自体血二次注入法制作大鼠脑出血动物模型；穴位组针刺双侧“内关”和“人中”组穴，非穴组针刺双侧腋下和尾骨尖左侧旁非穴点；采用NSS评分法对术后大鼠神经功能缺损程度进行评分；运用透射电镜观察血肿周围组织线粒体超微结构改变；运用免疫组化法定性测定各时间点NGB、Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达情况及其动态变化规律。
结果
1.针刺“人中、内关”组穴对ICH大鼠神经功能缺损评分的影响：对照组NSS评分为0分，模型组大鼠NSS评分随出血时间延长而逐渐上升；穴位组与非穴组大鼠NSS评分变化趋势与模型组大致相同；穴位组在24h、48h、72hNSS评分明显均低于同时间点的模型组和非穴组，穴位组与模型组、穴位组与非穴组相比，差异在72h有统计学意义（P＜0.05）。
2.针刺“人中、内关”组穴对ICH大鼠血肿周围组织线粒体损伤情况的影响：对照组电镜下可见线粒体形态结构正常，线粒体嵴、膜清晰；模型组及非穴组大鼠线粒体数目减少，线粒体嵴、膜融合模糊不清，内质网扩张伴有脱颗粒现象，且损伤程度随时间延长逐渐加重，两组并无明显区别；穴位组线粒体损伤情况与同时间点模型组及非穴组相比均较轻。
3.针刺“人中、内关”组穴对ICH大鼠NGB表达的影响：对照组NGB表达呈现较低水平；模型组在术后6hNGB蛋白表达即明显升高，24h达高峰，随后逐渐下降；穴位组和非穴组与模型组呈现相同变化趋势，但穴位组各时间点NGB蛋白表达均高于对应时间点模型组及非穴组；同时间点穴位组与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；同时间点穴位组与非穴组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。
4.针刺“人中、内关”组穴对ICH大鼠细胞凋亡相关因子Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达的影响：
①Cyt-C阳性细胞表达：对照组Cyt-C阳性细胞表达在各时间点均呈现较低水平；模型组在术后6hCyt-C阳性细胞表达即明显升高，24h达高峰，随后逐渐下降；穴位组及非穴组变化与模型组呈现相同趋势，但穴位组均低于同时间点模型组及非穴组的阳性细胞数；同时间点穴位组与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；穴位组与非穴组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。
②Caspase-3阳性细胞表达：对照组Caspase-3阳性细胞表达在各时间点均呈现较低水平；模型组Caspase-3阳性细胞表达在术后6h即开始上升，随出血时间的延长逐渐增高，72h达高峰；穴位组及非穴组变化与模型组趋势相同，但穴位组均低于同时间点模型组及非穴组水平；同时间点穴位组与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；穴位组与非穴组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。
③Caspase-9阳性细胞表达：对照组Caspase-9阳性细胞表达在各时间点均呈现较低水平；模型组Caspase-9阳性细胞表达在术后6h即开始上升，随出血时间的延长逐渐增高，72h达高峰；穴位组及非穴组变化与模型组趋势相同，但穴位组均低于同时间点模型组及非穴组水平；同时间点穴位组与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；穴位组与非穴组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论
1.针刺醒脑开窍主穴“人中、内关”治疗ICH能改善大鼠神经功能缺损体征，尤其是ICH后24h、48h、72h穴位组与模型组相比神经功能缺损体征明显改善。
2.针刺醒脑开窍主穴“人中、内关”治疗ICH能通过改善血肿周围组织线粒体损伤程度，保护线粒体结构、维护线粒体功能，从而改善损伤的脑细胞有氧氧化能力。
3.针刺醒脑开窍主穴“人中、内关”治疗ICH可通过提高血肿周围组织NGB表达，从而拮抗脑组织损伤、改善脑组织缺血缺氧情况、保护神经细胞，提高出血后脑细胞的能量代谢。
4.针刺醒脑开窍主穴“人中、内关”治疗ICH可能通过降低血肿周围脑组织Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达，减少细胞凋亡相关蛋白的产生和激活，从而抑制神经元凋亡，起到保护脑组织的作用。
通过观察脑出血模型大鼠神经功能缺损体征及血肿周围脑组织线粒体形态学、NGB、Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9的动态变化规律，以及针刺醒脑开窍主穴"人中、内关"对上述因子的影响，探讨针刺治疗脑出血的现代医学机理。
