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目的:研究结直肠癌患者外周血、肿瘤组织中TCRγδ/δ2的表达及影响因素,为进一步开展以TCRγδ/δ2为基础的免疫治疗提供依据。
方法:应用FCM技术,检测26例结直肠癌患者手术前后外周血中TCRαβ、TCRγδ、TCRδ2、细胞因子(INF-γ、IL-2、TNFα、IL-10、IL-15)、CEA、CAl99、CA242以及经典细胞免疫功能(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8、NK、CIK)的水平,与35例健康人群对照,同时检测切除标本中正常肠粘膜、癌旁和癌组织中TCRαβ、TCRγδ、TCRδ2的表达和细胞生物学变化(细胞周期变化、增殖指数、DNA倍体指数和细胞凋亡率)情况,并与临床特征结合,分析结直肠癌患者外周血及肿瘤组织中TCRγδ和TCRδ2的表达情况及影响因素。
结果:(1)26例结直肠癌患者外周血TCRγδ、TCRδ2和Thl/Th2细胞因子与正常对照组比较,显著升高(p<0.05),TCRγδ、TCRδ2在患者外周血中的表达水平分别为8.494±6.91%和7.15±6.74%,INF-γ(11.11±3.99pg/ml对103.95±103.48 pg/m1)和IL-2(4.69±0.81 Pg/ml对41.00±28.72pg/m1)升高约10倍,术后相应的各指标明显下降(p<0.05):而经典细胞免疫功能变化不明显;(2)26例结直肠癌患者外周血TCRγδ、TCRδ2水平与肿瘤T分期、淋巴结和远处器官转移、术前治疗无相关性(p>0.05),TCRγδ水平与CEA的异常呈负相关性,而CAl99和CA242则相N(p<0.05):(3)TCRγδ、TCRδ2在癌旁和癌组织中的水平分别为20.70±13.53%和16.524±18.05%,较正常肠粘膜组织高(p<0.05),且癌旁组织高于癌组织;(4)随结直肠癌患者外周血TCRδ2水平的升高,癌旁组织中TCRγδ、TCRδ2水平相应升高,而在高水平组(>5%)中,癌组织中的TCRγδFCRδ52水平反而降低;(5)随结直肠癌患者外周血TCRfδ2水平的升高,Thl细胞因子水平相应升高(p<0.05),而Th2细胞因子变化无显著性(p>0.05);在高水平组中,癌组织中的增殖指数升高达34.34±13.46%(p<0.05)。
结论:外周血TCR7γδ、TCRδ2在结直肠癌患者中增高明显。外周血TCR82的水平与Thl细胞因子、癌旁组织中TCRγδ、TCR82的水平和癌组织中增殖指数呈同步变化,为TCRδ2局部介入治疗提供了较好的理论依据和后继治疗创造条件。外周血TCR~i2的水平与癌组织中水平相关,若临床进行结直肠癌的外周血直接输注TCR32过继免疫治疗,虽不能提高局部的抗肿瘤活性,但可以校正Thl/Th2的漂移。