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研究背景:子宫内膜癌是妇科常见的恶性肿瘤,近年发病率逐年增加,并呈年轻化趋势。化疗是子宫内膜癌主要的辅助治疗手段,用于晚期及复发患者、早期高危患者。化疗能有效延长生存期,降低复发率,减少远处转移。紫杉醇(Taxol,TAX)与铂类联合化疗已成为子宫内膜癌的一线化疗方案,疗效肯定,但随着用药时间的延长,耐药性的产生是肿瘤化疗失败的主要原因。因此,阐明化疗耐药机理,对逆转耐药以保证化疗的有效性和患者长期生存,具有重要意义。子宫内膜癌的耐药是多因素的,如果能在基因水平了解参与耐药的基因及相关耐药机制,就能为临床逆转耐药提供理论依据,从而提高子宫内膜癌化疗成功率。
目的:应用高通量AffymetrixHumanGerlomeU133Plus2.0Array,比较耐药细胞Ishikawal/Tax与亲代细胞Ishikawa间基因表达差异,筛查获得性子宫内膜癌紫杉醇耐药相关基因,为进一步探讨子宫内膜癌耐药机制及临床逆转耐药提供依据。
方法:取对数生长期Ishikawa及Ishikawa/TAX细胞,按Trizol一步法抽提细胞总RNA,使用QIAGENRneasykit进一步纯化总RNA,合成双链cDNA,生物素进行标记,应用AffymetrixHumanGenomeU133Plus2.0Array基因芯片,检测子宫内膜癌耐药细胞Ishikawa/TAX与敏感细胞Ishikawa,问基因表达谱的变化,选择差异表达基因,在genebank中明确差异表达基因的功能,寻找子宫内膜癌耐药相关基因。
结果:基因芯片结果显示:与敏感细胞Ishikawa相比,人子宫内膜紫杉醇耐药细胞Ishikawa/TAX有110条基因表达有显著性差异(ratio比值＞3),包括87个上调基因,23个下调基因,涉及了细胞信号传导和调控、细胞粘附分子、细胞代谢、转录调控等基因。其中与耐药相关的上调基因有FUBP1、CEACAM6、CYP1B1、S100A12,下调基因有TNFAIP3、DKK1、CD44等。
结论:某些基因的表达差异可能与子宫内膜癌紫杉醇化疗耐药相关。