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目的:研究利用RNAi技术抑制HSP27的表达对卵巢上皮性癌的治疗作用及其对化疗药物敏感性的影响。探讨通过RNAi技术抑制HSP27的表达作为卵巢上皮性癌的基因治疗及克服其对紫杉醇化疗耐药治疗的可行性及方法。
方法:采用脂质体转染法将HSP27 stableTM siRNA导入卵巢癌细胞系H0-8910中，分别在转染前和转染后48h通过RT-PCR方法检测肿瘤细胞HSP27mRNA的表达情况；通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定经梯度浓度紫杉醇作用后的细胞生长情况及细胞存活率。
结果:与阴性对照siRNA和正常细胞对照相比，HSP27 stableTM siRNA使HSP27 mRNA表达水平明显下降，证实了HSP27 stableTM siRNA的干扰效果。且紫杉醇本身即抑制了HSP27的基因表达，HSP27 stableTM siRNA更加强了紫杉醇对HSP27基因的抑制效果，而阴性对照siRNA则无此增强抑制的作用。MTT结果证明阴性对照siRNA和HSP27 stableTM siRNA分别转染细胞后，紫杉醇的IC50(半数抑制浓度)分别为6588nmol/L和1571nmol/L，减少了4.19倍，即细胞经HSP27siRNA预处理后对紫杉醇的敏感性大大增加，HSP27基因表达的下降增强了紫杉醇对卵巢癌细胞H0-8910的杀伤作用。
结论:HSP27 stableTM siRNA抑制了HSP27基因的表达，HSP27的低表达增强了卵巢癌细胞对化疗药物紫杉醇的敏感性，增强了紫杉醇的细胞杀伤作用。RNAi方法为卵巢癌的基因治疗提供了一种新的途径。