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现已明确,幽门螺杆菌感染(Helicobacter pyrofi,Hp)是慢性胃炎和消化性溃疡的主要病因,与胃癌和粘膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤的发生密切相关,1994年WHO己将列为I级致癌原。据初步统计,全世界超过50%的人群有Hp感染。其中西方国家的感染率为25-50%,发展中国家有的高达80%。然而,感染人群大都无症状,只有少数感染者可出现消化性溃疡,极少数感染者最终发展成胃癌,其中的原因尚不清楚。目前认为除与宿主基因易感性,环境因素有关外,更重要的是Hp菌株的毒力差异对临床结果的影响。目前,Hp的cagA,vacA,iceA基因受到研究者的重视。许多流行病学调查资料显示,cagA基因阳性的Hp菌株感染与消化性溃疡、肠化生、萎缩性胃炎和胃癌的发生密切相关。编码空泡毒素的vacA基因几乎存在于所有的Hp菌株中,其信号序列(s)和中间序列(m)变异较大,s和m均存在许多亚型,其中s有sla,slb,slc,s2亚型,m有m1和m2亚型。不同s和m亚型组成的嵌合体使Hp产生的空泡毒素的量和活性也不同。研究发现vacAs1/ml型的Hp产生大量毒素,可能与消化性溃疡相关,vacAs1/m2型的Hp产生中等量毒素,而vacAs2/m2型的Hp则产生少量毒素或不产生毒素。Hp的iceA基因是近来发现的一个新基因,有iceA1和iceA2两个等位基因,来自荷兰和美国的几项研究显示iceA1与消化性溃疡和胃粘膜IL-8水平有显著相关性,被认为可能是Hp的又一致病因子。各基因的地区分布性差异比较大,且与消化系统相关疾病的关系还不是很明确。
目的:
1.检测广东地区幽门螺杆菌(Hp)感染患者中Hp菌株cagA、vacA、iceA基因的分布特征,找出优势基因,并和国内外其他地区做比较。
2.探讨Hp各基因型与慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡之间的关系。
材料和方法:
1.研究对象:患有慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡且HP检测阳性患者。
2.方法:
(1)提取H.Pylori基因组:用水煮法(2)荧光定量PCR法检测目的基因,PCR产物用于连接,转化。
(3)测序:将产物测序后,和Pubmed公布的序列进行比对。
(4)统计学处理:用SPSS软件,两个或两个以上样本的用X2检验,矫正的X2检验,确切概率法。P<0.05认为有显著的统计学差异。
结果:
1.PCR产物经连接、转化后送测序,测序结果与Pubmed公布的序列进行比较,同源性93%以上。
2.在117例标本中,cagA、vacA的阳性率分别为:84.6%、74.3%。Sla、slb、slc、m1、m2的阳性率分别为76.0%、6.0%、52.1%、23.1%、47.9%。Slb很少见,s2则完全缺失。优势基因亚型是vacAslaslc/m2。各基因与慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡未发现有统计学意义。
3.iceA1、iceA2的阳性率分别为:74.4%、13.7%。两者都有的是2.6%。iceA1和iceA2在慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡的分布差异无明显统计学意义。
结论:
1.广东地区的幽门螺杆菌的优势基因型cagA,vacAsIa/m2,iceA1为主。
2.cagA、vacA、iceA各基因与慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡无明显的统计学意义,不能作为本地区HP菌株毒力强弱的指标。