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目的:
观察芪冬活血饮对急性肺损伤小鼠及人肺微血管内皮细胞的保护作用，并探讨小窝蛋白-1及细胞因子等在其中的可能机制，为临床应用提供理论依据。
方法:
本实验分两个部分：1．芪冬活血饮对急性肺损伤小鼠的干预作用及机制研究：将60只雌性小鼠随机分为5组：空白组，模型组，芪冬活血饮低剂量组，芪冬活血饮高剂量组，地塞米松组，用不同浓度及药物灌胃小鼠5天后行LPS气管滴注造模ALI，24h后处死小鼠取血清、肺泡灌洗液及肺组织，分别行液相芯片多细胞因子检测法及ELISA法检测细胞因子浓度，RT-PCR、免疫组化检测Caveolin-1等信号通路mRNA及平均光密度值，病理镜下观察疗效;2．芪冬活血饮药物血清对脂多糖刺激下人肺微血管内皮细胞E-selectin和IP-10表达的影响：将细胞随机分为5组，空白组，LPS组，正常大鼠血清+LPS组，5%药物血清+LPS组，10%药物血清+LPS组，用不同浓度的药物血清培养HPMEC 4h后，再加入1μg/ml LPS刺激HPMEC，用RT-PCR方法检测E-selectin和IP-10的mRNA表达，ELISA法检测细胞上清液中E-selectin和IP-10蛋白水平。
结果:
1．病理结果示模型组小鼠肺充血、水肿严重，肺泡结构破坏，肺泡内广泛积液水肿，肺泡变小伴出血，肺泡间隔增厚，肺实质间质内均见大量炎性细胞浸润，治疗组小鼠肺充血、水肿减轻，肺泡结构破坏减轻，炎性细胞浸润减少，地塞米松组优于芪冬活血饮高剂量组，高剂量组优于低剂量组；2．ELISA法及液相芯片多细胞因子检测结果示肺泡灌洗液及血清中G-CSF、GM-CSF、IFN-γ、IL-1β、IL-5、IL-6、IL-7、IL-15、IL-17、IP-10、KC、MCP-1、MIP-1α、MIP-1β、RANTES、TNF-α、IL-12p70、IL-12、IL-1α等促炎因子及IL-10、IL-13等抑炎因子模型组高于空白组(P＜0.05)，治疗组有抑制作用，地塞米松作用强于高剂量组，高剂量组强于低剂量组(P＜0.05); 3.RT-PCR检测示IL-6、TNF-α、 IL-1β、caveolin-1 mRNA模型组高于空白组(P＜0.05)，治疗组有抑制作用，IL-6、TNF-α地塞米松组作用最佳，低剂量组作用最弱，IL-1β地塞米松组作用最佳，高剂量组作用最弱(P＜0.05)；4．免疫组化结果示MyD88、caveolin-1在组织上表现为强阳性，空白组较弱，模型组较强，平均光密度值较高（P＜0.05），治疗组略有减弱，平均光密度值降低，各组之间无明显差异（P＞0.05），eNOS在组织上表现为强阳性，镜下及平均光密度值各组间无明显差别(P＞0.05); 5.LPS刺激HPMEC细胞后E-selectin和IP-10的表达和分泌明显高于空白对照（P＜0.05），而芪冬活血饮药物血清则能降低该类细胞因子的表达和释放（P＜0.05）。
结论:
1．LPS气道滴注可诱导并成功建立急性肺损伤小鼠模型，并引起炎症因子/抗炎因子失衡，激活TLR4/Caveolin-1信号通路；2．芪冬活血饮可减轻急性肺损伤小鼠的肺损伤程度；3．芪冬活血饮可抑制急性肺损伤小鼠血清、肺泡灌洗液及肺组织中G-CSF、GM-CSF、IFN-γ、IL-1β、IL-5、IL-6、IL-7、IL-10、IL-15、IL-17、IP-10、KC、MCP-1、MIP-1α、MIP-1β、RANTES、TNF-α、IL-13、IL-12p70、IL-12、IL-1α等细胞因子的释放；4．芪冬活血饮可通过抑制caveolin-1和MyD88的表达从而阻导ALI TLR4/Caveolin-1信号转导通路；5．芪冬活血饮药物血清能明显抑制HPMEC的活化，降低E-selectin和IP-10的释放，减轻炎症损伤，保护内皮细胞。
