【摘 要】
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研究首先研究了C3P4是由110Kd和27Kd两亚基组成.接着应用蛋白酶解方法(PCBA)发现大鼠前列腺,脑和睾丸中的C3P4很可能具有相同的结构.最后还用硫酸铵分级分离法和离子交换柱法
【机 构】
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中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所
【出 处】
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中国科学院上海生物化学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学
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研究首先研究了C3P4是由110Kd和27Kd两亚基组成.接着应用蛋白酶解方法(PCBA)发现大鼠前列腺,脑和睾丸中的C3P4很可能具有相同的结构.最后还用硫酸铵分级分离法和离子交换柱法对C3P4进行了初步纯化研究.为发现更多的附睾特异基国研究者用差减杂闪方法以附睾为tester,睾丸为driver构建了一个附睾特异的差减cDNA文库.作猴附睾,睾丸,肝和脑cDNA探针去进行两轮筛选,最后在667个来自该差减文库的cDNA克隆中,有424个克隆是附睾+睾丸-肝-脑-.应用杂交测序战略,测定了100个克隆的序列,覆盖了这424个附睾特异克隆,发现38个未知的互不重叠的克隆.从中选择11个克隆进行Northern杂交研究,四个克隆在人附睾中能杂交出信号.用上述11个克隆cDNA标记探针去筛选所构建的cDNA文库,得到了这些克隆的近乎全长cDNA,其中7个含 有确定的完整的开放阅读框架(ORF).对这些序列进行分析表明,这些cDNA是全新的,在其它物种中也未被研究.在这11个基因中,9个推测编 码分泌蛋白10个可能编码糖蛋白.这些附睾特异新基因的发现为研究精子在附睾中成熟机制和男性避孕打下基础.
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