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分子印迹技术是在聚合物材料的合成过程中构建与模板分子在大小、形状和结构功能上都互补的特异性结合位点,该材料对模板有选择性结合能力,在分子识别中有着良好的应用前景。本文以乌头碱为模板,利用沉淀聚合法制备了乌头碱分子印迹微球。然后把已合成的乌头碱印迹微球,安定印迹微球和三唑仑印迹硅球应用于分离富集体液中目标物。论文的主要研究内容如下:
(1)以乌头碱为模板分子,甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,采用沉淀聚合法在不同种类和体积的致孔剂(甲苯,乙腈或甲醇不同比例混合)中合成分子印迹微球。利用红外光谱确定分子印迹微球的官能团,用扫描电子显微镜对印迹微球形貌进行了表征,而后确定选择甲苯作为合成印迹微球的致孔剂。将此聚合物微球作为吸附剂装入固相萃取柱,对分子印迹固相萃取(MISPE)的装载液,清洗液和洗脱液进行优化后,让其对乌头类和其它有毒生物碱进行吸附,并对人体血清和尿液中的乌头类生物碱进行分离富集。结果发现乌头碱分子印迹微球对乌头类生物碱有很高的选择性,其对乌头碱的吸附量为0.802 mg g-1。通过比较印迹微球和非印迹微球对乌头碱的吸附量的差别算出印迹因子为4.76。在做人体血清样品时,印迹微球能对血清中三种乌头类生物碱进行很好的分离富集且能排除其它杂质的干扰进行色谱检测。测得乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的检测限分别为16.7、10.2、18.3 ng mL-1。对于干扰更加严重的人体尿液样品,通过对固相萃取清洗液的优化,乌头碱的回收率达到了86.4％。该印迹微球作为固相萃取吸附剂可以用于乌头碱中毒临床检测。
(2)将安定分子印迹微球与固相萃取装置联用,探究出最优的分子印迹固相萃取条件。利用其分离富集人体血清和尿液中安定及其主要代谢产物(去甲安定)。尿液中安定的回收率都高于87％,去甲安定的回收率也在88％以上,安定和去甲安定的检测限分别为21.5、24.5 ng mL-1。
(3)将三唑仑分子印迹硅胶微球作为固相萃取柱的填料,对人体尿液样品中的三唑仑及其代谢产物Q.羟基三唑仑进行分离富集。与C18-SPE和直接液相进样比起来,经过MISPE处理后得到了基线分离的液相色谱图,而且三唑仑和α-羟基三唑仑的回收率比较高。三唑仑和α-羟基三唑仑的检测限分别为30、33ng mL-1。