方法
选用健康雄性SD大鼠96只，随机分为对照组（n=24）、模型组（n=24）、穴位组（n=24）、非穴组（n=24）四组，各组再按6h、24h、48h、72h四个时间点随机分为四个亚组，每个亚组6只大鼠。采用自体血二次注入法制作大鼠脑出血动物模型；穴位组针刺双侧“内关”和“人中”组穴，非穴组针刺双侧腋下和尾骨尖左侧旁非穴点；采用NSS评分法对术后大鼠神经功能缺损程度进行评分；运用透射电镜观察血肿周围组织线粒体超微结构改变；运用免疫组化法定性测定各时间点NGB、Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达情况及其动态变化规律。
结果
1.针刺“人中、内关”组穴对ICH大鼠神经功能缺损评分的影响：对照组NSS评分为0分，模型组大鼠NSS评分随出血时间延长而逐渐上升；穴位组与非穴组大鼠NSS评分变化趋势与模型组大致相同；穴位组在24h、48h、72hNSS评分明显均低于同时间点的模型组和非穴组，穴位组与模型组、穴位组与非穴组相比，差异在72h有统计学意义（P＜0.05）。
2.针刺“人中、内关”组穴对ICH大鼠血肿周围组织线粒体损伤情况的影响：对照组电镜下可见线粒体形态结构正常，线粒体嵴、膜清晰；模型组及非穴组大鼠线粒体数目减少，线粒体嵴、膜融合模糊不清，内质网扩张伴有脱颗粒现象，且损伤程度随时间延长逐渐加重，两组并无明显区别；穴位组线粒体损伤情况与同时间点模型组及非穴组相比均较轻。
3.针刺“人中、内关”组穴对ICH大鼠NGB表达的影响：对照组NGB表达呈现较低水平；模型组在术后6hNGB蛋白表达即明显升高，24h达高峰，随后逐渐下降；穴位组和非穴组与模型组呈现相同变化趋势，但穴位组各时间点NGB蛋白表达均高于对应时间点模型组及非穴组；同时间点穴位组与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；同时间点穴位组与非穴组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。
4.针刺“人中、内关”组穴对ICH大鼠细胞凋亡相关因子Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达的影响：
①Cyt-C阳性细胞表达：对照组Cyt-C阳性细胞表达在各时间点均呈现较低水平；模型组在术后6hCyt-C阳性细胞表达即明显升高，24h达高峰，随后逐渐下降；穴位组及非穴组变化与模型组呈现相同趋势，但穴位组均低于同时间点模型组及非穴组的阳性细胞数；同时间点穴位组与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；穴位组与非穴组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。
②Caspase-3阳性细胞表达：对照组Caspase-3阳性细胞表达在各时间点均呈现较低水平；模型组Caspase-3阳性细胞表达在术后6h即开始上升，随出血时间的延长逐渐增高，72h达高峰；穴位组及非穴组变化与模型组趋势相同，但穴位组均低于同时间点模型组及非穴组水平；同时间点穴位组与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；穴位组与非穴组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。
③Caspase-9阳性细胞表达：对照组Caspase-9阳性细胞表达在各时间点均呈现较低水平；模型组Caspase-9阳性细胞表达在术后6h即开始上升，随出血时间的延长逐渐增高，72h达高峰；穴位组及非穴组变化与模型组趋势相同，但穴位组均低于同时间点模型组及非穴组水平；同时间点穴位组与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；穴位组与非穴组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论
1.针刺醒脑开窍主穴“人中、内关”治疗ICH能改善大鼠神经功能缺损体征，尤其是ICH后24h、48h、72h穴位组与模型组相比神经功能缺损体征明显改善。
2.针刺醒脑开窍主穴“人中、内关”治疗ICH能通过改善血肿周围组织线粒体损伤程度，保护线粒体结构、维护线粒体功能，从而改善损伤的脑细胞有氧氧化能力。
3.针刺醒脑开窍主穴“人中、内关”治疗ICH可通过提高血肿周围组织NGB表达，从而拮抗脑组织损伤、改善脑组织缺血缺氧情况、保护神经细胞，提高出血后脑细胞的能量代谢。
4.针刺醒脑开窍主穴“人中、内关”治疗ICH可能通过降低血肿周围脑组织Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达，减少细胞凋亡相关蛋白的产生和激活，从而抑制神经元凋亡，起到保护脑组织的作用。