观察芪冬活血饮对急性肺损伤小鼠及人肺微血管内皮细胞的保护作用，并探讨小窝蛋白-1及细胞因子等在其中的可能机制，为临床应用提供理论依据。
方法:
本实验分两个部分：1．芪冬活血饮对急性肺损伤小鼠的干预作用及机制研究：将60只雌性小鼠随机分为5组：空白组，模型组，芪冬活血饮低剂量组，芪冬活血饮高剂量组，地塞米松组，用不同浓度及药物灌胃小鼠5天后行LPS气管滴注造模ALI，24h后处死小鼠取血清、肺泡灌洗液及肺组织，分别行液相芯片多细胞因子检测法及ELISA法检测细胞因子浓度，RT-PCR、免疫组化检测Caveolin-1等信号通路mRNA及平均光密度值，病理镜下观察疗效;2．芪冬活血饮药物血清对脂多糖刺激下人肺微血管内皮细胞E-selectin和IP-10表达的影响：将细胞随机分为5组，空白组，LPS组，正常大鼠血清+LPS组，5%药物血清+LPS组，10%药物血清+LPS组，用不同浓度的药物血清培养HPMEC 4h后，再加入1μg/ml LPS刺激HPMEC，用RT-PCR方法检测E-selectin和IP-10的mRNA表达，ELISA法检测细胞上清液中E-selectin和IP-10蛋白水平。
结果:
1．病理结果示模型组小鼠肺充血、水肿严重，肺泡结构破坏，肺泡内广泛积液水肿，肺泡变小伴出血，肺泡间隔增厚，肺实质间质内均见大量炎性细胞浸润，治疗组小鼠肺充血、水肿减轻，肺泡结构破坏减轻，炎性细胞浸润减少，地塞米松组优于芪冬活血饮高剂量组，高剂量组优于低剂量组；2．ELISA法及液相芯片多细胞因子检测结果示肺泡灌洗液及血清中G-CSF、GM-CSF、IFN-γ、IL-1β、IL-5、IL-6、IL-7、IL-15、IL-17、IP-10、KC、MCP-1、MIP-1α、MIP-1β、RANTES、TNF-α、IL-12p70、IL-12、IL-1α等促炎因子及IL-10、IL-13等抑炎因子模型组高于空白组(P＜0.05)，治疗组有抑制作用，地塞米松作用强于高剂量组，高剂量组强于低剂量组(P＜0.05); 3.RT-PCR检测示IL-6、TNF-α、 IL-1β、caveolin-1 mRNA模型组高于空白组(P＜0.05)，治疗组有抑制作用，IL-6、TNF-α地塞米松组作用最佳，低剂量组作用最弱，IL-1β地塞米松组作用最佳，高剂量组作用最弱(P＜0.05)；4．免疫组化结果示MyD88、caveolin-1在组织上表现为强阳性，空白组较弱，模型组较强，平均光密度值较高（P＜0.05），治疗组略有减弱，平均光密度值降低，各组之间无明显差异（P＞0.05），eNOS在组织上表现为强阳性，镜下及平均光密度值各组间无明显差别(P＞0.05); 5.LPS刺激HPMEC细胞后E-selectin和IP-10的表达和分泌明显高于空白对照（P＜0.05），而芪冬活血饮药物血清则能降低该类细胞因子的表达和释放（P＜0.05）。
结论:
1．LPS气道滴注可诱导并成功建立急性肺损伤小鼠模型，并引起炎症因子/抗炎因子失衡，激活TLR4/Caveolin-1信号通路；2．芪冬活血饮可减轻急性肺损伤小鼠的肺损伤程度；3．芪冬活血饮可抑制急性肺损伤小鼠血清、肺泡灌洗液及肺组织中G-CSF、GM-CSF、IFN-γ、IL-1β、IL-5、IL-6、IL-7、IL-10、IL-15、IL-17、IP-10、KC、MCP-1、MIP-1α、MIP-1β、RANTES、TNF-α、IL-13、IL-12p70、IL-12、IL-1α等细胞因子的释放；4．芪冬活血饮可通过抑制caveolin-1和MyD88的表达从而阻导ALI TLR4/Caveolin-1信号转导通路；5．芪冬活血饮药物血清能明显抑制HPMEC的活化，降低E-selectin和IP-10的释放，减轻炎症损伤，保护内皮细胞。