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膀胱癌是人体泌尿系统的恶性肿瘤。既往研究表明，VitaminK2被用作化疗辅助药物，但用药剂量大，短期抗癌效果不显著。本研究通过研究低剂量的VitaminK2和VitaminC联合用药体外处理膀胱癌细胞系，探寻新型膀胱癌治疗方案。
MTT实验表明，经50μM的VitaminK2和5mM的VitaminC联合用药处理，膀胱癌细胞系T24和EJ活力受到显著抑制。通过结晶紫染色等实验发现，联合用药显著抑制膀胱癌细胞的增殖。此外，通过流式细胞术检测细胞凋亡，结果证实联合用药显著诱导膀胱癌细胞凋亡。为确定联合用药处理的诱导凋亡作用，本研究采用蛋白免疫印迹技术检测凋亡相关蛋白，结果显示，经联合用药处理，膀胱癌细胞中凋亡蛋白Caspase-3发生显著激活，并导致PARP蛋白切割。为探索联合用药诱导膀胱癌细胞凋亡的相关机制，本研究通过流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平的变化，结果表明联合用药处理显著诱导肿瘤细胞内ROS水平的上升。使用ROS清除剂NAC处理细胞，联合用药诱导的细胞活力下降的现象得到明显回升，并且其所诱导的细胞凋亡被显著抑制。为探究线粒体通路是否参与联合用药诱导的膀胱癌细胞凋亡，本研究检测线粒体膜电势和形态的变化。流式细胞术检测线粒体膜电势发现，联合用药处理显著降低膀胱癌细胞线粒体膜电势。通过透射电镜观察细胞亚结构发现，联合用药处理有效破坏膀胱癌细胞线粒体形态。此外，本研究还证实联合用药处理会抑制人乳腺癌等多种细胞系细胞的活力。通过人正常肝细胞L02对联合用药进行安全性评估，发现联合用药对正常细胞活力无显著影响，不会诱导正常细胞凋亡。
综上，本研究发现，VitaminK2和VitaminC联合用药通过激活细胞内ROS水平，导致线粒体膜电势降低，激活Caspase-3介导的膀胱癌细胞系细胞凋亡，但对正常细胞没有影响。因此，该联合用药方案具备成为新型抗膀胱癌疗法的潜力。
MTT实验表明，经50μM的VitaminK2和5mM的VitaminC联合用药处理，膀胱癌细胞系T24和EJ活力受到显著抑制。通过结晶紫染色等实验发现，联合用药显著抑制膀胱癌细胞的增殖。此外，通过流式细胞术检测细胞凋亡，结果证实联合用药显著诱导膀胱癌细胞凋亡。为确定联合用药处理的诱导凋亡作用，本研究采用蛋白免疫印迹技术检测凋亡相关蛋白，结果显示，经联合用药处理，膀胱癌细胞中凋亡蛋白Caspase-3发生显著激活，并导致PARP蛋白切割。为探索联合用药诱导膀胱癌细胞凋亡的相关机制，本研究通过流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平的变化，结果表明联合用药处理显著诱导肿瘤细胞内ROS水平的上升。使用ROS清除剂NAC处理细胞，联合用药诱导的细胞活力下降的现象得到明显回升，并且其所诱导的细胞凋亡被显著抑制。为探究线粒体通路是否参与联合用药诱导的膀胱癌细胞凋亡，本研究检测线粒体膜电势和形态的变化。流式细胞术检测线粒体膜电势发现，联合用药处理显著降低膀胱癌细胞线粒体膜电势。通过透射电镜观察细胞亚结构发现，联合用药处理有效破坏膀胱癌细胞线粒体形态。此外，本研究还证实联合用药处理会抑制人乳腺癌等多种细胞系细胞的活力。通过人正常肝细胞L02对联合用药进行安全性评估，发现联合用药对正常细胞活力无显著影响，不会诱导正常细胞凋亡。
综上，本研究发现，VitaminK2和VitaminC联合用药通过激活细胞内ROS水平，导致线粒体膜电势降低，激活Caspase-3介导的膀胱癌细胞系细胞凋亡，但对正常细胞没有影响。因此，该联合用药方案具备成为新型抗膀胱癌疗法的潜力。