具有羰基还原酶的菌株的筛选及其应用研究

来源 :中国科学院成都有机化学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:buctdai
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利用生物催化方法进行光学活性化合物的制备已成为当今的一个研究热点。微生物催化还原前手性的羰基可以得到手性醇,可以用于很多光学活性化合物的合成中间体。本论文利用菌株全细胞催化一些β-二酮和α-卤代酮的还原反应,并利用这些反应合成了一些用途广泛的手性中间体。   通过筛菌发现Yarrowia,lipolytica CGMCC2.1502和Trichosporon cutaneumCGMCC2.25能催化还原苯甲酰丙酮,分别得到(R)-3-羟基-1-苯丁酮和(S)-3-羟基-1-苯丁酮,该催化反应具有高度的区域选择性和对映选择性。系统研究了各反应条件对这两菌株催化还原1-苯-1,3-丁二酮还原的影响,得到了适合两菌株催化反应的最佳条件,成功制备了高光学活性的(R)-/(S)-3-羟基-1-苯丁酮。   筛选出能催化α-氯代间氯苯乙酮还原得到高光学活性(R)-醇(>99%)的高活性菌株Saccharomyces cerevisiae CGMCC2.396,并系统研究各反应条件(反应时间、葡萄糖、有机溶剂、温度、反应体系pH值和底物浓度)对S. cerevisiae CGMCC2.396催化还原α-氯代间氯苯乙酮的影响,发现葡萄糖和有机醇溶剂对反应的影响很大,在缺乏它们的情况下S.cerevisiae CGMCC2.396对该反应基本没有催化活性。在最优反应条件下,利用该菌株催化还原系列α-卤代苯乙酮化合物,取得了很好的结果。总结了底物上不同取代基团对该菌株催化还原活性的影响,一般来说S. cerevisiae CGMCC2.396催化还原α-氯代化合物的活性较α-溴代化合物要高,对与苯环上的间位取代底物较对位取代底物的催化活性要高;同时,作者还探讨了该菌株的催化还原机理,发现该菌株催化还原反应经过氢转移的过程实现对酮的还原。   本论文还研究了(±)-1-(3-氯苯基)-2-氯-乙醇的酶拆分反应,通过筛选发现Lipase TL IM能较好拆分该醇得到相应ee值>99%的(S)-酯,对该酶拆分反应体系进行了系统的研究,得到该酶拆分的最佳反应条件。
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